中青年人群泌乳素检测鉴别巨泌乳素的意义探讨

孙国威 赵楠楠 张明芳 王清林 刘常军

作者单位：150000 黑龙江哈尔滨，黑龙江迪安医学检验所有限公司（孙国威、赵楠楠）

150000 黑龙江哈尔滨，罗氏诊断产品（上海）有限公司（张明芳、王清林、刘常军）

对于月经紊乱、不孕不育、内分泌紊乱以及一些无症状就诊者的检查中，性激素检测结果是重要的诊断指标与依据。临床发现泌乳素（prolactin，PRL）升高者并不一定有相应的临床症状。但是高泌乳素血症（hyperprolactinemia，HPRL）者往往会接受更多的影像学及实验室检查。有研究显示，HPRL 女性中巨泌乳素（macroprolactin，MPRL）者可达到55%［1］。自动化检测不能有效区分血液中的MPRL，而且不同分析仪器对含有MPRL 的样本检测结果会有不一致的现象［2］，导致了不同仪器的结果不同，而且目前自动化仪器并不能提高MPRL的检出率［3-4］，因此仍需要其他实验来确定高泌乳素水平是否由MPRL 导致［5］。本研究基于全自动免疫分析仪检测PRL 结果较高的样本使用聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）进行处理后，分析不同年龄患者血液中PRL 的浓度与年龄的关系，旨在讨论是否对于实验室检测的高泌乳素样本都应进行处理，计算回收率。

1 材料与方法

1.1 样本来源 收集2019 年7 月—12 月各合作医院送至黑龙江迪安医学检验所有限公司检测的的PRL 有效样本10 909 例，年龄2～90 岁，平均（34.99±10.38）岁；男性318 例，年龄3～90 岁，平均（36.15±17.69）岁；女性10 591 例，年龄2～79 岁，平均（34.95±10.08）岁。使用自动免疫分析仪检测PRL，对结果＞47.0 μg/L 的样本进行PEG 处理，分析高泌乳素样本中出现MPRL 的情况。

1.2 仪器与试剂 仪器为罗氏cobas e 601 电化学发光分析仪，试剂为罗氏公司的Elecsys®PRL 检测试剂盒以及定标品PRL CalSet，系统试剂及耗材均为原装配套产品。同时采用伯乐生理水平及病理水平的免疫质量控制（质控）品进行室内精密度监测。PEG 6000 为广东光华科技股份有限公司生产。

1.3 检测方法

1.3.1 对送检样本按不同年龄段分组，所有样本均经过罗氏cobas e 601 电化学发光分析仪检测，记录PRL 结果。

1.3.2 在18～25 ℃下，将25 g PEG 6000 溶解在约60 mL 蒸馏水或去离子水中（搅拌混匀15 min），然后加水至100 mL 制成25%的PEG 水溶液。溶液储存于20～25 ℃，可稳定7 d。

1.3.3 抽选出PRL 结果＞47.0 μg/L 的样本198 例，吸取血清200 μL 和PEG 溶液按1∶1 在混匀器上充分混合，混合时间为10 s。转速3 500 r/min（离心半径20 cm），离心10 min，上清液按常规标本检测方法上机检测，计算经PEG 沉淀处理后PRL 的回收率。回收率计算公式为：回收率＝PEG 沉淀后的PRL 结果×2/原始PRL 结果×100%。

1.4 伦理学 本研究符合医学伦理学标准，经本单位伦理批准（审批号：20200422），所有对受检者的检测均获得过受检者或家属的知情同意。

1.5 统计学方法 采用SPSS 17.0 软件进行统计学处理，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（）表示，采用t 检验，计数资料以例（百分比）表示，采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同年龄组受检者PRL 检测结果比较 不同年龄组的PRL异常升高者比例比较差异有统计学意义（χ2＝157.754，P＝0.000）。受检者中16～22 岁组和23～35 岁组PRL 结果高于参考范围上限的比例最高，可达到25.27%和23.37%，其次为＞55 岁组，PRL 异常升高者比例为21.56%。见表1。

表1 不同年龄段受检者PRL 检测异常情况比较

2.2 不同性别受检者PRL 检测结果比较 男性受检者PRL 高于参考范围上限的比例明显高于女性，差异有统计学意义（χ2＝54.359，P＝0.000）。见表2。

表2 不同性别受检者PRL 检测异常情况比较

2.3 高泌乳素样本PEG处理后回收率分析 198例PRL 结果＞47.0 μg/L 的样本在经过PEG 处理后再次检测，有11 例（占5.56%）PRL 回收率＜40%，其中结果为47.0～70.5 μg/L 的PRL 样本占1.52%，＞47.0 μg/L的PRL 样本占4.04%；回收率为40%～60%的样本48 例，占24.24%；回收率＞60%的样本139 例，占70.2%（χ2＝3.609，P＝0.165）。见表3。

表3 高泌乳素组样本PEG 处理后PRL 回收率分析

3 讨论

PRL 是体内的一类蛋白类激素，主要由腺垂体的泌乳细胞分泌，另外也可在体内多个器官（如肝脏、乳腺、肾上腺）生成。泌乳素的分泌呈脉冲式，并且具有昼夜节律性［6-7］。PRL 在体内循环中主要以单体形式存在并具有生物学活性，从而发挥生理作用，单体PRL 的相对分子质量约为23 000，当聚合成大分子时PRL 几乎无生物学活性［8-9］，这部分PRL 包括相对分子质量约为50 000 的二聚体（big-PRL），当PRL 抗体出现时可将PRL 聚合形成相对分子质量为100 000～150 000 的四聚体（big-big PRL），后者即为MPRL 分子。研究显示，不仅单体泌乳素在不同时间段有脉冲式波动性分泌，MPRL 也同样随时间波动［10］。因此血液采集时间在影响PRL 检测结果的同时，也可能会导致MPRL含量的变化，对于此类患者需要注意鉴别PRL 升高的影响因素。

在普通人群中，MPRL 者约占3%～4%，而在HPRL 患者中巨泌乳素血症患者比例可高达35%［9］，血液中的MPRL 不具备生物学活性，因而无法启动负反馈机制，导致血液中PRL 水平升高。研究显示血清经PEG 沉淀后，大分子的免疫球蛋白被沉淀，由于MPRL 是自身抗体与PRL 的复合物，因此也会被沉淀，最终导致PRL 回收率降低，回收率＜40%的样本中的PRL 主要为MPRL，回收率为40%～60%的样本中同时存在单体PRL 和MPRL或PRL 低聚体，回收率＞60%则说明标本中主要含有PRL 单体［8］。

在PRL 的分泌过程中，许多生理和病理情况会导致PRL 升高，生理性情况如精神压力、妊娠、剧烈运动、乳腺刺激等。病理性情况如恶性肿瘤、胸壁损伤、肝肾疾病、原发性甲状腺功能减退症、压迫垂体或下丘脑的颅内肿瘤、空蝶鞍综合征、自身免疫性甲状腺疾病和系统性红斑狼疮等，以及特发性巨泌乳素血症，其可占到所有疾病的1/3。还有一些药物可使人体产生过多的PRL［1］，研究显示抗精神疾病类药物使用过程中患者可出现HPRL［11］。随着生活水平的提高，人们更加追求健康的身体和心理状态，但由于紧张的生活节奏，许多人处于亚健康状态，如抑郁症和焦虑症患者［12］以及临床上无明显症状的人群，会由于内分泌紊乱而入院就诊，或者因有生育需求而咨询医生，此类人群入院检查时常需检测激素水平，当PRL 水平异常增高时，必然会引起医生和患者的关注。因此当检测出PRL 升高时能够鉴别是否由MPRL 引起，及时为临床诊断和治疗提供准确可靠的依据，不仅可以减轻患者经济负担，也能避免不必要的其他检查。

PRL 异常升高可引起月经不调，表现为月经稀少甚至闭经，严重者可引起育龄期女性不孕或流产。尤其对于青春期及育龄女性，性激素检测尤为重要，作为性激素之一的PRL 对女性内分泌相关疾病的诊断和治疗起到至关重要的作用［13］。临床工作中发现往往有受检者出现HPRL，但进行其他实验室检测或影像学检查时未见异常，此时才会对PRL 结果产生质疑，对于这种情况复测PRL 后结果又与初查时没有明显差异，于是再对样本进行PEG 处理，通过计算发现回收率＜40%，说明就诊者血液PRL中含有MPRL 的比例较高。在此过程中，患者不仅承受着精神压力和经济压力，同时身体也承受着各项检查所带来的痛苦。Shimatsu 等［9］建议所有高泌乳素者都应进行MPRL 检测，以避免错误的诊断和治疗。Malik 等［14］也认为对于HPRL 患者在治疗前应对PRL 进行进一步的评估。

本研究结果显示，儿童（2～10 岁年龄段）出现PRL 异常升高的比例较低，这与Kars 等［15］的研究一致。送检者中以女性居多，且年龄分布主要为中青年，PRL 高于参考范围上限比例较高的人群分布在16～22 岁的青春期和23～35 岁的育龄人群，分析可能是因为此类人群处于青春期或因对生育有要求而更加关注生殖健康，因此在就医时需进行PRL检测以便诊断和鉴别疾病，判断健康状态。另外，对PRL 超出参考范围上限比例较高的＞55 岁年龄组受检者进行分析，该组218 例中男性51 例，女性167 例，与其他年龄组比较，该组的男性比例较高，且男性组PRL 异常升高的比例高于女性，因此导致了＞55 岁年龄组受检者中PRL 高于参考范围上限的比例较高。分析男性PRL 高于参考范围上限比例较高的原因可能是因为男性在诊治过程中对此项目的检查更具有针对性，因此在有相关疾病的情况下阳性率较高。对198 例PRL 结果高于47.0 μg/L的样本进行PEG 处理后，统计结果显示，47.0～70.5 μg/L 组和＞70.5 μg/L 组的回收率比较差异无统计学意义，可能是由于样本量小，其中回收率＜40%者全部为女性。有研究显示，HPRL 患者中MPRL 者能够正常怀孕生产［16］，不会影响生活质量。在实际工作中，PRL 均为自动化检测，出现HPRL 的结果往往不能确定是否由于MPRL 所致，HPRL 会让患者承受更大的精神压力，同时也会进行更多实验室检查和影像学检查，甚至错误地采取用药或手术等治疗方式［15，17］。

综上所述，并非PRL 结果越高MPRL 的可能性越大，指南中推荐对于无症状的HPRL 患者评估MPRL［18］。因此，对于PRL 异常升高的样本均应该进行鉴别诊断，分析MPRL 存在的可能性。PEG 法因成本低廉、操作简便，很多实验室都选择该方式对PRL 异常升高样本进一步处理，计算回收率。尤其在青春期女性和育龄期因月经失调、内分泌紊乱就诊患者中更应引起注意，因为该人群的激素水平影响因素较多，情况复杂，容易判断错误，因此计算PRL 回收率为无症状的PRL 异常升高者鉴别MPRL提供了重要依据，可以避免误诊甚至错误治疗。