快速检测食品中金黄葡萄球菌的检测方法
2020-06-08周亮陈颖姚忱郑晓新李乃军
周亮 陈颖 姚忱 郑晓新 李乃军
摘 要:食物中存在的金黄葡萄球菌对人们的生命有一定的危害。食物被金黄葡萄球菌污染容易引起食物中毒。因此,检测食物中是否存在金黄葡萄球菌非常重要,本文将针对金黄葡萄球菌的快速检测方法进行分析,从而保证食品安全。
关键词:金黄葡萄球菌;检测方法;食品安全
Abstract:The presence of staphylococcus in food is harmful to peoples lives. When food is produced with Staphylococcus Aureus, it is easy to cause food poisoning. It is very important to detect the presence of Staphylococcus Aureus in food, this article we will be for the rapid detection of Staphylococcus Aureus analysis, so as to ensure food safety.
Key words:Staphylococcus aureus; Detection method; Food safety
随着时代的发展,人们的生活节奏也逐渐增快,大多数人为了提高生活效率和工作效率,会选择便捷、快捷的用餐方式,例如:外卖餐饮、外卖生鲜食物等。在此情况下,食品安全问题成为了人们关注的焦点。食物在生产过程中很容易被微生物污染,引发食品安全事件。我国微生物性食物中毒人数占总食物中毒人数的30%以上。其中,微生物性食物中毒中的1/4是由金黄葡萄球菌引起的。因此检测金黄葡萄球菌尤为重要。
1 金黄葡萄球菌简介
1.1 金黄葡萄球菌的特点
金黄色葡萄球菌简称金葡菌,在产品生产过程中是最常见的病菌之一。金黄色葡萄球菌广泛存在于自然界,很容易污染食物,导致人体患病。在我国,因金黄色葡萄球菌引发的食物中毒事件频频发生。其主要原因是金黄色葡萄球菌可以依附在肉类、蛋类、豆类以及乳类等食品上,导致食品腐烂变质,进而引发食物中毒。
1.2 金黄葡萄球菌的致病性
金黄葡萄球菌容易导致食物中毒的根本原因是,金黄葡萄球菌可以产生多种因素,细菌性毒素就高达14种。金黄葡萄球菌还会损坏人体细胞,导致血液中的纤维蛋白沉淀,导致人们出现食物中毒症状,甚至会引起细菌感染、化脓感染,导致肺炎、心包炎等多种疾病。
1.3 金黄葡萄球菌的耐药性
近几年,细菌感染导致的疾病越来越多,对抗菌药物的运用也越来越广泛。相关研究人员对金黄色葡萄球菌头孢唑林、环丙沙星、红霉素、青霉素、左氧氟沙星、四环素与阿莫西林等的耐药性进行统计分析,得出以下结论,金黄色葡萄球菌对于抗菌药物的耐药性比较高,因此检测食物中是否含有金黄葡萄球菌非常有必要[1]。
2 金黄葡萄球菌检测方法
由于金黄葡萄球菌传染快、吸附性强、感染力度大,为了保证人们的生命安全,对金黄葡萄球菌进行检测时可运用以下几种方法。
2.1 传统检测方法
传统检测方法主要分为定性检测和定量检测两种。定性检测方法是在无菌条件下,将需要检测的样品在一定温度下培养一段时间后,将样品接种到血平板上,观察培养菌落特征,并通过实验鉴定菌落。定量检测方法是将3种不同浓度的病菌接种到样品上,通过检测试剂盒,对金黄色葡萄球菌进行检查得出结果。传统检测方法操作时间过长,操作细节繁琐,很难快速检测出是否存在金黄葡萄球菌。
2.2 以免疫学原理为基础的快速检测方法
2.2.1 乳胶凝集检测法
乳胶凝集法是用乳胶颗粒标记抗体,金黄葡萄球菌中的抗原与抗体结合后,会产生肉眼可直观观察到的凝集反应,据此对金黄色葡萄球菌进行检测。乳胶凝集法有着结果直观可见,操作细节简单,灵活度高等优点。
2.2.2 酶联免疫吸附检测法
应用酶联免疫吸附法检测黄金葡萄球菌具有检测速度快、检测准确度高等特点。酶联免疫吸附法主要是将酶分子与抗体(或抗原)分子联合形成-酶标记分子。当它与待测物中相应的抗原(或抗体)反应时会形成酶抗原-抗体复合物,加入酶底物后,復合物中的酶会水解底物,使无色的底物溶液生成有色的反应产物。根据颜色的深浅,即可测出溶液中抗原(或抗体)的量。
2.2.3 免疫磁性微球法
免疫磁性微球法又称免疫磁珠法。主要是利用表面结合有单克隆抗体的磁性微球的特异性吸附目标致病菌,免疫磁性微球法与其他检测方法相结合,可实现快速检测[2]。
2.2.4 免疫层析检测法
免疫层析法主要是利用毛细作用,将特异性抗体固定于硝酸纤维素膜的某一区带,当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(尿液或血清)后,由于毛细管作用,样品将沿着该膜向前移动,当移动至固定有抗体的区域时,样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合,若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色,从而实现特异性检测。免疫层析法检测速度快,检测结果准确度高。
2.3 以分子生物学原理为基础的快速检测方法
2.3.1 聚合酶链反应检测法
聚合酶链反应法具有灵敏度高、特异性强、操作便捷且检验结果准确等优点。聚合酶链反应法主要是根据金葡萄球菌的特异性基因进行检测。一般可在24 h内得出检查结果。
2.3.2 实时荧光定量PCR检测法
实时荧光定量PCR检测法,检测结果合格率高达100%,且具有操作简单、得出结果快速高效、高通量和高敏感性等特点。实时荧光定量PCR检测法主要是通过在PCR反应体系中加入荧光染料,对样本进行定量分析[3]。
2.3.3 环介导等温扩增检测法
环介导等温扩增检测法,是一种新型检测方法,具有灵敏度高、操作便捷且得出结果快速等优点。且环介导等温扩增检测与国标方法结果一致。也是目前常用的金黄葡萄球菌检测方法之一[4]。
2.3.4 基因芯片检测法
基因芯片技术检测法是一种多学科技术相结合而产生的高新技术检测方法。且具有操作简单、结果快速、准确度高和重复性好等特点。并且检测结果与传统方法检测结果一致,且灵敏度比实时荧光定量PCR检测法高。
2.4 生物传感器法
生物传感器检测方法主要是通过将生物成长过程中产生的各种信号,如:物理信号、化学信号、光信号和热信号等,转化成为相应的电信号,通过检测电信号,获取目标检测信息的方法。用免疫生物传感器检测金黄葡萄球菌的检测结果非常准确,且时间快、操作简单。
3 结语
金黄葡萄球菌作为最常见的微生物致病细菌,经常会引起细菌性食物中毒。为了有效避免食物中毒给人们带来的危害,对金黄葡萄球菌进行快速检测有着非常重要的作用。将传统检测方法与新型检测方法相融合,可得到快速、准确的检测结果,避免因金黄葡萄球菌而引起食品安全问题。相关食品安全检测部门要不断对检测方法和检测手段进行更新,避免金黄葡萄球菌给人们带来危害,为人民提供更加便捷、可靠的快速检测方法,实现食品安全。
参考文献:
[1]吴 帆.宁夏地区牛源金黄色葡萄球菌生物被膜相关基因检测及耐药性研究[D].银川:宁夏大学,2017.
[2]黄焕宜,肖树荣,谢淑贤,等.应用免疫磁性微球快速鉴定金黄色葡萄球菌[J].中国国境卫生检疫杂志,2019(2):81-83.
[3]宫 强.鼠伤寒沙门氏菌ompc基因PCR检测方法的研究[J].2015,36(16):40-43.
[4]郭建平,万佳佳,陆兆新,等.基于可视化环介导等温扩增技术快速检测金黄色葡萄球菌[J].食品科学,2019,40(20):325-331.