丙泊酚注射液对靶动物犬的安全性评价

王 琴，曾少群，石达友，岳 峰*

(1. 广东嘉博制药有限公司，广东清远 511517；2. 华南农业大学兽医学院，广州 510642)

丙泊酚(Propofol)是一种新型烷基酸类短效静脉麻醉药，具有起效迅速、诱导平稳、恢复完全、无蓄积性等优点[1-2]。在宠物临床中，采取适宜的麻醉方案可消除动物疼痛，确保诊断、治疗及外科手术的顺利开展[3]。1996年丙泊酚注射液获FDA批准用于犬诱导麻醉与麻醉维持，与其他动物麻醉药相比，丙泊酚注射液麻醉效果好且不良反应少[4-5]，因此广泛应用于临床诊断中动物镇静及小裂伤缝合、子宫蓄脓、肿瘤切除、绝育等多种外科手术的麻醉[6]。为考察宠物用新兽药丙泊酚注射液对靶动物犬的安全性，本研究参照《宠物用药物对靶动物安全性试验指导原则》相关要求[7]开展试验，通过考察不同剂量丙泊酚注射液对试验犬的诱导麻醉效果、各项生理指标及组织学的影响，记录试验期间不良反应等异常情况，为其临床安全用药及注意事项提供参考。

1 材料与方法

1.1 仪器设备 XS-1000I全自动血液细胞分析仪，希森美康医用电子(上海)有限公司；BS-380全自动生化分析仪，深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司；Masimo Radical 7血氧心率监护仪：美国迈心诺公司；Vet20兽用血压计，顺泰医疗器械(深圳)有限公司；JX7800A动物呼吸麻醉机：北京金新斯盛远科技有限公司；GM1358噪音计，深圳市聚茂源科技有限公司。

1.2 受试药物 丙泊酚注射液，批号：160501，规格：20 mL∶200 mg，广东嘉博制药有限公司。

1.3 试验动物 健康贵宾犬32只，18～30月龄，雌雄各半，体重约4.0±0.5 kg，由广州雷米高犬场提供，基础日粮不含任何药物添加剂，自由采食和饮水，饲养1周后经临床检查为健康的作为试验犬。

1.4 分组及给药 试验犬随机分成4组，每组8只，雌雄各半，饲养观察1周，临床观察健康后开展试验，试验前12 h禁食，6 h禁水，试验分组及给药方案见表1。

1.5 试验观察指标

1.5.1 临床观察 试验过程中观察麻醉后试验犬气管插管情况及临床表现，根据试验犬的吞咽、闭眼、痛觉、四肢活动等反射指标[8]，对诱导麻醉深度(生物反射迟钝程度、镇静效果、镇痛效果、肌松效果)进行评分[9]，监测心率、血氧饱和度及血压变化，并记录不良反应及试验犬苏醒(试验犬出现吞咽反射)时间。

1.5.2 血液学检查 分别于麻醉前、麻醉后1 min、苏醒后1 min对各组试验犬进行桡静脉采血，采集血样进行血常规检查，检测指标包括：红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)等。

1.5.3 血液生化检查 分别于麻醉前、麻醉后1 min、苏醒后1 min对各组试验犬进行桡静脉采血，采集血样进行血液生化检查，检测指标包括：丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、总胆固醇(CHOL)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)等。

表1 试验分组及给药方案Tab 1 The test group and drug administration

1.5.4 剖检与组织病理学检查 试验结束后，对空白对照组与5倍推荐剂量组试验犬进行安乐死并剖检，其他剂量组部分进行剖检，观察各脏器组织变化情况，测定主要脏器系数，并对空白对照组与5倍推荐剂量组试验犬的肝、心、脾、肺、肾等进行组织病理学检查。

2 结果与分析

2.1 临床观察 根据诱导麻醉深度评分结果，麻醉后1 min各剂量组试验犬均达到诱导麻醉效果，满足气管插管要求(试验犬会厌反射消失)并顺利完成气管插管，各评分指标与空白对照组差异均极显著。1倍推荐剂量组在麻醉后4 min内可维持麻醉状态，麻醉后8 min基本恢复与空白对照组一致；3倍、5倍推荐剂量组试验犬在麻醉后8 min钟内均可维持麻醉状态，具体结果见表2。各剂量组试验犬苏醒时间分别370.88±102.90 s、993.38±186.83 s、1492.25±335.97 s。

2.2 心率及血压变化 麻醉后8 min内，各剂量组试验犬心率变化呈先升高后下降趋势，血氧饱和度及血压变化呈先下降后升高趋势；麻醉后8 min各组试验犬心率、血氧饱和度及血压均恢复与空白对照组基本一致。试验犬心率、血氧饱和度及血压变化见图1-图3。

2.3 血液学检查 各剂量组试验犬麻醉后1 min，RBC、HGB、HCT、PLT略微下降，WBC略微上升，但与空白对照组差异均不显著性(P>0.05)；试验犬苏醒后1 min，各血液学指标基本恢复与空白对照组一致。具体结果见表3。

表2 诱导麻醉深度评分Tab 2 Score of anesthesia induction

同时间点数据肩标不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)；字母相同或无字母肩标表示差异不显著(P>0.05)

图1 试验犬心率变化Fig 1 Changes of heart rate in dogs

图2 试验犬血氧饱和度变化Fig 2 Changes of oxygen saturation in dogs

图3 试验犬血压变化Fig 3 Changes of blood pressure in dogs

表3 试验犬血液学指标检查结果Tab 3 Hematology parameters of

同时间点数据无字母肩标表示差异不显著(P>0.05)

2.4 血生化检查 各剂量组试验犬麻醉后1 min，TP、CREA、CHOL明显下降，GLU明显上升，苏醒后1 min各指标均恢复与空白对照组无显著差异(P>0.05)，具体结果见表4-表6。

表4 麻醉前试验犬血生化指标检查结果Tab 4 Biochemistry parameters of dogs before

同一指标数据肩标不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)；不同小写字母表示差异显著(0.010.05)。下同

表5 麻醉后1min试验犬血生化指标检查结果Tab 5 Biochemistry parameters of dogs after

表6 苏醒后1min试验犬血生化指标检查结果Tab 6 Biochemistry parameters of dogs after recovery(1 min)

2.5 剖检与组织病理学检查 剖检结果显示，空白对照组与5倍推荐剂量组试验犬的肝、心、脾、肺、肾、胃、十二指肠、回肠、直肠、胸腺、颈淋巴结等脏器颜色正常，边缘整齐，未见出血点或坏死病灶等异常情况。各组试验犬主要脏器系数测定结果见表7。组织病理学结果显示，5倍推荐剂量组试验犬各脏器细胞形态基本正常，未观察到异常病理变化，见图4-图13。

表7 试验犬脏器系数测定结果Tab 7 The results of organ coefficient in

脏器指数=脏器重量/犬体重*100

图4 空白对照组-肝(H.E.染色,100×)Fig4 Blank-liver(H.E.,100×)图5 5倍剂量组-肝(H.E.染色,100×)Fig5 5timesofrecommendeddosage-liver(H.E.,100×)图6 空白对照组-心(H.E.染色,100×)Fig6 Blank-heart(H.E.,100×)图7 5倍剂量组-心(H.E.染色,100×)Fig7 5timesofrecommendeddosage-heart(H.E.,100×)图8 空白对照组-脾(H.E.染色,100×)Fig8 Blank-spleen(H.E.,100×)图9 5倍剂量组-脾(H.E.染色,100×)Fig9 5timesofrecommendeddosage-spleen(H.E.,100×)

图10 空白对照组-肺(H.E.染色,100×)Fig10 Blank-lung(H.E.,100×)图11 5倍剂量组-肺(H.E.染色,100×)Fig11 5timesofrecommendeddosage-lung(H.E.,100×)图12 空白对照组-肾(H.E.染色,100×)Fig12 Blank-kidney(H.E.,100×)图13 5倍剂量组-肾(H.E.染色,100×)Fig13 5timesofrecommendeddosage-kidney(H.E.,100×)

3 讨论与结论

邵贺[10]研究了丙泊酚麻醉对犬生理机能的影响，按3.5～4.5 mg/kg·bw的剂量对试验犬进行诱导麻醉，麻醉后1 min、3 min可维持较好的镇静、镇痛和肌松效果，麻醉后9 min、11 min基本恢复至麻醉前状态。本试验中各剂量组试验犬麻醉后1 min均可达到诱导麻醉深度，满足气管插管要求(会厌反射消失)并顺利完成气管插管。1倍推荐剂量组在麻醉后4 min内可维持麻醉状态，麻醉后8 min基本恢复与空白对照组一致；3倍、5倍推荐剂量组试验犬在麻醉后8 min内均可维持麻醉状态，试验犬苏醒时间随剂量增加而延长。

FDA 报道的丙泊酚注射液对比格犬的安全性研究中，试验犬预先给予初始剂量6.5 mg/kg·bw，随后按2.5 mg/kg·bw逐渐递增剂量直至出现严重不良反应，结果显示丙泊酚对犬心率的影响呈剂量相关，大约在麻醉后1～4 min心率增加达到峰值然后逐渐降低，麻醉20 min后降至略低于基线；当剂量达到或超过16.5 mg/kg·bw时，整个麻醉期间试验犬动脉压在可接受范围内逐渐降低；单次剂量16.5 mg/kg·bw丙泊酚对犬是耐受的，不会产生严重的副作用[11]。本试验中试验犬麻醉后1 min心率增加至峰值，然后逐渐下降，血压呈与剂量相关先下降后上升变化趋势，麻醉后8 min试验犬基本恢复至麻醉前状态。

丙泊酚注射液最主要的副作用为呼吸抑制[12-13]，Muir等[14]研究发现当丙泊酚的剂量大于14 mg/kg·bw时，呼吸暂停的持续时间呈剂量依赖性增加。在本试验中，3倍与5倍推荐剂量组部分试验犬出现了呼吸抑制，但通过气管插管做正压呼吸后均可恢复自主呼吸，试验期间未观察到死亡等其他异常情况。

综上所述，丙泊酚注射液按临床推荐剂量(5.5 mg/kg·bw)使用，对靶动物犬是安全的。