红拂玫瑰外植体的最佳消毒时间

赵映洁，马金凤，周玉蓉，魏家旺，韩正兰

(兰州新区现代农业发展研究院有限公司，甘肃 兰州 730300)

玫瑰属蔷薇科蔷薇属小灌木，对环境适应性强，喜温暖凉爽的气候和充裕的阳光，耐寒、耐旱[1]。玫瑰含有丰富的香茅醇等香味物质和大量维生素、色素，可作为食品、化妆品、香料、色素及药物的原料[2]。研究玫瑰的植物组织培养技术为其快速繁殖和新品种的选育提供了新途径，能产生较高的经济价值[3]。红拂是目前市场上最为流行的红玫瑰品种之一，广泛应用于庆典、婚礼等场地。因此，建立红拂玫瑰枝条消毒体系，为建立其以枝条为外植体的离体再生体系奠定基础，对红拂玫瑰快速繁殖，满足市场需求有重要现实意义。

1 材料与方法

1.1 红拂玫瑰枝条

采自兰州新区现代农业示范园红拂玫瑰当年生、长相健壮的幼嫩枝条。

1.2 枝条培养基

试验用枝条培养基为在MS培养基中加琼脂7.2 g/L，2%蔗糖，pH为5.8，121℃高压蒸汽灭菌20 min，备用。

1.3 枝条消毒处理

枝条剪成2～3 cm的短枝，保证每个短枝至少有1个侧芽，自来水流动冲洗2 h，无菌水冲洗3次，75%酒精浸泡30 s，然后置于10% NaClO分别处理5 min、10 min和15 min，迅速倒掉消毒液，无菌水浸泡6次，每次浸泡1 min，放在已灭菌的滤纸上吸干水分，然后置于MS培养基上，暗培养7 d后统计污染率。每个处理重复3次。

1.4 数据处理

利用Microsoft Excel 2013进行数据处理与图表制作。

2 结果与分析

由图1可见，枝条污染率随消毒时间延长而降低，当消毒时长为5 min时污染率最高，为31%；消毒时间为10 min时，污染率为9%；消毒时间为15 min时，污染率最低，仅5%。枝条生长状态随消毒时间延长而表现变差，特别是当消毒时间延长至15 min时，对枝条伤害最大，褐化最严重。

3 小结与讨论

前人研究表明，消毒液浓度越高，消毒时间越长，污染率越低[4-6]，消毒时间越长对外植体造成的伤害越大。试验发现，消毒液浓度一定时，消毒时间越长，污染率越低，但对枝条的伤害越大，这与前人

的研究结果一致[7]。认为红拂玫瑰枝条用10% NaClO消毒10 min，消毒效果最佳，外植体生长状态最好。