新生儿缺氧缺血性脑病血清IGF-1、GH、NGB水平与NBNA评分的相关性分析

新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)指由于围生期缺氧窒息导致脑组织缺血缺氧性损害，是新生儿的常见疾病，足月儿发病率较早产儿高，目前发病机制尚不清楚。HIE临床表现主要为意识障碍、肌张力异常、原始反射消失、颅内压升高及脑干症状，根据严重程度将HIE分为轻度、中度和重度。HIE导致神经系统损伤，部分HIE患儿伴有不同程度的神经系统后遗症，如失神和脑瘫[1-3]。新生儿行为神经学评分(NBNA)可用于全面评估新生儿神经系统，并一定程度反映HIE患儿脑损伤程度[4]。胰岛素样生长因子1(IGF-1)是一种活性多肽，在神经系统增殖和调节中起重要作用[5-6]；血清生长激素(GH)可影响IGF-1的表达和分泌，有研究表明，GH可影响新生儿神经系统发育[7-8]；神经球蛋白(NGB)可有效地结合氧分子，提高脑组织的氧利用率[9]。本研究旨在探讨HIE患儿IGF-1、GH、NGB水平与NBNA评分的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选自2011年10月—2013年4月在我院新生儿科住院的60例HIE患儿，其中男32例，女28例。根据诊断标准将患儿分为轻度组(33例)、中度组(20例)和重度组(7例)，另选择同期我院20名正常新生儿作为对照组，其中男10名，女10名。纳入标准：孕龄37～42周；所有新生儿出生体重2500～4 000 g；所有HIE患儿均符合诊断标准；母亲一般情况好；受试者无先天性畸形或代谢性疾病。排除标准：患儿死亡或父母拒绝配合；代谢性疾病引起的先天性脑部异常或抽搐；父母有吸毒史或吸烟史；不符合纳入标准。所有患儿家长均签署知情同意书，且本研究已通过我院伦理委员会认证批准。

1.2 标本采集 新生儿出生后第1天(急性期)和第14天(恢复期)收集清晨空腹静脉血，取自凝血3 mL送检，室温静置20 min后，以1 000 r/min离心5～10 min，将上层血清储存于-90 ℃条件下。

1.3 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IGF-1、NGB水平 严格按照试剂盒(R&D Systems，USA)实验步骤操作，将标准品梯度稀释，制作标准曲线。将血清样本室温下均匀混合，每个样品做3个复孔；使用酶标仪在490 nm测定OD值；根据标准曲线计算血清IGF-1、NGB含量。

1.4 放射免疫分析法测定血清GH水平 严格按照试剂盒[Biofuge prime Heraeus(Porton Down，UK)]实验步骤操作，采用放射免疫测定法检测血清GH水平。将血清样本室温下均匀混合后，将130 IGH抗体100 μL和血清100 μL室温孵育24～30 h；加入500 μL免疫分离剂并均匀混合，室温孵育20 min；以4 000 r/min离心15 min并收集上清液。所有试管发射系数由科亚生物技术公司计算机自动分析并统计结果。

1.5 NBNA NBNA评分由经过培训、操作熟练的专业医师完成。测定要求在安静、半暗及温度26 ℃房间，喂奶后1 h进行，检查时间为10 min，状态不佳时可间隔。评分包括行为能力、主动肌张力、被动肌张力、原始反射和一般反应5个部分，共20项，每项按0～2分评分，总分40分。

2 结 果

2.1 4组一般资料比较(见表1)

注：4组各项比较，P>0.05。

2.2 4组血清IGF-1、NGB、GH水平比较 患儿血清IGF-1、NGB水平与HIE病情严重程度相关，患儿病情越重血清IGF-1水平越低，NGB水平越高，差异有统计学意义(P<0.05)；患儿血清GH水平与HIE病情严重程度相关性不大，差异无统计学意义(P>0.05)。详见表2。

组别样本量 IGF-1(ng/mL) 急性期缓解期 NGB(μg/mL) 急性期缓解期 GH(μg/mL) 急性期缓解期对照组2053.36±26.51 60.14±25.8279.56±23.2126.37±13.7828.81±15.1211.03±13.28轻度组3336.12±22.49①58.26±26.4088.63±44.9129.76±15.4529.16±14.9511.21±13.26中度组2029.22±13.68①41.39±27.02①②182.36±66.22①②95.35±35.36①②19.87±13.4518.37±12.34重度组718.73±13.01①24.15±14.56①②285.32±84.16①②③163.75±56.43①②③18.56±14.4315.76±14.29

与对照组比较，①P<0.05；与轻度组比较，②P<0.05；与中度组比较，③P<0.05。

2.3 4组NBNA评分比较(见表3)

表3 4组NBNA评分比较(±s) 单位：分

与对照组比较，①P<0.05；与重度组比较，②P<0.05。

2.4 HIE患儿血清IGF-1、GH和NGB水平与NBNA评分的相关性分析 急性期和恢复期HIE患儿血清IGF-1水平与NBNA评分呈正相关(r=0.542，P<0.05；r=0.684，P<0.05)；急性期和恢复期HIE患儿血清NGB水平与NBNA评分呈负相关(r=-0.650，P<0.05；r=-0.714，P<0.05)；急性期和恢复期HIE患儿血清GH水平与NBNA评分无相关性(r=-0.214，P>0.05；r=-0.176，P>0.05)。详见表4。

表4 HIE患儿血清IGF-1、GH和NGB水平与NBNA评分的相关性分析

3 讨 论

HIE是由于围生期各种因素引起的新生儿脑组织缺氧，常见的原因包括羊水污染、妊娠期高血压疾病或子痫、胎盘异常、脐带异常[10-11]。中度及以上HIE可能引起脑瘫和智力发育障碍，严重影响患儿生存质量，甚至危害生命健康。若早期发现并诊断HIE，采取适当的措施治疗和干预，可有效减少HIE患儿出生，并降低HIE患儿围生期死亡率[12-14]。

IGF-1是神经系统重要的调节因子，直接促进新生儿神经细胞生长和分化，可促进血管生成，营养神经

系统，间接降低神经细胞死亡率。有研究显示，新生儿在子宫内或出生时出现缺氧缺血时，IGF-1可发挥保护神经系统作用。IGF-1通过不同机制保护HIE患儿神经系统，包括降低新生儿脑血管压力和脑细胞死亡率。患有HIE时，新生儿自身产生反应，外周血清IGF-1通过特定通道转运到脑细胞，从而有效防止病情进展[15-17]。NGB是一种在氧运输中起作用的蛋白质，有研究表明，NGB可较大程度保护缺氧缺血性脑细胞，主要原因是在缺氧缺血情况下，NGB具有高亲和力，有效结合氧，以维持神经系统的正常功能。HIE发生时，身体产生一系列有毒物质，如一氧化氮等，NGB可有效去除有毒物质并保护神经系统[9]。有研究显示，GH对神经细胞有维持作用，且GH影响IGF-1的合成和分泌[8]，但未表明GH是否与HIE严重程度相关。

本研究对轻度、中度、重度HIE患儿与对照组血清IGF-1、NGB、GH水平进行两两比较，发现患儿血清IGF-1、NGB水平与HIE病情严重程度相关，病情越重患儿血清IGF-1水平越低，NGB水平越高，差异有统计学意义(P<0.05)；患儿血清GH水平与HIE病情严重程度相关性不大，差异无统计学意义(P>0.05)。急性期和恢复期HIE患儿血清IGF-1水平与NBNA评分呈正相关(r=0.542，P<0.05；r=0.684，P<0.05)；急性期和恢复期HIE患儿血清NGB水平与NBNA评分呈负相关(r=-0.650，P<0.05；r=-0.714，P<0.05)；急性期和恢复期HIE患儿血清GH水平与NBNA评分无相关性。

HIE是一种复杂的临床疾病，不能通过单一指标判断患儿病情严重程度和估计预后，应通过临床表现、体格检查、实验室检查、影像检查，对患儿进行全面评估和分析[18-20]。本研究发现HIE与正常新生儿血清IGF-1和NGB水平比较，差异有统计学意义，且与NBNA评分有关(P<0.05)，提示HIE患儿血清IGF-1和NGB水平可能与病情严重程度有关，可能预测HIE患儿预后，但其敏感性和特异性仍需进一步深入研究。