消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠降血糖作用研究

蔡自立，马红梅，兰 卫*,赵翡翠

(1.新疆医科大学中医学院，新疆 乌鲁木齐 830011；2.新疆医科大学附属中医学院，新疆 乌鲁木齐 830002)

糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一组以血浆葡萄糖水平升高为特征的疾病群。近年来，随着社会与经济的高速发展，全球糖尿病的患病率和病死率已呈快速上升的趋势，成为世界上继肿瘤、心血管病之后第三种严重危害人类健康的疾病[1]。据 2015年国际糖尿病联盟(IDF)公布的数据显示，全球糖尿病患者达 4.15 亿人[2]。在我国患糖尿病人群中，以2型糖尿病(T2DM)为主，占 93.7%，其中成人占90%[3]。

消渴健脾胶囊是由葛根、白术、栀子、丹参、木瓜等13味药材组成的复方制剂，具有健脾、消渴等功效，主要用于糖尿病的辅助治疗。作者通过小鼠体重、空腹血糖(FBG)值、糖耐量(GT)、糖化血清蛋白(GSP)水平及血清胰岛素(INS)水平等指标的测定，探究消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠的降血糖作用。

1 实验

1.1 材料、试剂与仪器

昆明种雄性小鼠，体重(20.0±2.0) g，购自新疆医科大学动物实验中心[生产许可证SYXK(新)2011-0001]。

盐酸二甲双胍(批号180835)，北京京丰制药集团有限公司；柠檬酸(批号6261041)、柠檬酸钠(批号1114A0121)、链脲佐菌素(STZ，批号1228M035)，北京索莱宝科技有限公司；小鼠血清胰岛素(INS)检测试剂盒(ELISA法)(批号07/2019)，上海将来实业有限公司；糖化血清蛋白(GSP)测试盒(批号A037-2-1)，南京建成生物工程研究所；消渴健脾胶囊(批号20190503)，新疆金世康药业有限公司。

DZKW-S-4型水浴锅，北京永光眀医疗仪器有限公司；AB135-S型电子天平，瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司；MULTI-SKAN型酶标仪，美国Thermo Scientific公司；安稳血糖仪，三诺生物传感股份有限公司。

1.2 动物造模与分组

取昆明种雄性小鼠75只，适应性饲养7 d后，随机抽取10只为正常对照组，其余65只小鼠腹腔注射65 mg·kg-1STZ溶液 (STZ粉末用pH值4.5的构椽酸缓冲溶液溶解)，3 d后腹腔注射90 mg·kg-1STZ溶液，7 d后尾静脉采血测定血糖，血糖值>11.1 mmol·L-1者即为造模成功。将50只2型糖尿病模型小鼠随机分为模型组，阳性组(盐酸二甲双胍150.00 mg·kg-1)，消渴健脾胶囊低(238.88 mg·kg-1)、中(477.75 mg·kg-1)、高(955.50 mg·kg-1)剂量组，每组10只；正常对照组和模型组给予0.1 mL·(10 g体重)-1蒸馏水，连续给药28 d。

1.3 指标测定

记录给药前及给药后28 d内的小鼠体重，并每7 d检测小鼠禁食12 h后空腹血糖值。末次给药后，小鼠灌胃葡萄糖水溶液(2 g·kg-1)进行葡萄糖负荷，分别在负荷前(0 min)及负荷后30 min、60 min、120 min剪鼠尾取血，用血糖仪测定血糖值。将小鼠麻醉后颈动脉取血，分离血清，检测GSP和INS水平。

1.4 统计分析

2 结果与讨论

2.1 消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠体重的影响(表1)

从表1可知，与正常对照组比较，给药7 d后，模型组小鼠体重显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05)；与模型组比较，给药28 d后，盐酸二甲双胍组、消渴健脾胶囊各剂量组小鼠体重显著增加，差异具有统计学意义(P<0.05)。

2.2 消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠空腹血糖值的影响(表2)

从表2可知，与正常对照组比较，模型组小鼠的空腹血糖值极显著升高，差异具有统计学意义(P<0.01)；与模型组比较，给药28 d后，盐酸二甲双胍组、消渴健脾胶囊各剂量组小鼠的空腹血糖值显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。

表1 消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠体重的影响

表2 消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠空腹血糖值的影响

2.3 消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠口服葡萄糖耐量的影响(表3)

表3 消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠口服葡萄糖耐量的影响

从表3可知，与正常对照组比较，模型组小鼠的血糖值、曲线下面积(AUC)极显著升高，差异具有统计学意义(P<0.01)；与模型组比较，消渴健脾胶囊中、高剂量组小鼠的血糖值、AUC值均显著下降，差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。

2.4 消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠GSP、INS水平的影响(表4)

从表4可知，与模型组比较，消渴健脾胶囊各剂量组小鼠GSP水平显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)；消渴健脾胶囊高剂量组小鼠INS水平显著升高，差异具有统计学意义(P<0.05)，但促进作用不及盐酸二甲双胍组。

表4 消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠GSP、INS水平的影响

2.5 讨论

用STZ诱导2型糖尿病模型的机制是选择性地破坏胰岛β细胞，模型建立后，稳定性好，动物存活率高，是评价药物疗效及安全性最常用的糖尿病模型之一[4]。糖耐量是诊断糖尿病和评价药物治疗效果的指标之一，2型糖尿病的发生与糖耐量受损(IGT)有关，且与糖尿病慢性并发症的发生发展关系密切[5]。本研究表明，消渴健脾胶囊能够有效改善2型糖尿病小鼠的糖耐量，其中以中、高剂量组对糖耐量的影响显著。GSP为血清葡萄糖与白蛋白及其它血清蛋白分子N末端的氨基上发生非酶促糖化反应，形成的高分子酮胺结构可以有效反映患者7～21 d的血糖水平，不受临时血糖浓度波动影响[6]。

贺红梅等[7]研究表明，2型糖尿病患者在基础治疗+盐酸二甲双胍片的基础上予以消渴健脾胶囊，能更有效控制血糖水平，增强胰岛细胞功能，进而优化临床疗效。张亚琼[8]报道消渴健脾胶囊可降低脾虚湿盛型2型糖尿病患者血糖水平，明显改善IR程度，有效降低IL-6、TNF-α水平。贺红梅[9]研究表明，消渴健脾胶囊对维吾尔族痰湿体质2型糖尿病患者的中医症状有一定改善作用。李娜等[10]研究表明，消渴健脾胶囊可提高2型糖尿病患者机体对胰岛素的敏感性、改善胰岛素抵抗、降低炎性因子水平，进而有助于改善血糖水平及临床症状。肖艳等[11]研究表明，维吾尔族IGT患者在消渴健脾胶囊干预治疗下，糖尿病发生率降低。贺红梅等[12]研究表明，消渴健脾胶囊对维吾尔族2型糖尿病患者痰湿体质的治疗效果比单用西药效果好，干预期间无不良反应。马丹等[13]研究表明，消渴健脾胶囊能提高胰岛素敏感性，改善胰岛功能，降低血糖。邓德强等[14]研究表明，通过健脾活血化湿能够改善2型糖尿病患者胰岛β细胞功能，改善胰岛素抵抗，降低早期2型糖尿病患者血清炎症因子水平。

本研究中，消渴健脾胶囊中、高剂量组能显著降低糖尿病小鼠的GSP水平，促进INS的分泌，进一步说明消渴健脾胶囊具有降糖作用。其作用机理可能是，中药材中有些成分促进胰岛素分泌或有些成分降低胰岛素抵抗，使胰岛素进一步发挥作用。

3 结论

为研究消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠的降血糖作用，取75只昆明种雄性小鼠，除正常对照组10只外，其余小鼠腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病小鼠模型，将造模成功的2型糖尿病小鼠随机分为模型组，阳性组(盐酸二甲双胍150.00 mg·kg-1)，消渴健脾胶囊低(238.88 mg·kg-1)、中(477.75 mg·kg-1)、高(955.50 mg·kg-1)剂量组，每组10只，正常对照组和模型组给予0.1 mL·(10 g体重)-1蒸馏水，连续给药28 d后，测定小鼠体重、FBG值、GT、GSP水平及INS水平。结果表明，与模型组比较，给药28 d后，消渴健脾胶囊各剂量组小鼠体重显著增加，差异具有统计学意义(P<0.05)；消渴健脾胶囊各剂量组小鼠FBG值显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)；消渴健脾胶囊中、高剂量组小鼠GT显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)；消渴健脾胶囊各剂量组小鼠GSP水平显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)；消渴健脾胶囊高剂量组小鼠INS水平显著升高，差异具有统计学意义(P<0.05)。消渴健脾胶囊对糖尿病小鼠FBG值、GT、GSP水平有降低作用，提高INS水平，对链脲佐菌素所致2型糖尿病小鼠有一定的治疗作用，为今后的临床深入研究奠定了一定基础。