尿NGAL、L-FABP及RBP与老年2型糖尿病肾病的相关性研究

钟开义，黎宝仁，张祖文，王 海

(海南西部中心医院肾内科，海南儋州 571799)

糖尿病肾病(DKD)是2型糖尿病患者常见的慢性微血管病变，呈进行性不可逆发展，不及时治疗最终可导致患者终末期肾衰竭和死亡[1-2]。近年来研究发现，中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)及视黄醇结合蛋白(RBP)是反映肾小管-间质损伤和肾功能损伤程度的有效指标，可能参与了DKD的发生、发展[3-5]。本研究通过观察老年2型DKD患者尿NGAL、L-FABP及RBP水平变化，并分析其与尿微量清蛋白/肌酐比值(UACR)及估算的肾小球滤过率(eGFR)的相关性，旨在为2型DKD的早期治疗提供参考依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年1月至2018年3月本院收治的老年2型DKD患者184例作为研究对象，男性102例，女性82例，年龄60～85岁，平均(69.35±7.20)岁。纳入标准:(1)符合美国糖尿病协会2型糖尿病诊断标准[6]；(2)经过肾活检诊断为DKD或临床特点符合DKD。排除标准:(1)急慢性肾小球肾炎、尿路感染及其他肾脏疾病者；(2)合并酮症酸中毒、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、甲状腺疾病或其他代谢性疾病者；(3)近期应用免疫抑制剂或服用肾毒性药物者。另选择同期来本院体检健康者60例作为健康对照组，男性32例，女性28例，年龄60～79岁，平均(67.24±6.83)岁。本研究经医院伦理委员会批准，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1资料收集 根据UACR分为尿蛋白正常组68例(UACR<30 mg/g)，微量清蛋白尿组66例(UACR 30～300 mg/g)和大量清蛋白尿组50例(UACR>300 mg/g)。收集肾活检或入院后次日的临床资料作为基线资料，包括年龄、性别、糖尿病病程、体质量指数(BMI)、血压、血红蛋白、空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、血肌酐、血尿素氮、尿酸、eGFR、清蛋白、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等指标。

1.2.2检测方法 留取所有研究对象的晨起尿液标本5 mL，2 000 r/min离心10 min，取上清液置-80 ℃冻存待检测。采用酶联免疫吸附测定检测尿NGAL、L-FABP及RBP水平，试剂均购自美国RD公司。

2 结 果

2.1各组一般临床资料及生化指标比较 尿蛋白正常组、微量清蛋白尿组和大量清蛋白尿组空腹血糖、HbA1c、UACR及LDL-C水平明显高于健康对照组，大量清蛋白尿组收缩压、舒张压、血肌酐、血尿素氮及尿酸水平明显高于健康对照组、尿蛋白正常组和微量清蛋白尿组，大量清蛋白尿组血红蛋白、清蛋白及eGFR水平明显低于健康对照组、尿蛋白正常组和微量清蛋白尿组，差异均有统计学意义(P<0.05)。各组年龄、BMI、总胆固醇及三酰甘油比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2各组尿NGAL、L-FABP及RBP水平比较 健康对照组、尿蛋白正常组、微量清蛋白尿组和大量清蛋白尿组尿NGAL、L-FABP及RBP水平呈逐渐上升趋势，大量清蛋白尿组中水平最高，各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3NGAL、L-FABP及RBP水平与UACR、eGFR的相关性分析 Pearson相关分析显示，老年2型DKD患者尿NGAL、L-FABP及RBP水平与UACR均呈正相关(r=0.542、0.826、0.706，P<0.01)，尿NGAL、L-FABP及RBP水平与eGFR均呈负相关(r=-0.483、-0.607、-0.635，P<0.01)。见图1。

表1 各组一般临床资料及生化指标比较

续表1 各组一般临床资料及生化指标比较

注:与健康对照组比较，aP<0.05；与尿蛋白正常组比较，bP<0.05；与微量清蛋白尿组比较，cP<0.05。

表2 各组尿NGAL、L-FABP及RBP水平比较

注:与健康对照组比较，aP<0.05；与尿蛋白正常组比较，bP<0.05；与微量清蛋白尿组比较，cP<0.05。

注:A表示NGAL与UACR的相关性散点图；B表示NGAL与eGFR的相关性散点图；C表示L-FABP与UACR的相关性散点图；D表示L-FABP与eGFR的相关性散点图；E表示RBP与UACR的相关性散点图；F表示RBP与eGFR的相关性散点图。

图1 NGAL、L-FABP及RBP与UACR、eGFR的相关性散点图

3 讨 论

DKD是一种以血管损害为主的肾小球病变，其发病隐匿、早期症状不明显，随着病程的延长患者出现持续蛋白尿、水肿、高血压，eGFR降低，进而发展为肾功能不全、尿毒症，严重危害人类的生命健康[6]。因此，寻找2型糖尿病早期肾脏损伤标志物对患者的及时诊断和干预治疗显得尤为重要。

NGAL是载脂蛋白超家族的一名新成员，主要由中性粒细胞激活后分泌，近端肾小管细胞等各种上皮细胞也可以分泌。正常情况下，肾、肺、胃和结肠等组织中很少表达NGAL，但可大量表达于受损的肾小管上皮细胞，诱导肾小管间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡，并释放到血液和尿液中，起到保护肾脏的作用。研究发现，NGAL在受损的肾小管中高表达，是反映急性肾损伤的有效指标[7]。L-FABP是一种相对分子质量为1.5×103的细胞胞质蛋白质，最早发现于肝细胞，在肾脏近端小管、胰腺及小肠等也有表达，参与游离脂肪酸在细胞内的摄取、转化及氧化等多种代谢途径。研究表明，L-FABP可反映慢性肾小管间质性损伤严重程度，是一个很有应用前景的肾脏损伤早期诊断标志物[8]。RBP是血液中维生素A特异性转运蛋白，主要在肝脏合成，人尿液中RBP的正常水平极低，当肾小管损伤后RBP重吸收功能障碍会导致尿液RBP水平显著升高，对诊断早期DKD具有较好的价值[9]。本研究显示，健康对照组、尿蛋白正常组、微量清蛋白尿组和大量清蛋白尿组中尿NGAL、L-FABP及RBP水平呈逐渐上升趋势，并在大量清蛋白尿组中水平最高，且各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。说明在尿清蛋白尚属正常范围的情况下，尿NGAL、L-FABP及RBP水平已有明显升高，因此可认为在早期DKD中，尿NGAL、L-FABP及RBP水平发生变化比出现清蛋白尿要早，尿NGAL、L-FABP及RBP检测有助于评估2型DKD患者的病情进展。SIDDIQI等[10]研究显示，尿NGAL水平在病理性蛋白尿出现之前就开始升高，且NGAL水平随着DKD的进展而逐步增加。VIJAY等[11]研究表明，尿NGAL水平与DKD患者蛋白尿的严重程度一致，一定程度上反映了DKD的病理进展。KAMIJO-IKEMORI等[12]进行了一项关于尿L-FABP和DKD相关性的研究，结果显示，尿L-FABP水平随着清蛋白尿的进展而升高，在终末期肾病升高更为明显。梁雅灵等[13]研究表明，尿L-FABP水平与蛋白尿的进展有关，而且尿L-FABP水平在尿蛋白水平正常的人群中已经开始升高，可以有效地预测2型DKD的进展，L-FABP有望作为DKD风险评估的指标。亦有研究发现，RBP及NGAL水平在早期DKD患者中明显升高，且随着患者病情发展而逐渐增加，是评价肾脏功能的有效指标[14]。相关性分析显示，2型DKD患者尿NGAL、L-FABP及RBP水平与UACR均呈正相关，尿NGAL、L-FABP及RBP水平与eGFR均呈负相关。说明DKD患者尿NGAL、L-FABP及RBP水平与肾脏损伤程度密切相关，有望作为早期诊断糖尿病肾脏损伤的生物标志物。KAUL等[15]研究认为，尿NGAL水平可反映DKD患者eGFR的改变和肾损害的严重程度，检测尿NGAL水平有助于DKD的早期诊断和早期干预治疗。PANDURU等[16]研究表明，2型糖尿病患者尿L-FABP水平与eGFR下降率显著相关，尿L-FABP是反映糖尿病患者肾功能变化的重要指标。朱珍等[17]对288例2型糖尿病患者肾功能变化与尿L-FABP水平关系进行纵向研究，结果显示尿L-FABP水平与糖尿病患者的肾功能改变相关，动态监测尿L-FABP水平可早期预测2型DKD的进展。另有研究显示，尿RBP水平随着UACR的增加而增加，与UACR水平呈正相关，可见尿RBP水平与肾脏损伤程度密切相关，且随着病程的发展而加重[18]。

4 结 论

尿NGAL、L-FABP及RBP水平在老年2型DKD患者中明显升高，其水平与蛋白尿进展和肾脏损伤的严重程度密切相关，对评估DKD患者的病情发展有一定帮助。但NGAL、L-FABP及RBP在DKD中的具体作用机制尚未明确，仍需要大规模临床研究和长期随访观察NGAL、L-FABP及RBP与DKD的关系，为阐明NGAL、L-FABP及RBP在DKD过程中的作用提供有利的佐证。