实时荧光定量核酸扩增技术对结核筛查的临床诊断价值分析

余冬黎 杨淳 冯钢

（皖南医学院弋矶山医院检验科 安徽 芜湖 241001）

结核病是一种因感染结核分枝杆菌导致的慢性传染病，对人类健康危害极大[1]。目前结核病的实验室诊断方法主要有痰涂片、药敏试验和结核菌培养，但都具有一定的局限性[2]。实时荧光定量核酸扩增技术是世界卫生组织近年来推荐使用的一种快速检测结核病的分子技术，快速简单且灵敏度高[3]。因此本研究旨在分析实时荧光定量核酸扩增技术在结核病诊断中的临床价值。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2016 年7 月—2019 年5 月我院收治的疑似结核病患者86 例，其中男52 例，女34 例，年龄25 ～76 岁，病例资料均完整。

1.2 方法

收集所有患者清晨漱口后咳出的深部痰液标本。①取痰液分别行痰涂片检查：使用无菌移液管添加1.5ml 标本处理液至0.5ml痰沉淀样本中，将处理后的痰液在玻璃片上涂片，操作均按照《痰涂片镜检标准化操作以及质量保证手册》进行，经抗酸染色后在显微镜下进行观察，并结合患者影像学检查结果进行诊断；②取痰液行荧光定量核酸扩增技术（Xpert MTB/RIF 法）：用标本处理液对痰液标本进行处理，将处理后的标本2ml 加入反应试剂盒中，将反应试剂盒放入GeneXpert 仪器中进行全自动检测和结果判定。

1.3 统计学方法

2.结果

Xpert MTB/RIF 法与痰涂片抗酸染色法的比较

送检的86 例标本中，Xpert MTB/RIF 法检测出结核菌38 例，阳性率为44.19%（38/86）；痰涂片抗酸染色法检测出结核菌47例，阳性率为54.65%（47/86）。以痰涂片抗酸染色法为金标准时，Xpert MTB/RIF 法阳性预测值为100.0%（38/38），阴性预测值为81.25%（39/48），见表1。

Xpert MTB/RIF 检测法的灵敏度为80.85，特异度为100.00%。两种方法检出阳性率比较，χ2=1.884，P ＞0.05，无显著差异。

表1 Xpert MTB /RIF 法与痰涂片抗酸染色法结核菌检出情况

3.讨论

目前结核病诊断的金标准仍是抗酸杆菌染色和结核分枝杆菌培养，但临床检测时常存在敏感度低、培养周期长等不足，不利于结核病的及时有效确诊和治疗[4]。因此如何找到敏感度和特异度均高且快速方便的检测方法对结核病的诊治具有重要意义。本研究所用的Xpert MTB/RIF 法即采用实时荧光定量核酸扩增技术，具有快速、生物安全性高、效率高等优点，对临床检测工作有极大的帮助。本研究结果发现：在送检的86 例疑似结核病的痰标本中，Xpert MTB/RIF 法和痰涂片抗酸染色法具有良好的一致性，且Xpert MTB/RIF 法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于痰涂片抗酸染色法，与之前相关研究结果类似[5]，这说明实时荧光定量核酸扩增技术对诊断结核病具有良好的价值，同时该技术相较于传统检测方法，培养时间短，自动化操作一定程度上提高了检测结果的准确性。同时有研究发现[6]，Xpert MTB/RIF 法也能提供利福平耐药基因突变信息。

综上，实时荧光定量核酸扩增技术在结核病的诊断中具有良好的价值，检测快捷简便，灵敏度和特异度良好，可应用于结核病的临床检测工作。