藏红花改善酒精性肝病患者的氧化应激作用及对Caspase-3、Bcl-2水平的影响*

徐 芳 施海东 马建民△ 张国哲

1.苏州大学附属张家港医院传染科 (江苏 张家港，215600) 2.江苏医药职业学院中药研究院

酒精性肝病是由于长期摄入过量酒精而引发的一种肝脏疾病，若不及时控制可发展为酒精性肝纤维化、酒精性肝硬化甚至肝癌[1]。越来越多的研究认为中医药是治疗酒精性肝病的有效疗法，可改善患者的临床症状、肝功能等，促进肝细胞的修复，并且联合西药干预能显著提高临床疗效[2,3]。藏红花属藏药草本，具有活血祛瘀、散郁开结、凉血解毒之功效。马安林等[4]认为藏红花可有效改善酒精和四氯化碳所引起的大鼠肝损伤，且可明显抑制脂质过氧化水平。本研究在常规治疗基础上加用藏红花辅助治疗酒精性肝病，取得满意效果。

1 临床资料

1.1 一般资料 选取2014年1月至2018年12月在苏州大学附属张家港医院诊断为酒精性肝病的患者120例。酒精性肝病诊断参照《酒精性肝病诊疗指南(2010年修订版)》[5]标准。纳入标准：①符合酒精性肝病诊断标准；②年龄20～70岁；③饮酒史>5年，且伴肝功能损害性指标变化；④入组前4周内未给予治疗；⑤依从性好，且自愿签署知情协议。排除标准：①伴严重心脑血管、造血系统等疾病；②伴病毒性肝炎等其他类型肝病；③药物、自身免疫等所致肝病；④已存在肝硬化；⑤治疗过程中配合性差者。按数字表法随机分为对照组和治疗组，每组60例，治疗过程中对照组1例患者因工作调动原因脱落。对照组59例，男38例，女21例；年龄44～62岁，平均(57.31±7.31)岁；平均饮酒史(30.11±7.79)年；酒精性脂肪肝45例，酒精性肝炎14例。治疗组60例，男40例，女20例；年龄43～61岁，平均(56.96±8.17)岁；平均饮酒史(29.87±8.51)年；酒精性脂肪肝48例，酒精性肝炎12例。两组患者临床资料差异无统计学意义(P>0.05)，有可比性。

1.2 治疗方法 两组患者均严格戒酒，饮食以低脂高蛋白为主，给予足量营养支持，补充维生素、叶酸等。对照组：依指南[6]给予常规措施，包括保肝、降酶等对症治疗，对凝血酶原时间-胆红素(Maddrey)评分>32分者给予泼尼松或泼尼松龙治疗，40～60 mg/d；治疗组：在对照组基础上给予藏红花1 g/d，用100 ml开水沏10～15 min，代茶服用，1次/d。两组患者均连续治疗8周。

1.3 观察指标 ①肝功能：清晨抽取患者空腹时静脉血约3 ml，3000 r/min离心15 min，将血清保存于-70 ℃，待统一检测；采取全自动生化分析仪测定天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBil)、谷氨酰氨基转移酶(GGT)水平。②氧化应激水平：血清采取与①同，采取酶联免疫吸附法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)水平。③血清半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)水平：血清采集同①，采取酶联免疫吸附法测定。

1.4 疗效评定标准 临床治愈：患者的症状完全消失，肝功能指标减少≥80%；显效：患者的症状基本消失，肝功能指标减少50%～80%；无效：未能达到上述标准[7]。总有效率=(临床治愈+显效)患者数/各组患者总数。

2 结果

2.1 两组患者肝功能比较 见表1。

表1 两组患者肝功能比较

2.2 两组患者临床疗效比较 见表2。

表2 两组患者临床疗效比较

2.3 两组患者血清SOD、GSH-PX和MDA水平比较 见表3。

表3 两组患者血清SOD、GSH-PX和MDA水平比较

2.4 两组患者血清Caspase-3、Bcl-2水平比较 见表4。

表4 两组患者血清Caspase-3、Bcl-2水平比较

3 讨论

酒精性肝病的病因为患者摄入过量乙醇。人体摄入的乙醇95%以上在肝内分解代谢，乙醇在肝代谢过程中将氧化型辅酶Ⅰ转化为还原型辅酶Ⅰ，提高了还原型辅酶Ⅰ在体内的水平，诱发肝氧化还原状态，对葡萄糖、脂质、蛋白质等物质的代谢产生不良影响，会促进脂肪酸、甘油三酯的合成，同时抑制线粒体的脂肪酸β-氧化，使甘油三酯大量沉积于细胞内[8]。乙醛是乙醇氧化代谢的主要产物，其化学反应性和毒性都强于乙醇，乙醛通过结合蛋白质形成自身抗原，激活免疫系统导致肝损害；乙醛也能够损伤线粒体和谷胱甘肽功能，抑制DNA的修复和DNA中胞嘧啶甲基化，诱导发生氧化应激和细胞的凋亡，导致肝损害[9]。

藏红花性味甘平，入心、肝经，具有活血祛瘀、散郁开结、凉血解毒的功效。现代药理学研究证实，藏红花的主要成分包括苦藏花素、藏红花苦素、藏红花醛、胡萝卜素类化合物、红花醛以及蒎烯等，在保护肝细胞、抵抗肝脏的纤维化方面发挥重要作用，此外在改善血液循环、抗脂质过氧化、调节免疫功能、抗肿瘤以及降低胆固醇等方面也效果良好[10]。Sheng等[11]的研究显示藏红花素是胰脂肪酶的竞争性抑制剂，通过抑制胰脂肪酶的活性降低人体对外源性甘油三酯的吸收，减少了脂肪酸的合成，增强肝脂酶活性，加速了甘油三酯的代谢，促进脂肪的分解产物-脂肪酸的排泄。在本研究中，治疗组患者治疗后肝功能指标AST、ALT、TBil、GGT明显低于对照组，表明藏红花辅助治疗能够进一步改善酒精性肝病患者的肝功能；疗效统计显示，治疗组患者的总有效率显著高于对照组，提示藏红花辅助治疗可提高酒精性肝病的临床疗效。

过量摄入酒精增加了活性氧(ROS)产物，提高了对体内的脂质、蛋白质、DNA的过氧化作用[12]；乙醛也可通过结合谷胱甘肽的巯基下降肝细胞的活性，刺激体内的炎症介质、内毒素过量释放，使肝脏发生氧化应激、脂质过氧化，对肝脏产生二次打击，加重肝细胞的炎性损伤[13]。藏红花不同部位提取物均发挥了不同程度的抗氧化活性，能明显减轻酒精及酒精四氯化碳所引起的肝损伤及其脂质过氧化病理反应[4]。在本研究中，治疗组患者血清SOD、GSH-PX水平显著高于对照组，MDA水平明显低于对照组，表明藏红花辅助治疗可有效改善酒精性肝病患者的氧化应激反应。

酒精性肝病患者的肝细胞发生氧化应激和脂质过氧化，促进活性氧产生增多，继发性引起体内抗氧化物质被不断消耗，使机体内的ROS过量生成、蓄积，进而破坏肝细胞的结构和功能，直接活化线粒体膜上的Bcl-2蛋白[14]；同时Bcl-2具有抗ROS的活性，故ROS产生增多可经负反馈调节途径促进Bcl-2表达增加，二者比例失调后会进一步增加RSO产生[15]。Caspase-3是哺乳动物细胞凋亡的关键蛋白酶，酒精性肝病过程中所引起的肝脏氧化应激反应也会通过调控细胞凋亡相关因子Bcl-2表达，活化Caspase-3，放大蛋白酶级联切割反应，诱导肝细胞走向凋亡[16]。梅夏齐等[17]的研究发现藏红花可有效改善四氯化碳橄榄油溶液所引起的大鼠肝纤维化，而通过调节Caspas-3、Bcl-2的表达可能是其发挥抗肝纤维化作用的途径之一。在本研究中，治疗组患者血清Caspase-3、Bcl-2水平显著少于对照组，提示藏红花可能通过调节Caspase-3、Bcl-2水平，对酒精性肝病患者发挥治疗作用。

综上所述，在常规治疗基础上藏红花可有效改善酒精性肝病患者的肝功能，提高临床疗效，改善氧化应激水平以及下调Caspase-3、Bcl-2水平可能是其疗效途径之一。