探究流式细胞术（FCM）用于白血病外周血细胞检验对急性白血病（AL）预后的评估价值

王福超

（大庆油田总医院，黑龙江 大庆）

0 引言

急性白血病是临床中一种典型的非实体肿瘤，在工业污染不断加重，社会环境日益改变的背景下，急性白血病患病人数越来越多，发病率及死亡率不断提高，对患者及其家庭日常生活造成了严重影响[1]。近年，急性白血病治疗方法不断更新，其治疗水平也随之提高，初次治疗急性白血病缓解率较高，但是依旧可能复发[2]。现阶段，患者接受治疗后机体内部依旧残留部分肿瘤细胞是导致急性白血病复发的主要原因，而这些肿瘤细胞可于机体内部进一步繁殖，最终造成疾病复发[3]。通常情况下，急性白血病细胞是一种表面抗原表型，其特点以异常光散射为主，所以，可利用单克隆抗体及流式细胞术等对细胞表明不同抗原检测，从而识别荧光信号。本文主要针对流式细胞术（FCM）用于白血病外周血细胞检验对急性白血病（AL）预后评估价值分析，以下是具体报告。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取本院2018年2月至2019年7月接收的56例急性白血病患者，其中，30例男，26例女；年龄21～67岁，平均（38.47±5.23）岁。分型：24例急性淋巴白血病（ALL）和32例急性髓系白血病（AML）。本次研究经医院伦理委员会批准。

纳入标准：①与急性白血病诊断标准相符；②年龄在18岁以上；③自愿签署研究同意书。

排除标准：①具备较差依从性；②确诊为急性早幼粒细胞白血病者。

1.2 方法

通过流式细胞术检验所选患者外周血标本，收集56例患者3 mL空腹静脉血，采用乙二胺四乙酸二钾抗凝，免疫标记分别采用别藻青蛋白、藻红蛋白、甲硫氢酸荧光素及多甲藻叶绿素蛋白，并检测免疫分型。将1×106有核细胞加入到每支试管中，采用由美国BD公司提供的单克隆抗体，严格按照说明书开展操作。最低采集可供分析的有核细胞10万个，细胞的采集应用由美国BD公司生产的FACSCalibur流式细胞仪，利用配套软件分析每个试管。以原始细胞是否跨系表达、表达强弱、表达是否同时等为依据对是否是微小残留病变（MRD）判定，MRD阳性判定依据为MRD超过0.01%，相反为阴性[4]。与此同时，与骨髓细胞形态学检验对比，骨髓液涂片6～8张，在吉木萨-瑞士染色后，置于显微镜下观察并划分，以形态为依据实施分类计数。

1.3 观察指标

对比检验结果，并分析MRD与复发率相关性。

1.4 统计学方法

将实验所得数据采用统计学软件SPSS 21.0进行分析处理，计量数据通过t检验，以（）表示，计数资料采用χ2检验，以（%）表示，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 分析检验结果

ALL组敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别 是 68.75%、62.50%、72.22% 和 33.33%，AML组 分 别 是95.24%、18.18%、74.07%和80.00%，在敏感性、特异性及阴性预测值方面，两组对比，差异明显（P＜0.05）；而阳性预测值比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 分析检验结果（%）

2.2 分析MRD与复发率相关性

MRD阴性患者11例中，复发3例，复发率是27.27%；MRD阳性患者45例中，33例复发，复发率是73.33%，MRD阳性患者复发率较MRD阴性患者更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

现阶段，流式细胞术被视为研究急性白血病的主要方法，其通过检测MRD从而判定预后效果[5]。相关研究表明，诱导治疗方法可将大部分AL细胞杀灭，但是全部清除难度较大，有些患者经过化疗后病情有所缓解，但是，依然伴有MRD阳性，经过一段时间的发展出现复发，所以，截止到目前为止，MRD阳性在化疗缓解程度评估中具有重要作用[6]。目前，临床上主要通过骨髓细胞形态学检测方法判断AL治疗效果及诊断，尽管细胞学检验方式被视为诊断AL的金标准，但是局限性较大[7]，譬如：经过骨髓穿刺得到的标本仅可以将该部分骨髓状况反映出来，但是，通常仅有在机体AL细胞数量在1%以上时才可以被检出，而MRD依旧持续反映在外周血中，利用MRD检查可将AL患者预后状况更加全面的反映出来[8-10]。除此之外，针对急性白血病患者而言，骨髓穿刺方式具有较大的创伤性，而外周血取样操作简单且方便。

由实验结果可知，ALL组敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别是68.75%、62.50%、72.22%和33.33%，AML组 分 别 是 95.24%、18.18%、74.07% 和80.00%，在敏感性、特异性及阴性预测值方面，两组对比，差异明显（P＜0.05）；而阳性预测值比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；MRD阳性患者复发率（73.33%）较MRD阴性患者（27.27%）更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。由此可见，MRD可被视为判断AL预后的一个重要指标。相关研究表明，MRD判定界限为0.01%，在0.01%以上的患者3年复发率相比于低于0.01%患者更高，大约是其3倍，所以，临床上，通常以MRD检验水平为依据划分预后等级，并根据具体状况开展相应的化疗方案，若MRD长时间呈阴性，则可以结束治疗，若MRD长期呈阳性，则需要对化疗方案进行适当的调整。

总而言之，急性白血病患者检验过程中流式细胞术具有较高的敏感性，其可用于评估急性白细胞复发率，值得临床进一步推广、采纳。