儿童血清抗中性粒细胞胞浆抗体在相关性肾炎早期诊断中的临床意义

李清强

抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）会引起自身免疫性疾病。文献报道，ANCA 相关性小血管炎（AASV）是一组包括韦格纳肉芽肿、显微镜下多血管炎及特发性、坏死性、新月体性肾小球肾炎等疾病的综合征[1]，在西方国家是最常见的自身免疫性疾病之一[2]。肾脏为本病常见和致死性受累部位，ANCA 阳性的肾炎被称为ANCA 相关性肾炎，也称为原发性急进性肾小球肾炎，病情多进展迅速，如不及时治疗，往往造成不可逆的肾小球损害而导致终末期肾衰竭[3]。我国对此类的ANCA 相关性肾炎报道不多，近几年来北京大学第一医院肾脏内科新诊断出400 多例，说明该病在我国也不少见[1，2]。ANCA 已逐渐受到重视，为了探讨儿童肾病中ANCA 相关性肾炎检出率以及ANCA 测定在ANCA 相关性肾炎早期诊断的意义，本研究对296 例肾病儿童进行ANCA 检测并与肾病相关的生化检测情况进行初步分析和探讨。

1 材料与方法

1.1 样品选择样品来源于2018年1月～2019年12月门诊与住院的肾病儿童血清296 例，均具有肾病的一种或多种临床症状或临床已明确诊断为各种肾病。在该院体检正常的儿童血清样品50 例作为正常对照组，经ANCA 检测阴性的样品中随机选取50例作为阴性对照组。296 例血清样品经ELTSA 法测定ANCA 为阳性的37 例为ANCA 阳性组。

1.2 材料采用美国Zeus Scientific，Inc 公司生产的ANCA 酶免试剂盒。上海科华KHBst-360 自动多功能酶标仪。日本日立7170A 全自动生化分析仪。生化检测试剂是：Cr 试剂（日本第一化学株式会社）、Urea（中生北控生物科技股份有限公司）。

1.3 方法空腹抽血2ml，2 000rpm 离心5min 分离血清。ANCA 测定应用ELISA 法。原理：患者血清中含有的特异的抗体与反应板上包被的MPO 和PR-3混合抗原结合，加入酶结合物后与结合在固相上的抗体结合，经过孵育、洗涤洗去未结合的抗体及酶标结合物，加入底物后显色深浅与标本中抗体的浓度成比例。操作及结果判定严格按试剂盒说明书进行。生化指标（Cr、Urea）用酶法检测，操作严格按日立7170A 全自动生化分析仪操作规程进行。

1.4 统计学方法统计分析用SPSS 10.0 统计软件。检测结果用均数±标准差（±s）表示，组间比较用两独立样本t检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

296 例肾病患儿临床表现为肾病初期症状者186 例，其中血尿154 例，ANCA 阳性20 例（12.99%），浮肿32 例，阳性4 例（12.50%）。临床诊断为肾炎42 例，ANCA 阳性9 例（21.43%），肾病综合征68 例，阳性4 例（5.88%）。

ANCA 阳性组与ANCA 阴性组以及与正常对照在肾病生化指标（Cr、Urea）方面比较均无统计学差异（P均＞0.05）。

表1 ANCA 阳性与阴性及正常对照各组之间 血清Cr、Urea 水平比较

3 讨论

抗中性粒细胞胞浆抗体（Antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）是一簇能与人中性白细胞胞质成分反应，并与临床一些炎性疾病密切相关的多样化的自身抗体。最早是在坏死性或新月型肾小球肾炎患者的血液中发现的，是近10 多年来发展起来的一种诊断原发性小血管炎的重要检测项目[3，4]。ANCA 相关性小血管炎（ANCA associated systemic vasculitis，AASV）是西方国家最常见的自身免疫性疾病之一[5]，是一组可累及全身各脏器的疾病，也是继发因素所致快速进行性肾小球肾炎的常见原因[2]。本组结果显示ANCA 在肾病患儿中检出率达12.50%，可见儿童AASV 累及肾脏病变的可能性较大，应引起重视。而且有文献报道该病采用肾穿刺活检证实有一定的困难，寻求一种早期诊断的指标显得尤为重要[3]。目前临床已将ANCA 相关性肾炎归入原发性系统性血管炎的肾损害范畴，血清中存在抗中性粒细胞胞浆抗体正是本病最具特征的佐证[6]。本组研究中，ANCA 阳性组、ANCA 阴性组及正常对照组中血清的Cr、Urea 差异均无统计学意义，说明依靠血清生化指标是无法鉴别更无法诊断出ANCA 相关性肾炎，但能依靠ANCA 检测作出鉴别并对进一步的诊断起重要作用。从本实验结果表1可知ANCA 阳性组Cr 水平为（73.23±139.71）µmol/L，Urea 水平为（6.82±11.91）mmol/L（SD 值较大，这是由于该组有2 例肾衰的患者样品，其血清Cr 和Urea 含量较高而引致这种情况的出现）。这种情况反过来又更证明了Cr、Urea 不能反映ANCA阳性与阴性之间的差异，因为肾衰已不是肾病早期，肾衰患者标本可不计算在内，那么阴阳两组间的比较将更无差异。

本组研究还发现ANCA 阳性组37 例中临床诊断为肾衰的有两例，其发病率为5.4%（2/37），这与文献报道老年患者高达91.1%相差甚远，其原因可能是儿童肾脏的代偿能力较好，这提示我们ANCA相关性肾炎的疾病进程与预后儿童与成人可有所不同，他们之间的区别尚有待进一步的研究。

对于ANCA 相关疾病的发病机理尚未完全清楚，在一些体内外实验研究中发现，ANCA 是通过激活毛细血管中中性粒细胞、单核细胞，引起溶酶菌释放，导致大面积血管或组织损害；或ANCA 引发T 细胞介导的细胞免疫协同造成组织损伤（如造成肾小球肾炎、小血管炎等）的结果[3]。

因此，检测血清中ANCA 对ANCA 相关性肾炎的早期诊断、治疗与疗效分析都有重要的临床意义，特别是儿童患儿。儿童AASV 累及肾脏病变的可能性较高，即肾病患儿中有一部分为ANCA 相关性肾炎，血清中存在抗中性粒细胞胞浆抗体是本病最具特征的佐证，其发病机制、治疗及预后等有它自己的特点，应引起重视。

依靠血清生化指标无法鉴别或诊断出ANCA相关性肾炎，只能依靠ANCA 检测；在肾病早期血清中已可检测出ANCA，所以血清ANCA 检测在ANCA 相关性肾炎的早期诊断中具有重要意义。