肺癌7种自身抗体的表达变化及临床意义

高成磊，宋海燕，王 燕，黄 猛，王 晶，伦立民△

(1.青岛大学医学部，山东青岛 266000；2.山东省荣成市人民医院健康管理中心，山东荣成 264300；3.青岛大学附属医院检验科，山东青岛 266000；4.山东省立医院临床医学检验部，山东济南 250101)

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，2018年肺癌发生率占所有肿瘤发生率的13.5%，病死率占所有肿瘤病死率的25.3%，总体5年生存率为18.6%[1]。目前肺癌筛查方法主要有影像学、血液分子标志物等方法。血液分子标志物的检查包括循环肿瘤细胞、肿瘤标志物、肺癌自身抗体检测等。目前临床上使用的肿瘤标志物有癌胚抗原、细胞角蛋白19片段(CYFRA 21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、前胃泌素释放肽等[2]，尽管它们在部分肺癌患者的血清中升高，但它们灵敏度、特异度较低且不能作为无症状肺癌患者的生物标志物[3]。随着肺癌自身抗体检测的提出，其在肺癌诊断中的价值等问题逐渐显现。本研究通过分析比较7种自身抗体，包括抑癌基因53(P53)、蛋白基因产物9.5(PGP9.5)、性别决定基因家族2(SOX2)、肿瘤/睾丸抗原G抗原7(GAGE7)、ATP结合RNA解旋酶(GBU4-5)、黑色素瘤抗原A1(MAGE A1)和肿瘤相关基因(CAGE)在肺癌患者中的表达变化，探索其在肺癌诊断中的价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取青岛大学附属医院呼吸内科、胸外科及体检中心2019年1-4月就诊的肺癌患者194例(肺癌组)和体检健康者88例(健康对照组)。肺癌患者中男性106例，女性88例，年龄31～78岁，平均(58.97±9.50)岁；按病理类型分为腺癌144例，鳞状细胞癌26例，小细胞肺癌22例，大细胞肺癌2例。肺癌组入选标准：(1)所有患者病理结果根据世界卫生组织肺癌组织学分型和分期标准确认为肺癌[4]；(2)所有患者均未进行放化疗及手术治疗，且未患其他疾病。健康对照组中男性72例，女性16例，年龄36～76岁，平均(52.73±8.14)岁，健康对照组未患急、慢性疾病。所有研究对象均已知情并签署知情同意书，本研究通过青岛大学附属医院伦理委员会的审核批准。

1.2方法 采集研究对象空腹静脉血3 mL于普通血清管中，3 000 r/min离心10 min，分离血清，-80 ℃超低温冰箱进行保存，集中检测。采用酶联免疫吸附测定进行7种自身抗体P53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE A1和CAGE的检测。自身抗体检测试剂盒购自中国杭州凯保罗生物技术有限公司，应用酶标仪(购自美国Bio-Rad公司)进行测定。

2 结 果

2.17种自身抗体在肺癌组与健康对照组中的表达水平比较 与健康对照组比较，肺癌组中P53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE A1和CAGE表达水平明显升高(均P<0.05)，见表1。

2.27种自身抗体及CYFRA 21-1、NSE在3组中的表达水平比较 将肺腺癌组按照组织学分类分为原位腺癌组(n=22)、微浸润腺癌组(n=20)、浸润腺癌组(n=100)，经过对3组7种自身抗体表达水平比较发现，浸润腺癌组中GAGE7、MAGE A1表达水平高于原位腺癌组(Z=25.529、25.744，均P<0.05)、微浸润腺癌组(Z=20.920、27.980，均P<0.05)，但原位腺癌组与微浸润腺癌组之间GAGE7、MAGE A1表达水平比较，差异无统计学意义(Z=6.609、12.236，均P>0.05)。浸润腺癌组、微浸润腺癌组中P53表达水平高于原位腺癌组(Z=23.537，29.527，均P<0.05)，但微浸润腺癌组与浸润腺癌组之间P53表达水平比较，差异无统计学意义(Z=6.00，P>0.05)。经过对3组CYFRA 21-1、NSE表达水平比较发现，浸润腺癌组中CYFRA 21-1表达水平高于原位腺癌组(Z=35.49，P<0.05)、微浸润腺癌组(Z=27.700，P<0.05)，但原位腺癌组与微浸润腺癌组CYFRA 21-1表达水平比较，差异无统计学意义(Z=7.791，P>0.05)。见表2。

表1 7种自身抗体在肺癌组与健康对照组中的表达水平比较[M(P25～P75)]

2.37种自身抗体在肺癌患者中的临床病理特征关系 肺癌组中7种自身抗体(P53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE A1和CAGE)阳性率检测在年龄、性别、吸烟史、肿瘤TNM分期中比较，差异无统计学意义(P>0.05)。在病理分型中，SOX2、GBU4-5、MAGE A1阳性率检测比较，差异有统计学意义(P<0.05)，P53、PGP9.5、GAGE7和CAGE差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表2 7种自身抗体及CYFRA 21-1、NSE在3组中的表达水平比较[M(P25～P75)]

续表2 7种自身抗体及CYFRA 21-1、NSE在3组中的表达水平比较[M(P25～P75)]

注:与浸润腺癌组比较，aP<0.05；与微浸润腺癌组比较，bP<0.05。

表3 7种自身抗体在肺癌患者中的临床病理特征关系(n)

3 讨 论

肺癌是一种侵袭性和异质性疾病[5]。肺癌的发病机制至今尚未完全明确。有研究表明，肺癌患者可以对自身的癌症产生体液免疫应答[6]。目前肺癌检测主要采用肿瘤标志物，侧重于检测肿瘤相关抗原标志物。有研究表明，对肿瘤相关自身抗体的血液检测可识别早期肺癌个体，并能将具有良性结节的高危吸烟者、结核病与肺癌相区别[7]。2008年，CHAPMAN等[8]首次将肺癌7种自身抗体联合用于肺癌的检测，单一抗体阳性率为5%～36%，特异度为96%～100%，联合检测阳性率76%，特异度为92%。

本研究结果显示，肺癌组中P53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGE A1和CAGE表达水平明显高于健康对照组(P<0.05)。这与REN等[9]研究结果一致，表明7种自身抗体肺癌中的表达水平升高，可用来区分肺癌患者和非肺癌患者。有研究表明，P53在多种肿瘤中表达升高[7]，PGP9.5增加肿瘤细胞周期蛋白的去泛素化可能导致体细胞的不可控生长，SOX2在肺癌、乳腺癌、卵巢癌、神经胶质瘤等多种恶性肿瘤组织中表达，并且癌细胞向远处转移的能力与其过表达成正比[10]。肿瘤-睾丸基因的表达产物是肿瘤-睾丸抗原，肿瘤-睾丸抗原编码的基因通常只在人类生殖系统表达，但也在各种肿瘤中表达，包括肺癌、黑色素瘤、膀胱癌和肝癌等[11]。

肺腺癌是最常见的肺癌类型，也是最致命和最普遍的癌症之一[12]，本研究中进一步将肺腺癌组依据2011年肺腺癌国际多学科分类及2015年世界卫生组织肺腺癌组织学分类分为原位腺癌组、微浸润腺癌组、浸润腺癌组[13-14]，比较不同组中自身抗体表达水平，观察到浸润腺癌组中GAGE7、MAGE A1表达水平高于原位腺癌组、微浸润腺癌组(均P<0.05)，但原位腺癌组与微浸润腺癌组之间GAGE7、MAGE A1表达水平比较，差异无统计学意义(均P<0.05)，即浸润程度越高GAGE7、MAGE A1表达水平越高。GAGE、MAGE均属于肿瘤-睾丸家族，ZHOU等[15]报道临床上肿瘤-睾丸抗原与癌症患者预后不良密切相关，与本文研究结果相一致。浸润腺癌组、微浸润腺癌组中P53表达水平高于原位腺癌组(P<0.05)，但微浸润腺癌组与浸润腺癌组之间P53表达水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明P53与肿瘤的转移相关，这与P53异常表达和肿瘤浸润性免疫细胞中PD-L1的表达密切相关，P53自身抗体水平升高与肿瘤大小呈正相关[16-17]。通过对肿瘤标志物CYFRA 21-1、NSE在原位腺癌组、微浸润腺癌组、浸润腺癌组中表达水平比较，观察到浸润腺癌组中CYFRA 21-1表达水平高于原位腺癌组、微浸润腺癌组(均P<0.05)，但原位腺癌组与微浸润腺癌组之间CYFRA 21-1表达水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，NSE表达水平在3组间比较，差异均无统计学意义(P<0.05)，这与肿瘤标志物在肺癌诊断中特异度较低结果相一致[17]。

对7种自身抗体在肺癌组中阳性率进行检测，在年龄、性别、吸烟史、肿瘤TNM分期中差异无统计学意义(均P<0.05)，与既往研究报道相一致[18]。在病理分型中，SOX2、GBU4-5、MAGE A1阳性率检测差异有统计学意义(P<0.05)，与MURRAY等[18]研究表明P53、GBU4．5在非小细胞肺癌、SOX2在小细胞肺癌中灵敏度及特异度均较高相一致。

综上所述，肺癌自身抗体对早期肺癌诊断有重要价值，在原位腺癌、微浸润腺癌及浸润腺癌中表达水平存在差异，与肿瘤的浸润程度有关。肺癌自身抗体检测对肺癌病理分型的判定也有一定的价值。本研究中仍存在不足，本研究中不同病理类型标本量少，可能对自身抗体在病理类型中的阳性率的研究产生影响，因此需要进一步扩大样本量研究肺癌自身抗体在肺癌中的诊断价值。