白酒中氰化物的检测

王蕊 冉艳瑞

摘 要：本文采用顶空气相色谱法测定白酒中氰化物的含量。结果显示：氰化物在6～100 ng·mL-1范围内具有良好的线性关系（r>0.99），当标准添加水平为20、40、80 ng·mL-1时，回收率在89.6%～95.2%，方法检出限为15.752 ng·mL-1，相对标准偏差均小于15%。该方法简便、快速、灵敏和准确，适合酒中氰化物的快速检测及定量分析。

关键词：氰化物;检测;白酒

Abstract：In this paper， headspace gas chromatography was used for the determination of cyanide in liquor. The analytes were quantified by matrix -matched standard solution and the calibration curve showed good linearity within the concentrations of 6 to 100 ng·mL-1（r>0.99）.The recoveries of the cyanide ranged from 89.6% to 95.2% in the three spiked levels of 20， 40 and 80 ng·mL-1， The relative standard deviation （RSD） were less than 15%. The limits of quantification was 15.752 ng·mL-1， The results indicate that the method is easier， faster， more sensitive，and suitable for the qualitative and quantitative confirmation of the cyanide from liquor.

Key words：Cyanide; Determination; Liquor

人體可通过皮肤和呼吸道快速吸收剧毒物质——氰化物，氰化物释放的氰基（CN-）会与位于线粒体膜上的细胞色素C氧化酶的Fe3+离子结合[1]，从而抑制细胞色素C氧化酶的活性，阻断电子传递链使细胞组织缺氧[2]。过量吸入氰化物会导致患者深度昏迷、全身肌肉松弛、反射消失、呼吸浅慢及心跳停止[3]。此外氰化物在消化道中释放出的氢氧离子有腐蚀作用[4]，会对胃肠道造成损害。口服氰化钠、氰化钾的致死量为1～2 mg·kg-1[5]。酒中的氰化物主要由原料（如木薯、代用品、豆类及其他果核或混入一些野生植物）中含有的氰甙类配糖体在发酵过程中水解产生[6]。

GB 5009.36-2016规定酒中氰化物的定量测定方法主要有分光光度法、气相色谱法[7]。此外崔鹏[8]采用荧光光谱法测定食品中氰化物含量，董明[9]利用傅里叶变换红外光谱快速检验了氰化物，张玮[10]应用流动注射分析仪测定了饮用水中的氰化物。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

20种随机购买市售白酒;氯胺T;磷酸;氢氧化钠;水中氰标准溶液：浓度：50 μg·mL-1;编号GBW（E）080115，由中国计量科学研究院提供。

1.2 仪器与设备

气相色谱仪（型号Trace1310）;万分之一电子天平;离心机;超声波清洗器。

1.3 标准溶液列的配制

氰离子（以CN-计）标准中间溶液：准确移取2.0 mL酒中氰化物成分分析标准物质于10 mL的容量瓶，用0.1%氢氧化钠的溶液定容。

氰离子（以CN-计）标准工作溶液：移取适量氰离子（以CN-计）标准中间溶液用水稀释配制成浓度为：6、8、10、20、40、60、80 ng·mL-1和100 ng·mL-1系列标准工作溶液，现配现用。

1.4 试样制备与保存

按照GB/T 5009.36-2016，取液体试样约500 mL充分混匀，装入洁净容器中，密封，于0～4 ℃条件下保存。

1.5 标准曲线的制作

分别准确移取10.0 mL氰离子标准工作溶液于8个顶空瓶中，加入0.2 mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加入0.2 mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测。

1.6 试样溶液的测定

准确移取0.2 mL试样于顶空瓶中，加入蒸馏水9.8 mL，加入0.2 mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加入0.2 mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测。

1.7 色谱条件

色谱柱：TG-WAXMS，柱长30 m，内径0.25 mm，膜厚0.25 μm;色谱柱温度：初温40 ℃，保持1 min，以4.0 ℃·min-1升到130 ℃，以20℃·min-1升到200 ℃保持5 min;检测器温度：250 ℃;进样口温度：250 ℃;载气流量：1.0 mL·min-1;进样量：1.0 μL;分流比：20∶1。

2 结果与分析

2.1 标准曲线

将标准系列的标准工作溶液进行测定，以各组分的峰面积与对应的浓度绘制标准曲线，得回归方程和相关系数。结果表明，氰化物在6～100 ng·mL-1范围内具有良好的线性关系，线性相关系数大于0.99，可以满足定性、定量分析的需要。实验结果如表1所示，氰化物色谱图如图1所示。

2.2 检出限

取标准储备液配制成低浓度的标准溶液，以3倍信噪比15.752 ng·mL-1为检出限，GB 5009.36-2016《食品安全国家标准 食品中氰化物的测定》中气相色谱法氰化物的检出限为0.02 mg·L-1，因此本方法符合检测需求[7]。

2.3 回收率

在空白样品中添加浓度为20、40、80 ng·mL-1的标准溶液，平行测定6次，计算含量、回收率。

2.4 方法的精密度

方法的精密度用变异系数即相对标准偏差来衡量，用浓度分别为10、40、100 ng·mL-1的标液分别平行测定6次，计算相对标准偏差，本实验的平均相对标准偏差RSD<15%，其精密度满足含量分析的要求，结果见表3。根据变异系数是标准差与平均数的比值得本次试验所得的数据2.5121%、1.998 6%和1.709 2%均符合GB/T 27404-2008检验方法确认的技术要求和实验室内变异系数≤15%的要求。

2.5 样品的测定及分析

采用本方法对随机从市场购买的白酒进行测定，通过实验结果，均未检出氰化物，说明市售白酒质量较好。

3 结论

通过实验发现，本文采用的氰化物检测方法在6～100 ng·mL-1范围内具有良好的线性关系（r>0.99），当标准添加水平为20、40、80 ng·mL-1時，回收率在89.6%～95.2%，方法检出限为15.752 ng·mL-1，相对标准偏差均<15%。该方法简便、快速、灵敏和准确，适合酒中氰化物的定量分析。通过对20个随机市售白酒样品的检测发现，所有样品均未检出氰化物，提示白酒质量较好。

参考文献：

[1]Logue B A，Hinkens D M，Baskin S I，et al.The Analysis of Cyanide and its Breakdown Products in Biological Samples[J].Critical Reviews in Analytical Chemistry，2010，40（2）：122-147.

[2]Cooper C.E，Brown G C.The inhibition of mitochondrial cytochrome oxidase by the gases carbon monoxide，nitric oxide，hydrogen cyanide and hydrogen sulfide：chemical mechanism and physiological significance[J].Journal of Bioenergetics and Biomembranes，2008，40（5）：533-539.

[3]戴 寅，陈君石，李悠慧，等.食品安全性毒理学评价程序和方法[J].医学研究杂志，1997（12）：9-10.

[4]王明军.氰化物中毒的生化机理[J].黔南民族师范学院学报，2008（3）：75-77.

[5]黄光照.法医毒理学[M].北京：人民卫生出版社，1999.

[6]张文德，张光仲，郭 忠，等.酒中微量氰化物的测定研究[J].中国食品卫生杂志，2004（3）：232-235.

[7]国家卫生和计划生育委员会，国家食品药品监督管理总局.GB 5009.36-2016 食品安全国家标注 食品中氰化物的测定[S].北京：中国标准出版社，2016.

[8]崔 鹏.荧光法测定食品中氰化物含量的分析探讨[J].青海医药杂志，2006，36（7）70-71.

[9]董 明.利用红外光谱快速检验氰化物[J].刑事技术，2001（3）：16.

[10]张 玮.应用Lachat QC8500流动注射分析仪测定水中氰化物[J].科技情报开发与经济，2008，18（35）：214-215.