CT 联合EGFR19/21、Livin 蛋白水平联合检测用于诊断NSCLC 的临床价值分析

石锋，王宁，陈腊梅，郭飞波

（湖北省天门市第一人民医院，湖北 天门）

0 引言

NSCLC（非小细胞肺癌）属于临床上常见的恶性肿瘤，与小细胞癌区别在于其癌细胞的生长分裂较为缓慢，因此其扩散转移较迟。患者早期症状通常表现为胸痛、痰血、低热及咳嗽等，并不明显特征性，极易被忽视[1-2]。随着疾病不断进展，随之出现疲乏、呼吸困难及咯血等现象，直接危及生命安全，给患者带来严重后果。临床既往多采取影像学方式进行诊断，并存在明显特征性，但其单一检查的漏诊率及误诊率较高，极易耽误病情，不利于病情快速康复[3-4]。随后临床提出在此基础上采取EGFR19/21、Livin 蛋白水平检查，可进一步提升检验结果的准确性，为临床治疗方案的选择及预后评估提供参考价值，但临床相关报道较少[5]。本文对此展开研究，择我院2016 年1 月至2019 年1月纳入的63 例NSCLC 患者作为研究对象，分别给予CT、EGFR19/21、Livin 蛋白水平检查，分析其联合诊断在疾病中的价值，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

择 我 院 2016 年 1 月 至 2019 年 1 月 纳 入 的 63例NSCLC 患者作为研究对象，其中男性患者36 例，女性患者 27 例；年龄 25-76 岁，平均（48.97±1.26）岁；腺癌 25 例，鳞癌 38 例；肿块直径 2-8cm，平均直径（5.12±1.36）cm；高分化者 14 例，中分化者 26 例，低 分 化 者 23 例；I 期 25 例，II 期 21 例，III 期 17 例。另选择肿瘤组织边缘的癌旁正常肺组织标本作为对照组。

纳入标准[6]：（1）所有研究对象均经过病理检验确诊；（2）资料完整，中途未退出研究者；（3）患者及家属均知晓本次研究目的，并自愿加入。

排除标准[7]：（1）依从性较差，无法顺利完成研究；（2）研究前经检查显示器官功能异常、肝肾疾病、全身性疾病者；（3）存在精神方面疾病、文盲或者沟通障碍者。

1.2 方法

所有研究对象均给予CT、EGFR19/21、Livin 蛋白水平检查，首先选择GE 公司Light-speedVCT64 排128 层螺旋CT，扫描范围设置为胸锁关节到肾上腺，管电流调整为300mA，管电压120kV，层厚5mm，薄层重建为1.25mm。而增强扫描选择非离子型对比剂，浓度控制在300mgI/mL，剂量为100mL，注射速度2.5-3.0mL/s，最后由两名专业医师对获得的CT 图像进行阅片。

选择EGFR 基因突变检测试剂盒，仪器选择罗氏480II 实时荧光定量PCR 仪，利用Taqman 探针技术分析肺癌组织及癌旁正常组织的EGFR19/21 情况，其中反应循环参数设置为：50℃2min，95℃10min，激活DNA 聚合酶，95℃ 15s，62℃ 1min，重复 40 次。

将所有标本置于10%甲醛液中妥善固定，常规方式进行石蜡包埋，随后连续切片五张，保证片厚在4um左右，严格遵照免疫组化SABC 法进行检测，并根据说明书要求。

1.3 观察指标

密切关注所有研究对象的CT、EGFR19/21、Livin蛋白水平检查结果，分析三者联合检测运用于疾病诊断中的价值。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 CT 检查结果

所有研究对象经过CT 检查后，结果发现其中有54例患者的分期情况与病理检验结果一致，因此CT 检查的符合率为85.71%（54/63）。

2.2 Livin 蛋白水平检查结果

所有研究对象经过Livin 蛋白水平检查后，结果发现其免疫组织化学阳性信号主要存在细胞浆上，并呈现出棕黄色细颗粒状，其中NSCLC 组织中Livin 蛋白的阳性表达率55.56%（35/63），而正常癌旁组织中Livin 蛋白的阳性表达率4.76%（3/63），因此NSCLC组织中Livin 蛋白的阳性表达率明显高于正常癌旁组织（P＜0.05）。

2.3 EGFR19/21 检查结果

所有研究对象经过EGFR19/21 检查后，结果显示NSCLC 组织中存在EGFR 络氨酸结合域的基因突变有 21 例（33.33%），其中第 21 外显子替代突变率38.10%（8/21），第19 外显子缺失突变率61.90%（13/21）。

2.4 比较不同检验方式的敏感性及特异度

联合检测的敏感性及特异度明显高于单一检测（P＜0.05）。见表 1。

表1 比较不同检验方式的敏感性及特异度

3 讨论

近年来，我国肺癌的患病率及病死率逐年升高，已成为危害人们生命健康的主要疾病，其中NSCLC 的发生率约占肺癌的80% 左右，且患者五年生存率仅15%，受到医疗界重点关注[8-10]。若能够尽早发现并及时对患者的临床分期及病理分型进行准确判断，可有效指导、调整患者的临床治疗方案，并为评估治疗结果提供参考依据，进一步延长生存周期，因此选择有效的诊断方式成为关键[11-13]。

随着影像学技术的迅猛发展，临床发现CT 在NSCLC 诊断中意义较大，其属于无创性检查，能够对患者病灶位置、范围及周边组织结构进行确定，同时观察淋巴结分布图，并准确判断纵膈淋巴结与肿大肺门位置，从而发现远处转移情况，在临床分期判断上具有重要作用。但单一检查具有一定局限性，可能增加误诊漏诊的风险[14-16]。随后临床发现[17]，肺癌的发生发展与多种原癌基因的激活、抑癌基因的失活密切相关，其中脆性组氨酸三联体基因属于新兴抑癌基因，在多类肿瘤中具有重要意义。而Livin 蛋白属于凋亡抑制蛋白家族中主要成员，在多种肿瘤中具有高表达状态，但在正常组织中存在低表达或者不表达状态。另外临床认为基因突变对疾病治疗的影响较大，其中EGFR 的基因突可对EGFR 下游信号通路的激活程度产生一定影响，从而防止多种肿瘤信号蛋白上调，避免肿瘤细胞发生增殖及分化现象[18-20]。因此若能够在CT 检查基础上采取EGFR19/21、Livin 蛋白水平检查效果更好，进一步提升检验结果的准确性，但临床上相关报道较少。本文对此展开研究，结果显示：所有研究对象经过CT、EGFR19/21、Livin 蛋白水平检查后，结果发现其中有54 例患者的分期情况与病理检验结果一致，因此CT 检查的符合率为85.71%（54/63）。其免疫组织化学阳性信号主要存在细胞浆上，并呈现出棕黄色细颗粒状，其中NSCLC 组织中Livin 蛋白的阳性表达率55.56%（35/63），而正常癌旁组织中Livin 蛋白的阳性表达率4.76%（3/63），因此NSCLC组织中Livin 蛋白的阳性表达率明显高于正常癌旁组织（P＜0.05）。NSCLC 组织中存在 EGFR 络氨酸结合域的基因突变有21 例（33.33%），其中第21 外显子替代突变率38.10%（8/21），第19 外显子缺失突变率61.90%（13/21）。联合检测的敏感性及特异度明显高于单一检测（P＜0.05），提示三者联合检验的敏感性及特异度更高，值得临床推广使用。Livin 蛋白主要对上游及下游半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶进行绑定与抑制，从而防止细胞凋亡，其主要生存在细胞核内，其绑定能够介导细胞凋亡，同时还可抑制活性半胱氨酸蛋白酶，而BIR 结构域在抗凋亡过程中与caspases 发挥相互作用。Livin 在正常组织中不表达或者呈现低表达，但在多种恶性肿瘤中存在高表达状态，因此利用其在肿瘤组织中的特殊表达，Livin 可成为诊断肿瘤及预后评估的方式之一[21]。而EGFR19/21 属于血管内皮生长因子受体家族的主要成员，对配体的结合作用可对AKT/Notch 信号通路进行刺激，从而促进下游肿瘤细胞对周边正常组织发生浸润，提升肿瘤细胞通过淋巴结或者血管内皮细胞发生转移的风险性。一旦发生EGFR19/21 基因突变后，可直接影响EGFR19/21 对配体结合的生物学效应，从而引发EGFR 蛋白的空间结构变化，同时对其蛋白的生理功能造成较大影响[22]。另外EGFR19/21 检验的方式具有操作简便、灵敏度高及快速等特点，尽早检出后及时给予相关干预，可防止疾病进展，为预后提供保障。

综上所述，CT、EGFR19/21、Livin 蛋白水平检查运用于NSCLC 诊断中均具有较高的应用价值，尤其是联合检测的敏感性及特异度更高，尽早为病情评估提供参考依据，值得临床推广使用。