液相色谱质谱法检测尿液中的痕量甲基苯丙胺

2020-06-20吴辉

化工设计通讯 2020年6期

吴辉

（福建历思司法鉴定所，福建厦门 361000）

在以往的检测方法中，尿液中的甲基苯丙胺含量检测方法检出限在1ng/mL，该方法检出限基本上能追溯到吸毒人员一周内吸食甲基苯丙胺；对吸毒人员毛发进行检测，使用剪刀剪取涉嫌人员头发时，无法取到毛囊，贴于头皮捡取也往往只能剪取到1mm甚至更往后的头发，因此毛发中毒品检测往往只能够追溯到吸毒人员15d前或20d前吸食的情况；那么10d以前，20d以内的吸毒情况则很难被检测到。本实验使用超高灵敏度的液相色谱质谱法对尿液中甲基苯丙胺进行检测[1]，由于灵敏度的极大提高，能够检测到吸毒人员10d前，乃至20d前吸食甲基苯丙胺的成分。

1 材料与方法

1.1 试剂与材料

甲基苯丙胺标准品（美国Sigma 1mg/mL）、苯丙胺标准溶液（美国Sigma 1mg/mL）、质谱纯甲醇、乙腈、甲酸；分析纯氨水；实验用水为一级水；MCX固相萃取柱（Waters Oasis MCX 500mg）。

1.2 仪器与测试条件

（1）仪器： Waters UPLC-TQXS超高效液相色谱串联三重四极杆质谱、高速离心机（湘仪H1650）、氮吹仪（杭州奥盛WD-12）、漩涡振荡器（德国IKA）。

（2）色谱条件： RESTEK Ultra PFPP（3μm 100×2.1mm）超高效液相色谱柱；柱温35℃；流动相A1：B1=30%水（0.1%甲酸）：70%乙腈（0.1%甲酸）0.4mL/min等度洗脱。

（3）质谱条件：离子源：ESI+，MRM选择离子模式，毛细管电压2.5kV，去溶剂温度550 ℃，碰撞气为高纯氩气。

1.3 样品来源

公安部门送检两份尿液检材，一份尿液的当事人自述12天前有吸食冰毒，另一当事人自述15d前有吸食冰毒。另取2份空白尿液2mL，分别添加10μL和20μL的10ng/mL 的甲基苯丙胺和苯丙胺漩涡混匀，则一份尿液样品中目标物浓度为50pg/mL，另一份尿液样品中目标物浓度为100pg/mL。

1.4 制样

将样品装入5mL离心管进行离心，准确移取1mL尿液样品，进行固相萃取。萃取柱使用5mL 甲醇活化，5mL水平衡，加入1mL尿液样品后使用10%甲醇水溶液淋洗，加入5mL 5%氨水甲醇溶液洗脱。洗脱液用氮吹仪浓缩至干后加入1mL甲醇复溶，取10μL进样[2-3]。

1.5 仪器设置

配制50ng/mL甲基苯丙胺和苯丙胺溶液作调谐液，优化质谱参数。甲基苯丙胺锥孔电压为20，150.1/119.1离子对碰撞能量为10eV，150.1/91.1离子对碰撞能量为16eV；苯丙胺锥孔电压为20，136.1/119.1离子对碰撞能量为8eV，136.1/91.1离子对碰撞能量为14eV。配制甲基苯丙胺和苯丙胺标准曲线浓度分别为5、10、20、50、100、200、500、1 000pg/mL，各取10µL进样后，甲基苯丙胺定性离子对为150.1/119.1，定量离子对为150.1/91.1，线性方程为Y=947.618×X+2586.1，r=0.999 6；苯丙胺定性离子对为136.1/119.1，定量离子对为136.1/91.1，线性方程为Y=250.379×X-31.0584，r=0.9996。甲基苯丙胺和苯丙胺线性均良好，且曲线最低浓度点5pg/mL时，甲基苯丙胺信噪比为24.308，苯丙胺信噪比为27.070，满足定量限信噪比大于10的要求。选择离子图见图1。

表1 甲基苯丙胺标准曲线数据

图1 200pg/mL甲基苯丙胺和苯丙胺MRM选择离子图

2 结果

50pg/mL目标物尿液样品经提取10μL上机检测，检出甲基苯丙胺含量为38.1pg/mL，检出苯丙胺含量为34.5pg/mL；100pg/mL目标物尿液样品经提取10μL上机检测，检出甲基苯丙胺含量为75.8pg/mL，检出苯丙胺含量为71.1pg/mL。则该提取方法中甲基苯丙胺的回收率为76.0%，苯丙胺的回收率为70.4%。甲基苯丙胺定量标准曲线见图2。