五味子保肝泡腾颗粒剂的制备工艺研究

长春职业技术学院食品生物技术分院，吉林 长春 130033

五味子为木兰科植物五味子[Schisandrachinesis(Turcz.)Bsill.]的干燥成熟果实，主产于东北和华北地区，具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效[1]。现代研究表明，五味子有效成分为木脂素类化合物，目前已从五味子中分离出32种木脂素单体，其中7种单体分别为五味子甲素、乙素、丙素、醇甲、醇乙、酯甲和酯乙，均属于木脂素成分中的联苯环辛烯类化合物[2-4]，经药理研究和临床证明，均有降低肝炎患者血清谷丙转氨酶水平的作用，其中以五味子乙素作用最强，其次为醇甲、酯甲等[5]。20世纪70年代初我国开发出治疗肝炎药物联苯双酯，近年来制剂护肝片是我国用于治疗肝损伤的两种常用药物，具有疏肝理气、健脾、消食、降低转氨酶的作用，用于慢性肝炎及早期肝硬化等[6-7]。

泡腾颗粒剂是一种较为新型的颗粒剂，其内含有泡腾崩解剂，即有机酸和碳酸氢钠，遇水后酸和碱会发生化学反应，并释放大量二氧化碳使颗粒剂迅速崩解，显效快，二氧化碳气体刺激味蕾，产生碳酸饮料的风味，增强人们对药物的顺应性。目前，现代人酒精肝、脂肪肝等肝脏疾病发病率持续增高，本研究以具有补肝肾功效的五味子为对象，研制具有保肝作用的五味子保健泡腾颗粒剂，可作为现代人保肝护肝的日常保健用品。

1 仪器与试药

1.1 仪器与设备 LC-20A 高效液相色谱仪(岛津公司)；AUY220 分析天平(岛津公司)；BYS-25 型高效湿法造粒机(哈尔滨市北方制药设备制造有限公司)。

1.2 药品与试剂 北五味子饮片购吉林省延边合同饮片厂，产地延吉，为木兰科植物五味子[Schisandrachinesis(Turcz.)Bsill.]的干燥成熟果实；五味子乙素对照品由中国药品生物制品检定所提供；柠檬酸、NaHCO3、乳糖、聚乙二醇6000(PEG-6000)均为药用级辅料；安赛蜜为食品添加剂；乙腈为色谱纯；其它试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 五味子浸膏的制备 取五味子果实热水浸泡去掉果皮，在60℃烘干，碾成粉末，取粉末加3倍量95%乙醇回流提取2次，每次3h，过滤，合并滤液，减压浓缩成浸膏(相当于1g浸膏含有1g生药)，干燥，制成浸膏粉，置-80℃冰箱保存，备用。

2.2 辅料及制备工艺 柠檬酸为酸源；碳酸氢钠为碱源；PEG-6000为包裹剂；乳糖为稀释剂；安赛蜜为矫味剂；3% 聚乙烯吡咯烷酮(PVP-K30)无水乙醇溶液作为黏合剂。将PEG-6000 加热熔融后，加入碳酸氢钠，搅拌均匀，冷却后，粉碎成细粉(过80目筛)；另将柠檬酸、乳糖等辅料分别过80目筛，混匀；将五味子及辅料粉混合均匀，用乙醇制软材，16目筛制颗粒，湿颗粒于50℃干燥，整粒，经含量测定合格后分装成10g/包，即得。

2.3 高效液相色谱测定五味子乙素含量

2.3.1 五味子乙素含量测定方法

①色谱条件:Alltima C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相为乙腈-水(10∶90)；流速1.2mL / min；紫外波长254 nm；柱温为室温。

②对照品溶液的制备:精密称取五味子乙素对照品约10mg，用色谱甲醇定容至100 mL，摇匀，通过孔径为0.22 μm的微孔滤膜过滤，续滤液备用。

③供试品溶液制备:取各批次样品适量，研细，精密称取2g，置100mL 量瓶中，加50%甲醇溶液至刻度，超声振荡30min，10000 r·min-1离心5 min，放冷至室温，微孔滤膜过滤，即得。

④测定法:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。本品每包/10g计含五味子以五味子乙素(C23H28O6)，不得少于250mg。

⑤标准曲线:精密称取五味子乙素对照品，加入甲醇分别配成0.05mg/mL、0.100 mg/mL、0.150mg/mL、0.200 mg/mL和0.250 mg/mL对照品溶液。分别进样各10 μL，计算五味子乙素的峰面积，以五味子乙素的质量浓度为横坐标，其相应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，求得线性回归方程为：Y=1415.5X-32.81(R2= 0.999 9)。结果表明：五味子乙素在0.05 ～0.250mg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系。

2.3.2 五味子乙素含量测定结果

①加样回收试验:取同一批号样品 5份，精密称定，分别放入锥形瓶中，各加入五味子乙素对照品溶液(0.1560 mg/mL)10mL，然后照供试品溶液的制备方法处理，进样测试其中五味子乙素的含量，计算回收率，测定结果见表1。

表1 五味子乙素加样回收试验结果

②稳定性试验:取供试品溶液一份，于配制后的0h、2h、4h、6h和8h，分别精密吸取20 μL进样测试其中五味子乙素的峰面积，计算峰面积平均值为10575.5，RSD为0.86%，结果表明泡腾颗粒中保肝成分五味子乙素在8h内基本稳定。

③重现性试验:取同一批号的供试品5份，分别精密称定，然后按照供试品溶液的制备方法处理，并依照色谱条件进样测试其中五味子乙素的峰面积。计算其中五味子乙素的含量，测定结果见表2。求得其平均含量为26.1 mg/g，RSD为0.73%。

表2 重现性试验结果

2.4 工艺优化

2.4.1 正交试验设计 采用 L9(34) 表进行实验来优化泡腾颗粒剂中聚乙二醇6000的用量及碳酸氢钠与柠檬酸最佳配比、PVP-K30用量等。所选因素水平(见表3)，评价指标为泡腾颗粒剂的溶化时间(s)和粒度。正交试验结果见表4，粒度及溶化时间方差分析结果见表5、表6。

表3 因素水平

表4 处方优选正交试验结果

表5 粒度方差分析

表6 溶化时间方差分析

由方差分析结果可知，对指标粒度，因素A的影响有显著性，参考极差分析结果，选取A2水平，BC因素的水平任选；对指标粒度，因素C的影响有显著性，参考极差分析结果，选取C3水平，AB因素的水平任选，综合分析确定泡腾颗粒的最佳工艺条件是A2B2C3。既柠檬酸与碳酸氢钠的配比0.8∶1，聚乙二醇

6000量为3%，PVP-K30的量为2.0%。

2.4.2 优化处方验证 将优化的五味子泡腾颗粒剂处方按“1.3.2项”下制备条件进行 3 批试验，所制得的颗粒剂按 2.1.1 项下评价方法进行验证，见表7。结果表明样品各项指标的检测结果均符合标准规定，产品合格，质量稳定，证明该处方的优化合理、可行。

表7 处方优化验证结果

3 结论

五味子浸膏粉有较强的吸湿性，受潮后酸源和二氧化碳源会发生泡腾反应，导致成品失去泡腾效果，这也是长期以来五味子泡腾颗粒剂研制受阻的原因，为此，本研究采用PEG6000包裹二氧化碳源，有效地隔离了酸源与二氧化碳源，保证制剂的稳定性。还在制剂中选择吸湿性较弱的乳糖作为稀释剂，采用 PVP-K30 无水乙醇溶液制粒，并降低生产环境的湿度等方法，来提高五味子护肝保健泡腾颗粒的生产和使用中的稳定性。

本研究采用正交试验设计以泡腾颗粒的粒度和溶化时间为指标综合分析得到五味子泡腾颗粒的最佳生产工艺条件。同时采用精密度较高的高效液相色谱法检测泡腾颗粒中的五味子乙素含量及其稳定性，实现了对五味子泡腾颗粒中保肝成分的质量控制，保障了产品的有效性。