4-氨基安替比林试剂贮存所产生影响的探讨

高美林

摘 要：采用 4-氨基安替比林分光光度法测定挥发酚时，实验员发现试剂开封贮存时间过长会出现从淡黄色晶体变成淡红色块状现象，同时会空白吸光度值也越来越高，导致检出限过高，这个问题也是困扰很多实验员。在多次试验的基础上，本文从试验原理、工作曲线的绘制方法、空白和标准样品数据对比等方面进行了归纳总结，为提高测试结果的准确度提供了方法参考。

关键词：挥发酚;4-氨基安替比林;检出限;空白

HJ 503-2009《水质 挥发酚的测定 4-氨基安替比林分光光度法》的测定方法有萃取分光光度法和直接分光光度法两种。萃取分光光度法适用于地表水、地下水、饮用水，此方法具有地检出限低，精密度高的特点，经常被检测人员所使用。但是操作中比直接分光光度法难度会高很多，按照方法标准规定的操作步骤有时候会发生空白值过高的现象，这是由于在测试过程中产生了试剂发红起块氧化现象，下面通过不同的开封贮存时间的试剂分别来验证一下。

1 方法原理

被蒸馏出的酚类化合物，于pH（10.0±0.2）介质中，在铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林反应，生成橙红色的安替比林染料，用三氯甲烷萃取后，在460nm波长下测定吸光度。

2 工作曲线的绘制方法

①于一組8个分液漏斗中，分别加入100mL无酚水，依次加入0.00，0.25，0.50，1.00，3.00，5.00，7.00和10.00酚标准使用液（1.00mg/L），再分别加水至250mL;②显色：将8个分液漏斗加2.0mL缓冲溶液，混匀，pH（10.0± 0.2），加1.5mL4-氨基安替比林溶液，混匀，再加1.5mL铁氰化钾溶液，充分混匀后，密塞，放置10min;③萃取：在上述显色分液漏斗中准确加入10.00mL三氯甲烷，密塞，剧烈振摇2min，将其放气，静置分层。用干脱脂棉或滤纸拭干分液漏斗颈管内壁，于颈管内塞一小团干脱脂棉或滤纸，将余下三氯甲烷直接放入光程为30mm的比色皿中;④2.4吸光度测定：于460nm波长，以三氯甲烷为参比，测定三氯甲烷层的吸光度值;⑤空白试验：用无酚水代替试样，空白应与试样同时测定;⑥依据HJ 503-2009《水质 挥发酚的测定 4-氨基安替比林分光光度法》中的方法绘制工作曲线，取放置开封2年的4-氨基安替比林试剂按照方法标准的附录B提纯方法，得出来的曲线表1;⑦依据HJ 503-2009《水质 挥发酚的测定 4-氨基安替比林分光光度法》中的方法绘制工作曲线，取放置开封半年的4-氨基安替比林试剂按照方法标准的附录B提纯方法，得出来的曲线表2。

3 试验数据对比

用开封不同时间的4-氨基安替比林试剂绘制的工作曲线公式计算出的测试结果见表3至表4。

由表1和表2数据分析得出，严格按照HJ 503-2009《水质 挥发酚的测定 4-氨基安替比林分光光度法》中的方法绘制工作曲线，分别用放置开封2年的与放置开封半年的工作曲线得出的公式，从数据可得出放置开封2年的4-氨基安替比林空白数据偏高。

由表3和表4数据分析得出，放置开封2年的4-氨基安替比林的标准样品吸光度偏高，结果均值高于范围内，放置开封2年的4-氨基安替比林本是淡黄色晶体，由于放置时间过长加之容易氧化起块状，颜色变成淡红色块状，引起空白颜色加深，吸光度值变大，检出限随之升高，无法达到0.0003mg/l的要求。所以在使用中必须要注意4-氨基安替比林的放置时间，颜色如变成淡红色色块状，应弃之不要再使用，以免影响样品的准确度。

操作中的注意事项：①每次做之前必须检查好分液漏斗有无漏水情况，一起做空白试验，操作中尽量使用同一规格的量程器皿;②加入试剂先后顺序不能颠倒;③加入量需准确无误至分液漏斗（标液、无酚水及试样）;④放置时间10min让其充分反应，剧烈振摇2min，力度每次尽量保持均匀，振摇过程中注意倒置用阀门放气，静置时间比放置时间稍长2min，让其分层明显再收集滤液，很多实验人员收集滤液会出现滤液不太够的情况，可能就是静置时间不够，或者棉絮太大块塞得太紧，收集时间过长会挥发，正确操作建议先吸干颈管内的水之后，然后塞一小块干脱脂棉;⑤购买试剂一定要做好相应的厂家验收。

4 结论

HJ 503-2009《水质挥发酚的测定4-氨基安替比林分光光度法》方法标准中未提及4-氨基安替比林试剂开封贮存时间所产生的影响，从数据中可看出即使在做好试剂提纯的情况下，也不宜过久存放，4-氨基安替比林存放时间过久会变成淡红色块状，从表1-表4数据表明试剂存放过久不但会导致空白值偏大，同时会影响准确度。

此外，在组织能力验证和实验室间比对的时候，组织方在作业指导书中对试剂开封保存时间和产生淡红色块状现象应该进行必要说明，对于容器的选择和无酚水的配制以及操作过程中必须严格按照方法标准。

参考文献：

[1]彭红艳，万建信.挥发酚测定中对4-氨基安替比林试剂的改进和探讨[J].资源节约与环保，2014（03）：115-115.

[2] HJ 503-2009.挥发酚的测定 4-氨基安替比林分光光度法[S].中华人民共和国国家环境保护部，2009.