老年乳腺癌组织中CK5/6表达与肿瘤分期及淋巴结转移的相关性

李廷超 勾江婵

(遵义医科大学 1第三附属医院，贵州 遵义 563000；2第一附属医院)

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，在世界的发病率相对较低，但在我国已成为严重威胁中国女性身心健康的肿瘤之一，其增长速度惊人，与女性生活习性、情绪、生活压力等具有一定的相关性〔1〕。乳腺癌主要是由乳腺腺泡细胞或乳腺导管细胞非正常分裂导致的恶性肿瘤，其不仅侵犯乳房，随着病情进展，还会发生转移，如转移至淋巴结，主要以腋下淋巴结为主，远端脏器转移，如肺部、骨骼、肝脏等，严重影响机体健康，甚至造成患者死亡〔2〕。乳腺癌的死亡率呈逐年上升趋势，特别是45岁后的发病率更高，且死亡率也随着年龄的增高而升高，因此对乳腺癌进行早期诊断与治疗，对延长患者生存时间与生存期质量具有重要意义〔3〕。细胞角蛋白(CK)是分子标志物之一，主要存在于上皮细胞的细胞质与细胞核中，能够有效维持细胞支架的中间纤维蛋白，临床通常将CK5/6表达情况视为乳腺癌患者远期预后的独立危险因素〔4，5〕。本文旨在探究CK5/6表达与肿瘤分期及淋巴结转移之间的相关性。

1 资料与方法

1.1纳入对象 本研究严格遵循医学伦理委员会审核的相关标准，在获得患者或家属的同意后翻阅患者病历资料。回顾性分析2017年1月至2018年1月遵义医科大学第三附属医院收治的78例乳腺癌老年患者的临床资料，皆女性，年龄60～78岁，平均(69.45±7.56)岁；病程4～26个月，平均(13.42±6.75)个月；肿瘤直径1～7 cm，平均(4.12±1.23)cm。

1.2入选标准 (1)纳入标准：①符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范(2013版)》〔6〕诊断标准；②年龄≥60岁；③女性患者；④首次发病；⑤患者入院前未接受辅助放化疗或内分泌治疗；⑥行乳腺癌切除术；⑦临床资料完整。(2)排除标准：①预计生存期<6个月；②心、脑、肾等重要脏器功能受损者；③精神认知功能障碍者。

1.3肿瘤分期〔7〕采用TNM分期法，其中T表示原发性肿瘤组织，N表示淋巴结，M表示远处转移情况，之后再根据病灶大小、浸润程度、在字母后边标价0～4，代表肿瘤的发展程度，其中0表示无，1表示小，4表示大，有远处转移用M1表示，无远处转移用M0表示。

1.4淋巴结转移 均进行淋巴结影像学检查，对比影像学检查结果判定是否发生淋巴结转移情况，正常淋巴结呈小肾形，表面包膜光滑、圆润，皮质回声均匀、回声较低，淋巴结髓质回声稍高，上呈细条状，门部位于淋巴结一端或一侧；恶性淋巴结：形状更接近于卵形或椭圆形，皮质不均匀，且呈现向心性互溶现象。

1.5采用免疫组织化学染色法检测CK5/6蛋白表达 乳腺癌组织标本采用石蜡包埋，并制成4 μm组织切片，脱蜡后在高温高压下修复抗原，CK5/6一抗工作浓度为1∶60，另取正常乳腺组织标本切片作为阴性对照，在高倍显微镜下(400倍视野)准确观察切片着色阳性细胞的百分比情况判定CK5/6表达。CK5/6表达常位于细胞质，当视野内出现棕黄色的肿瘤细胞≥5%时，即判定为CK5/6阳性，当视野内出现棕黄色的肿瘤细胞<5%时，即判定为CK5/6阴性。

1.6统计学方法 应用SPSS20.0统计学软件进行χ2检验，秩和检验，Pearson相关性检验。

2 结 果

2.1CK5/6表达情况 TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移的CK5/6阳性表达率显著较高(P<0.001)。见表1。

表1 不同TNM分期与淋巴结转移CK5/6阳性表达〔n(%)〕

2.2CK5/6的表达与肿瘤分期及淋巴结转移的相关性 CK5/6阳性表达与肿瘤分期(r=0.458，P<0.001)及淋巴结转移均呈正相关性(r=0.247，P<0.001)。

3 讨 论

乳腺癌治疗主要以手术为主，放化疗为辅，若患病后不能及时有效地控制病情进展，癌细胞入血、淋巴，则会伴随血液循环或淋巴转移至其他部位，故手术辅以放、化疗，对控制病情进展，延长患者术后生存时间及生存质量具有重要意义〔8，9〕。在乳腺癌的诊断与预后的判定中，分子标志物扮演着不可或缺的角色。乳腺肿瘤的细胞起源与基因表达具有高度一致性，其被认为是影响乳腺癌治疗与预后的重要影响因素。CK5/6被认为是乳腺基底样细胞特异性的表达产物，其在临床乳腺癌的预后判定中具有重要意义〔10〕。

CK属于较为复杂的家族蛋白，主要存在于上皮细胞内的包骨架中间丝蛋白中，受细胞分化调控，不同的组织与器官表达均不同。恶性肿瘤细胞常常保留其起源细胞的类型的骨架中间丝蛋白表达的特异性，因此临床常通过检测CK表达来判定肿瘤组织学的具体来源〔11～13〕。临床根据CK的分子量高低将其分为高分子量CK与低分子量CK，高分子量CK主要存在于上皮组织的基底层中。CK家族蛋白主要是由CK1-CK20不同分子量组成，其不在正常的造血组织中表达，同时亦表明，在外周血中检测出CK基因转录酶则表明机体有乳腺癌细胞的存在〔14～16〕。乳腺癌临床分型主要分为腺腔型、基底细胞样型、正常乳腺样型与人类表皮生长因子受体(HER)2过表达型，其中基底样细胞乳腺癌是乳腺癌中级别较高的一种，其中多为浸润性导管癌，偶有不典型或典型髓样癌、化生性癌、腺样囊性癌，这些常呈现分子物质高表达现象，预后较差；除此之外，其具有较高转移率与复发率，且该类老年患者，即使淋巴结监测呈阴性，患者的复发率与死亡率仍较高。江科等〔17〕通过采用免疫组织化学EnVision二步法对347例三阴性乳腺癌患者病灶组织CK5/6进行检测，CK5/6表达与淋巴结转移呈正相关性，表明CK5/6表达阳性是三阴性乳腺癌患者预后的重要危险因素。刘中正等〔18〕通过整理40例女性三阴性乳腺癌患者的切除病理组织及临床相关病理资料，采用免疫组化染色法检测CK5/6的表达情况，结果表明CK5/6可作为三阴性乳腺癌患者早期血性转移的分子标志物，与此同时也为三阴性乳腺癌预后不良机制提供研究方向。本研究虽明确了老年乳腺癌患者乳腺癌组织中CK5/6的表达与肿瘤分期及淋巴结转移的相关性，但其属于回顾性研究，且因时间关系，纳入的样本数量较少，且并未深入分析患者预后与CK5/6之间的相关性。希望在未来能够就此展开大样本、多中心的前瞻性深入研究，旨在预测乳腺癌患者病情的严重程度，以为患者早期的治疗方案提供有力依据。