托吡酯及丙戊酸钠对癫痫患儿氧化应激的影响

1 资料与方法

1.1一般资料：选择2017年1月～2018年12月在我院儿科门诊诊治的癫痫患儿80例，均经临床及脑电图确诊，均为部分性发作，作为癫痫组。癫痫的诊断标准符合1989年国际抗癫痫联盟关于癫痫发作的分类标准[2]，尚未予抗癫痫药物治疗。40例患儿予TPM单药治疗，作为TPM组。其中男19例，女21例；年龄3～5岁，病程4～6个月； 40例患儿予VPA单药治疗，作为VPA组。其中男21例，女19例；年龄3～5岁，病程4～6个月。选取40例健康儿童作为对照组，均无癫痫及其他神经系统疾病，其中男20例，女20例；年龄3～5岁。各组患儿在性别及年龄方面差异均无统计学意义(P>0.05)。所有儿童1周内无发热、咳嗽、腹泻及抽搐史，本次研究经过我院医学伦理委员会同意。

1.2方法

1.2.1治疗方法：TPM组给予TPM(西安杨森公司生产)单药治疗，初始剂量0.5～1.0 mg/(kg·d)，晚上1次口服，以后每周增加0.5～1.0 mg/(kg·d)，直至目标剂量4.0～8.0 mg/(kg·d)，共需4～8周。若4周后症状控制但未达目标剂量，则暂缓加量，继续原剂量；如出现明显不良反应，则减慢加量速度，直至停药。VPA组予丙戊酸钠口服溶液(赛诺菲杭州制药有限公司生产)单药治疗，20～30 mg/(kg·d)。

1.2.2检测方法：所有癫痫患儿于治疗前及治疗6个月后空腹采血2 ml，注入EDTA抗凝管，摇匀后立即离心(2 000 r/min，10 min)，分离血浆，-20℃低温保存备测。MDA物质的量浓度测定采用硫代巴比妥酸法，过氧化脂质降解产物中的MDA可与硫代巴比妥酸缩合，形成红色产物，分光光度计测其吸光度。以黄嘌呤氧化法测定SOD活性，SOD对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，采用黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基，后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显示剂作用下亚硝酸盐呈现紫红色，分光光度计测其吸光度。严格按说明书要求进行操作。

2 结果

2.1癫痫患儿治疗前与对照组SOD及MDA比较：癫痫患儿治疗前血清MDA物质的量浓度明显高于对照组，SOD物质的量浓度明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

组别例数SOD(kU/L)MDA(μmol/L)对照组4070.31±11.686.28±2.14癫痫治疗前8059.61±9.697.34±1.69t值5.3162.957P值<0.01<0.01

2.2癫痫患儿治疗前后SOD及MDA比较：TPM组患儿治疗前后血清MDA及SOD物质的量浓度比较，差异无统计学意义(P>0.05)，VPA组患儿治疗前后血清MDA及SOD物质的量浓度比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

组别例数SOD(kU/L)治疗前治疗后MDA(μmol/L)治疗前治疗后VPA组4058.31±11.0856.91±7.607.43±1.548.05±2.33TPM组4060.91±7.9959.95±9.747.26±1.847.82±1.76t值0.7240.5641.4101.402P值>0.05>0.05>0.05>0.05

3 讨论

癫痫是儿童期常见神经系统疾病，其病因尚不清楚，患儿反复癫痫发作，可能出现窒息及意外伤害，影响患儿心理发育，降低生活质量。TPM及VPA是常见的抗癫痫药物，对于多种类型癫痫均有良好的效果，改善症状，提高患儿生活质量。但TPM及VPA均需要长期服用，可以出现一些不良反应[3]，部分患儿需要更换药物治疗。

机体内活性氧产生与抗氧化防御机制处于动态平衡，如抗氧化防御机制减弱，活性氧产生过度，则引起氧化应激。机体中过多的活性氧可导致机体细胞膜磷脂过氧化，对组织细胞产生一系列的损害[4]。生物体内含有大量的脂质，易遭受自由基攻击,引起体内的脂质过氧化，产物为MDA，故MDA可作为氧化应激的一个衡量指标，反映出细胞损伤的程度。SOD在体内主要灭活超氧阴离子自由基，阻断自由基产生脂质过氧化反应，对机体细胞起保护作用。MDA和 SOD的检测，可反映机体脂质过氧化以及清除氧自由基能力的程度[5]。

人脑中铁含量较高，氧消耗量大，会产生大量自由基。但SOD和谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶含量较低,自由基清除能力与其他器官比较相对不足。癫痫发作引发大量Ca2+内流也可诱发自由基的大量产生，扰乱线粒体的抗氧化系统[6]。损伤线粒体DNA，导致其编码的呼吸链中的亚基表达下调。诱导线粒体膜渗透性增强，诱发细胞凋亡。本研究中癫痫患儿治疗前血清MDA物质的量浓度明显高于对照组，SOD物质的量浓度明显低于对照组，提示癫痫患儿体内存在氧化应激反应。

Yüksel A等研究显示VPA治疗后癫痫患儿谷胱甘肽过氧化物酶水平降低[7]，而Yiʂ U等研究显示VPA治疗后癫痫患者谷胱甘肽过氧化物酶水平无明显变化[8]。Agarwal NB等研究显示TPM降低癫痫小鼠谷胱甘肽水平[9]，而Yürekli VA等研究显示TPM增加癫痫患者谷胱甘肽水平[10]。本研究中TPM组患儿治疗前后血清MDA及SOD水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。VPA组患儿治疗前后血清MDA及SOD水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。提示VPA及TPM对氧化应激反应无明显影响。

癫痫发病机制目前仍不完全清楚，线粒体是调节能量代谢的关键因素，活性氧可影响线粒体代谢，参与癫痫的发作，氧化应激反应导致神经系统氧化损伤。抗癫痫药物对氧化应激的影响仍存在争议，需要进一步研究，针对氧化应激治疗可能为抗癫痫治疗提供新的方向[11]。