抗核抗体联合抗核抗体谱检测在自身免疫性疾病诊断中的应用

陈丽芬

作者单位：363000 福建漳州，漳州市中医院检验科

自身免疫性疾病（autoimmune disease，AID）是一种由机体免疫功能和免疫应答发生紊乱所致的多器官系统受损，以器官功能障碍和自身组织病理改变为主要表现［1］。抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）是临床筛查AID 的常见项目，是针对自身真核细胞的多种细胞核成分为靶抗原的自身抗体，但在实际检测中发现，部分明确为AID 的患者经筛查结果为ANA 阴性，易发生误诊、漏诊现象［2-3］。相关研究显示，抗核抗体谱（antinuclear antibody spectrum，ANAs）在AID 的病情鉴别、判断、预后评估和治疗监测等方面具有重要价值［4］。本研究旨在分析ANA 联合ANAs 检测在AID 诊断中的应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象及分组 选择本院于2017 年2 月—2019 年10 月收治的98 例AID 患者作为AID 组，按疾病类型分为6 个亚组，分别为系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）组32 例，类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）组34 例，干燥综合征（Sjogren syndrome，SS）组13 例，进行性系统性硬化症（progressive systemic sclerosis，PSS）组7 例，混合性结缔组织病（mixed connective tissue disease，MCTD）组6 例，过敏性紫癜（anaphylactoid purpura，AP）组6 例。另选同期本院收治的98 例非AID 患者为非AID 组。

1.2 伦理学 本研究符合医学伦理学要求，经本院伦理批准（审批号：20200423），所有对患者的检测均获得过患者或家属的知情同意。

1.3 检测方法 采集各组患者空腹静脉血3 mL，离心取上清液，使用间接免疫荧光法（indirect immuno fluorescence，IIF）检测ANA。ANA抗原基质为Hep-2/猴肝，使用欧蒙公司试剂盒、EUROStar ⅢPlus 荧光显微镜，以组织或细胞内有特异性荧光出现为阳性。使用欧蒙免疫印迹法（immunoblotting test，IBT）试剂盒检测ANAs，如抗Rib-P、抗SmDl、抗Ul-Sn RNP、抗Jo-1、抗dsDNA、抗SSA、抗Scl-70、抗SSB、抗组蛋白、抗核小体、抗PM-Scl、抗CNEP-B 等不同抗原免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）类抗体。采用欧蒙（德国）医学实验诊断股份公司提供的ANAs 试剂，只要有一种抗体阳性，则ANAs 结果评定为阳性。操作过程严格按照说明书进行。

1.4 观察指标 ① 比较各组ANA 和ANAs 阳性表达情况；② 分析AID 组ANA 和ANAs 总阳性率；③ 分析AID 组ANA 核型与ANAs 表达情况。

1.5 统计学方法 应用SPSS 21.0 软件分析数据，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（）表示，采用t 检验；计数资料以例（%）表示，采用χ2检验或Fisher 精确检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料 AID 组女性62 例，男性26 例；年龄6～81 岁，平均（46.78±12.49）岁；非AID 组女性65 例，男性23 例；年龄5～79 岁，平均（46.74±12.46）岁。两组的性别、年龄等一般资料比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

2.1 AID 组与非AID 组ANA 和ANAs 阳性表达情况比较 SLE 组ANA 阳性率最高，其次为MCTD、SS、PSS、RA 组，均明显高于非AID 组（均P＜0.05）；SLE 组抗SmDl、抗Ul-Sn RNP、抗dsDNA、抗SSA、抗SSB、抗组蛋白、抗核小体阳性率均明显高于非AID 组；RA 组抗SSA、抗组蛋白阳性率明显高于非AID 组；SS 组抗SSA、抗SSB 阳性率明显高于非AID 组；PSS 组抗Scl-70 阳性率明显高于非AID 组；MCTD 组抗Rib-P、抗Ul-Sn RNP、抗SSA 阳性率明显高于非AID 组（均P＜0.05）。见表1。

2.2 AID 组中ANA 和ANAs 阳性率比较 98 例AID患者中ANA 总阳性率为64.29%（63/98），ANAs 阳性率为58.16%（57/98），差异无统计学意义（χ2＝3.233，P＝0.072）。

2.3 AID 组患者的ANA 核型分析与ANAs 表达情况 63 例ANA 阳性AID 患者中，ANAs 也为阳性者为47 例。47 例ANA、ANAs 均为阳性者经核型分析显示，核均质主要为抗dsDNA、抗核小体、抗组蛋白表达，核颗粒多为抗dsDNA、抗组蛋白、抗SSB表达，其余核型较为少见。见表2。

表1 AID 组患者中各亚组与非AID 组ANA 和ANAs 阳性表达比较

表2 47 例ANA、ANAs 均为阳性AID 患者的ANA 核型与ANAs 表达情况分析

3 讨论

AID 具有潜伏期长、多样性、复杂性等特征，与其他系统疾病和感染性疾病存在相似性，因此增加了鉴别诊断难度，易出现漏诊、误诊［5］。AID 的重要标志为自身抗体，每种类型的AID 均存在特征性的自身抗体谱，其中ANA 是与AID 关系最为密切的自身抗体，其为真核细胞的细胞膜、细胞质、细胞核等多种组分自身抗体的总称［6］。IIF 是检测ANA的“金标准”，是对自身抗体筛查的主要手段，现已广泛应用于临床。因ANA 靶抗原包括细胞质、细胞核、细胞分裂周期蛋白、细胞骨架等全部细胞成分，理论上ANA 为阳性，则ANAs 应为阳性［7］。但在实际诊断中发现，部分仅IIF 初筛为阴性的AID患者，经IBT 检测ANAs 结果显示为阳性。

本研究结果显示，SLE 组ANA 阳性率最高，其次为MCTD、SS、PSS、RA、AP 组，且除AP 组，其他几组阳性率均高于非AID 组，提示ANA 可有效诊断AID，但特异性欠佳，可将其作为AID 初筛手段。SLE 组阳性率较高可能与其免疫调节异常，吞噬细胞在细胞凋亡过程中无法完全将染色质断裂释放的核酸吞噬而产生多种ANA 有关［8］。本研究结果显示，AID 组与非AID 组ANA、ANAs 阳性表达情况比较提示ANAs 可有效鉴别诊断AID，且效能与ANA相当，可将其作为ANA 的有效补充。IBT 具有快速、操作简单、结果判读方便、易自动化等优点，可一次检测多种与AID 相关的特异性自身抗体，且膜条结果可长期保存。本研究结果显示，47 例ANA 和ANAs 均为阳性AID 患者经核型分析显示，核均质主要为抗dsDNA、抗核小体、抗组蛋白表达，核颗粒多为抗SmDl、抗组蛋白、抗SSB 表达，其余核型较少，提示AID 患者ANAs 与ANA 核型有一定相关性。

综上所述，ANA 能够有效筛查出AID，但诊断特异性欠佳，联合ANAs 诊断可减少误诊、漏诊，提高诊断准确率。

利益冲突作者声明不存在利益冲突