热激和山梨酸钾处理对猕猴桃果实灰霉病的抑制效应

葛铭佳，张丽媛，艾佳音，吉 茹，刘静珂，刘梦斐，何 玲

（西北农林科技大学园艺学院，杨凌 712100）

0 引 言

猕猴桃含有丰富的维生素、抗氧化活性物质以及矿物质元素，深受人们喜爱。但猕猴桃大多在降雨集中期采收，果实表面往往附着了大量的致病微生物，这些微生物极易从伤口处入侵果实，造成果实腐烂变质。已有研究表明引起猕猴桃贮藏后期霉烂的主要真菌病原体之一为灰霉菌（Botrytis cinerea）[1]。低温贮藏是最广泛的果蔬贮藏保鲜方法，可在一定程度减轻采后病害的发生，但猕猴桃在冷藏后期仍存在较高的灰霉病发病率。采后热激处理已被用于多种园艺产品的采后抑菌保鲜，可通过直接杀死或抑制病原菌生长和繁殖，或诱导寄主细胞苯丙烷代谢的增强，或诱导抗病相关物质和病程蛋白的合成，从而提高果蔬自身的抗病能力[2]。例如，热激处理能够有效控制番茄[3]和苹果灰霉病[4]、香蕉炭疽病[5]、芒果炭疽病和茎端腐烂病[6]。山梨酸钾作为一种广谱的防腐剂，通过改变病原菌的细胞膜结构，使膜运输系统紊乱，达到杀死病原菌的目的；或者与病原菌酶系统中的巯基结合，破坏其酶系统，抑制病原菌的活性[7]。山梨酸钾已应用于鲜切梨[8]、甜樱桃[9]、枸杞[10]、芒果[11]等的抑菌保鲜，但在猕猴桃上的应用鲜有报道。经过前期预试验，热激与保鲜剂复合处理或可成为一种颇为有效的防腐方法，一方面可以降低热水处理的有效温度，避免处理温度过高对果实造成伤害；另一方面，可以降低保鲜剂的使用剂量，增强保鲜剂的作用效力，延长有效作用时间。因此，本试验旨在确定一种安全有效的保鲜措施，为提高猕猴桃的鲜食营养价值及解决采后极易霉变腐烂的问题提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

试验材料为“徐香”猕猴桃，于2017 年10 月19 日采自陕西眉县管理良好的果园，采收猕猴桃果实可溶性固形物质量分数（Soluble Solid Content，SSC）为7%～8%，采收后立即运回实验室，挑选大小均匀、无机械损伤、无病虫害果实用于后续试验。灰霉菌为灰葡萄孢霉，由西北农林科技大学植物保护学院提供，4 ℃冰箱保存（定期活化以保证灰霉菌活性）。

山梨酸钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二纳、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinyl Pyrrolidone，PVP）、Triton X-100、聚乙二醇6000（Polyethylene Glycol-600，PEG-6000）、乙二胺四乙酸二钠（ Ethylenediaminetetraacetic acid-2Na，EDTA-2Na）、愈创木酚、无水乙醇、邻苯二酚、乙二胺四乙酸（Ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA）、冰醋酸、无水醋酸钠、几丁质、丙酮、脱盐蜗牛酶、 四硼酸钾、 对二甲基苯甲醛（4-Dimethylaminobenzaldehyde，DMAB）、浓盐酸、N-乙酰葡萄糖苷、L-抗坏血酸、3,5-二硝基水杨酸（3,5-Dinitrosalicylic Acid，DNS）、葡萄糖、昆布多糖、酒石酸钾钠、结晶酚、β-巯基乙醇、亚硫酸钠、葡萄糖、十二烷基磺酸钠（Sodium Dodecyl Sulfate，SDS）等，均为国产分析纯。

1.2 仪器与设备

ES-315 立式全自动高压灭菌锅（TOMY，日本）、BCD-236DT 型冰箱（海尔，中国）、SW-CJ-2FD 型紫外无菌操作台（Airtech，苏州安泰）、3K15 型台式高速冷冻离心机（Sigma，德国）、I3X 多标记微孔板检测系统（Molecular Devices，美国）、A11 basic 研磨粉碎机（IKA，德国）、PAL-BX/ACID8 奇异果糖酸一体机（ATAGO/爱拓，日本）等。

1.3 方法

1.3.1 灰葡萄孢霉孢子悬浮液制备

将灰霉菌培养在马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar，PDA）上，于24 ℃培养箱内培养7 d 待菌丝长出。用无菌接种针挑取培养皿边缘菌丝体，置于含有0.05%（体积分数）吐温80 的无菌蒸馏水中，搅拌洗下孢子。采用红血球计数板计数，用无菌水将孢子浓度调节至1×106个/mL，现用现配。

1.3.2 样品处理

1）离体试验

前期用不同浓度山梨酸钾和不同温度热水浸泡接种过灰葡萄孢霉的猕猴桃，综合正交试验结果，得出山梨酸钾最适处理质量浓度5 g/L，热处理最佳温度为48 ℃，浸泡时间为8 min。

配置不添加山梨酸钾的培养基（记为PDA 1）和含有5 g/L 山梨酸钾的PDA 培养基（记为PDA 2），分别倒入培养皿备用。将配置好的孢子悬液分成A、B 两组，A 组不做处理，B 组孢子悬液经48 ℃水浴加热8 min。两组孢子悬液分别滴加至PDA 培养基中心，即试验设置4 组处理分别为：对照（CK）：PDA 1+10 μL 孢子悬液A；热激处理（HT）：PDA 1+10 μL 孢子悬液B；山梨酸钾处理（PS）：PDA 2+10 μL 孢子悬液A；热激和山梨酸钾复合处理（PS+HT）：PDA 2+10 μL 孢子悬液B。然后将所有平板放置（24±0.5）℃培养箱中培养，每天用十字交叉法[12]统计菌落直径，每个处理设3 个平板，试验重复3 次。

2）果实接种试验

用1%的NaClO 浸泡2 min 进行果面消毒后，立即用清水冲洗3 遍。晾干后用无菌接种针（直径约3 mm）在果实赤道部位形成伤口（深约3 mm），伤口晾干后，在伤口处滴入10 µL 配好的灰葡萄孢霉孢子悬浮液，自然晾干2 h。进行分组处理：以室温下18 ℃清水浸泡作为对照（记为CK），其余各组为48 ℃热水处理（记为HT），5 g/L 山梨酸钾处理（记为PS），48 ℃热水+5 g/L 的山梨酸钾溶液处理（记为PS+HT），均浸泡8 min。处理后将果实置于保鲜盒中，分别于24 ℃生化培养箱和0 ℃冰箱中保存。24 ℃条件下，在接种后0、1、2、3、4、5、6、7 d 用十字交叉法测定病斑直径并取病斑周围1.5 cm范围内果肉组织，液氮研磨后放-80 ℃冰箱保存。0 ℃条件下，在接种后0、7、14、21、25、30 d 测定病斑直径并取病斑周围1.5 cm 范围内果肉组织，液氮研磨后放-80 ℃冰箱保存。接种试验中每组处理用果40 个，每次取样6 个果实，重复3 次。

3）品质分析

将采摘猕猴桃果实经预冷后，分成4 组进行浸泡处理，处理方法同上。待果面晾干后装入PE 袋（0.04 mm），放入塑料框中，运回冷库，在温度（0±0.5）℃、相对湿度85%±5%条件下进行贮藏，每10 d 取10 个果测定相关指标，并且另取10 个整果果肉部分液氮冷冻后置于-80 ℃冷藏待测。每个处理用果30 kg，重复3 次；每个重复随机抽取100 个果实另存，待出库时测定失重率及腐烂率。

1.3.3 指标测定

1）接种试验指标测测定

菌落直径和病斑直径采用十字交叉法测定[12]。

发病指数：根据霉腐面积占果实总表面积的比例划分等级：未发病为0 级，＞0%～20%为1 级，＞20%～40%为2 级，＞40%～60%为3 级，＞60%～100%为4 级。病情指数计算公式为

多酚氧化酶（Polyphenol Oxidase，PPO）和过氧化物酶（Peroxidase，POD）活性测定参考Zhou 等[13]的方法，略加修改；几丁质酶（Chitinase，CHI）和β-1,3-葡聚糖酶（β-1,3-Glucanase，GLU）活性测定参考Jiang 等[14]的方法。

2）品质指标测定

可溶性固形物（SSC）、可滴定酸（Titratable Acid，TA）使用PAL-BX/ACID8 奇异果糖酸一体机测定，每组处理3 个重复、每个重复用果4 个。

维生素C（Vitamin C，Vc）含量测定使用固蓝盐B比色法[15]，以100 g 果肉中含有的维生素C 质量表示，即mg/100g。

贮藏至第90 天时统计果实的腐烂率和失重率

1.3.4 数据处理及分析

数据统计分析应用SPSS 17.0 进行单因素方差分析，差异显著性测定采用邓肯氏多重比较法，P＜0.05 表示差异显著，作图采用Origin 16.0 软件。

2 结果与分析

2.1 不同处理对离体灰霉菌菌丝生长的抑制

在24 ℃培养24 h 后，处理平板均未有明显菌落生长。由图1 可知，培养期间，PS 及PS+HT 处理的菌落直径均显著小于CK（P＜0.05）；而HT 处理的菌落直径与CK 之间差异不显著（P＞0.05），仅在第4 天小于CK（P＜0.05）。在整个培养期间，各处理组间菌落直径差异显著（P＞0.05），PS+HT 复合处理的菌落直径显著低于其他组（P＜0.05），其次为PS 处理。

2.2 不同处理对接种灰霉菌猕猴桃果实病斑直径的影响

由图2 可看出，无论是在24 ℃还是0 ℃下，PS+HT复合处理均能延迟果实灰霉病发病时间，且复合处理的果实病斑直径均显著低于同时期其他组（P＜0.05）。在24 ℃下（图2a），相较于PS 处理果实的病斑直径仅在贮藏前期第2，3 和5 天表现低于CK（P＜0.05），HT 处理仅在第6 天与CK 差异不显著（P＞0.05）。低温推迟了猕猴桃灰霉病的发病时间，且减轻发病程度（图2b）。与24 ℃下结果略有差异，0 ℃下（图2b），HT 和PS 单一处理组在后期第25 和30 天与CK 无明显差异（P＞0.05）；而HT 处理相较于PS 处理和CK 虽延迟了果实的发病时间，但在发病后的第14 和21 天PS 果实病斑直径低于HT（P＜0.05）。

图1 不同处理对灰霉菌菌丝生长的影响 Fig.1 Effects of different treatments on B. cinerea mycelial growth

2.3 不同处理对接种灰霉菌猕猴桃果实发病指数的影响

不同温度贮藏结束时，CK 果实几乎全果腐烂（表 1）。与CK 相比，PS、HT 和PS+HT 处理均显著降低了猕猴桃感染灰霉菌后的发病指数（P＜0.05）。其中，PS+HT处理抑菌效果最佳，24 ℃和0 ℃贮藏下猕猴桃果实发病指数显著低于CK、PS 和HT 处理（P＜0.05）。PS 和HT处理之间差异不显著（P＞0.05）。

图2 24 ℃和0 ℃贮藏下不同处理对损伤接种灰霉菌猕猴桃果实病斑直径的影响 Fig.2 Effects of different treatments on lesion diameter of kiwifruit inoculated with B. cinerea storage at 24 ℃ and 0 ℃

表1 不同处理对损伤接种灰霉菌猕猴桃果实发病指数的影响 Table 1 Effects of different treatments on incidence index of kiwifruit inoculated with B. cinerea

2.4 不同处理对接种灰霉菌猕猴桃果实PPO 活性的影响

接种灰霉菌后猕猴桃果实PPO 活性总体上呈现上升的趋势。24 ℃下，在接种后0～5 d，CK 果实PPO 活性一直处于相对较低的水平，从第5 天开始，PPO 活性迅速升高。与CK 相比，在贮藏前5 d 内，HT 和PS 单一处理均诱导了果实内PPO 活性显著升高（P＜0.05）；在整个贮藏过程中，PS+HT 复合处理的果实PPO 活性始终维持较高的水平，除在第5 天与PS 差异不显著外（P＞0.05），整个时期均高于同时期CK、PS 和HT 处理（P＜0.05）（图3a）。由图3b 可知，0 ℃贮藏时HT 和PS 处理可以诱导猕猴桃果实内PPO 活性的迅速升高，到第21 天，PPO 活性趋于稳定；CK 果实内PPO 活性在整个贮藏过程中处于较低的水平，且变化趋势不明显。在接种14 d 之后，PS、HT 及其复合处理的PPO 活性均显著（P＜0.05）高于CK，两组单一处理之间差异不显著（P＞0.05），而PS+HT 复合处理果实的PPO 活性显著高于两组单一处理（P＜0.05）。

图3 24 ℃和0 ℃贮藏下不同处理对损伤接种灰霉菌猕猴桃果实PPO 活性的影响 Fig.3 Effects of different treatments on PPO activity of kiwifruit inoculated with B. cinerea storage at 24 ℃ and 0 ℃

2.5 不同处理对接种灰霉菌猕猴桃果实POD 活性的影响

猕猴桃果实接种灰霉菌后POD 活性呈现先上升后下降的趋势，24 ℃下，果实POD 活性的最大值出现在接种后第5 天，HT，PS 和PS+HT 处理的果实POD 活性分别是CK 果实的1.22、1.28 和1.45 倍，PS+HT 处理果实的POD 活性显著高于其他3 组（P＜0.05）。在接种后5～7 d，PS、HT 以及PS+HT 处理果实的POD 活性显著高于CK（P＜0.05），但三者之间差异不显著（P＞0.05）（图 4a）。0 ℃下，果实的POD 活性在第25 天达到最大值，此时PS、HT 以及两者复合处理果实的POD 活性分别是CK 果实的1.19、1.50、1.75 倍。除第7 天、第30 天之外，PS+HT 处理果实的POD 活性均显著高于CK、PS和HT 处理（P＜0.05）（图4b）。

2.6 不同处理对接种灰霉菌猕猴桃果实CHI 活性的影响

接种灰霉菌后猕猴桃果实CHI 活性变化趋势表现为前期迅速升高，后缓慢下降。24 ℃下，CHI 活性除PS 处理果实在第3 天出现峰值外，其余组果实均在第2 天出现峰值，HT，PS 和PS+HT 处理的果实CHI 峰值分别是CK 峰值的1.22 倍、1.27 倍、1.53 倍（图5a）。在整个0 ℃贮藏期内PS、HT、PS+HT 处理果实CHI 酶活性均表现高于CK 果实（P＜0.05）（图5b）。在2 种温度贮藏条件下，PS+HT 复合处理的CHI 峰值均显著高于CK、PS和HT 处理（P＜0.05）。

图4 24 ℃和0 ℃贮藏下不同处理对猕猴桃接种灰霉菌后POD活性的影响 Fig.4 Effects of different treatments on POD activity of kiwifruit inoculated with B. cinerea storage at 24 ℃ and 0 ℃

图5 24 ℃和0 ℃贮藏下不同处理对损伤接种灰霉菌猕猴桃果实CHI 活性的影响 Fig.5 Effects of different treatments on CHI activity of kiwifruit inoculated with B. cinerea storage at 24°C and 0°C

2.7 不同处理对接种灰霉菌猕猴桃果实GLU 活性的影响

接种灰霉菌后猕猴桃果实GLU 活性呈现先升高后降低的趋势。24 ℃下，果实GLU 活性的峰值出现在第2 天，HT，PS 及PS+HT 处理果实的GLU 峰值均显著高于CK（P＜0.05），HT 和PS 单一处理之间差异不显著（P＞0.05），PS+HT处理复合处理果实GLU活性显著高于同时期单一处理组（P＜0.05）（图6a）。0 ℃下，GLU 活性上升至第14 d 后逐渐下降，CK 果实较其他处理组果实变化缓慢（图6b）。在2 种温度贮藏期内，PS+HT 处理的果实GLU活性均表现高于CK 果实（P＜0.05），仅在0 ℃贮藏末期即第30 d 时与CK 差异不显著（P＞0.05）。

2.8 不同处理对猕猴桃果实贮藏期间营养品质的影响

在0 ℃贮藏过程中猕猴桃果实SSC 含量变化如图7a所示。4 组处理SSC 含量均呈现先升高后逐渐趋于平稳的变化趋势。在整个贮藏过程中PS、HT 和PS+HT 处理组与CK 之间无显著差异（P＞0.05）。由图7b 可知，TA含量随着贮藏时间的延长而下降。PS 和HT 处理可以在一定程度上延缓TA 的下降，但延缓幅度不明显。在整个贮藏过程中PS+HT 处理果实TA 含量下降幅度最小，与CK 差异显著（P＜0.05）。由图7c 可知，在整个贮藏过程中果实Vc 含量不断下降。PS、HT、PS+HT 处理果实Vc 含量均高于CK，PS 处理与CK 之间差异性不显著（P＞0.05），HT 和PS+HT 处理在贮藏50 d 后与CK 差异显著（P＜0.05）。贮藏结束时，HT 和PS+HT 处理的Vc质量分数分别为87.84 mg/100g 和91.54 mg/100g，约为CK 的1.13 倍和1.18 倍。

2.9 不同处理对贮藏期结束时猕猴桃果实失重率和腐烂率的影响

如表2 所示，在0 ℃下90 d 的贮藏期结束后，PS、HT 和PS+HT 处理组的失重率和腐烂率均显著低于CK(P＜0.05)。CK 的失重率是4.61%，分别是PS、HT 和PS+HT 处理的1.20、1.14 和2.18 倍。贮藏90 d后，与CK 相比，PS 处理显著抑制猕猴桃果实采后腐烂的发生（P＜0.05），而HT 和PS+HT 处理则均未发现腐烂。

图6 24 ℃和0 ℃贮藏下不同处理对损伤接种灰霉菌猕猴桃果实GLU 活性的影响 Fig.6 Effects of different treatments on GLU activity of kiwifruit inoculated with B. cinerea storage at 24 ℃ and 0 ℃

图7 不同处理对‘徐香’果实可溶性固形物、可滴定酸和维生素C 含量的影响 Fig.7 Effects of different treatments on SSC, TA and vitamin C content of kiwifruit

表2 不同处理对猕猴桃果实贮藏90 d 后失重率和腐烂率的影响 Table 2 Effects of different treatments on the rates of weight loss and decay of kiwifruit after storage 90 d

3 讨 论

热激处理可以减轻果蔬采后腐烂损失，主要是通过诱导合成植保素，直接抑制病原体生长，或诱导宿主启动防御反应[16]。本研究选用48 ℃热水处理猕猴桃，并在0 ℃贮藏90 d 后，HT 处理的果实的失重率和腐烂率低于对照，并且贮藏过程中其SSC 与对照没有明显差异，甚至一定程度延缓了果实贮藏期间TA 和Vc 含量的下降；表明热水处理对猕猴桃营养品质没有产生负面影响，且降低了猕猴桃果实采后腐烂率，与热处理苹果、桃子、瓜果等的结果相似[17-19]，为热水处理猕猴桃果实采后病害的控制提供依据。山梨酸钾的抗真菌特性已经广泛应用于多种园艺作物的灰霉病[20]和青霉病[21-22]等真菌性病害控制，但对猕猴桃采后病害防治还鲜有报道。在本研究中，5 g/L 山梨酸钾处理显著抑制了灰霉菌菌丝生长，这一结果与课题组前期的研究结果一致[9]，与48 ℃热水处理结合提高了山梨酸钾的抑菌效果。损伤接种试验结果显示，PS 和HT 单一处理在一定程度抑制了果实灰霉病的扩散，但两组处理间差异不明显，24 ℃贮藏前期HT处理对病斑扩散的抑制效果未优于PS，但在0 ℃接种试验中较PS 延迟了发病时间，在接种后第14 和21 天其果实病斑直径略高于PS，这种结果也呼应了PS 处理果实CHI 活性在0 ℃贮藏的第14 天迅速上升至峰值。正如Fadda 等[23]的研究，在53 ℃下1%的山梨酸钾处理对苹果青霉病的抑制效果优于20 ℃下同浓度的山梨酸钾处理。本研究中，无论在24 ℃还是0 ℃下，48 ℃热水和5 g/L山梨酸钾复合处理组的猕猴桃果实病斑直径和发病指数均显著低于同时期其他组（P＜0.05）。

果蔬在遭受外界病原菌侵染伤害时，会诱导苯丙烷代谢途径中防御酶（PPO、POD）活性的提高。PPO 和POD 能够将酚类物质氧化成对病原菌有毒害作用的醌，并参与植物细胞内木质素的生物合成，增强细胞壁厚度，以抵抗病原体感染[24]。本研究结果表明，经山梨酸钾和热激处理的猕猴桃果实表现出较对照更高的PPO 和POD活性。该结果可能是因为灰葡萄孢侵染果实后，热和山梨酸钾可以作为诱导因子，激发果实内PPO、POD 活性的升高，以促进酚类植保素和木质素的合成，从而增强猕猴桃果实对入侵病原菌的抵抗性[25]。几丁质酶（CHI）和β-1,3-葡聚糖酶（GLU）是2 种非常重要的病程相关蛋白（Pathogenesis Related protein，PR 蛋白），可以水解入侵病原真菌的细胞壁主要成分（几丁质和葡聚糖）[24]，抑制真菌的生长和发育速度，从而减轻由病原菌不断侵染造成的损失。L-精氨酸可以通过诱导番茄果实CHI 和GLU 酶活性的升高，减轻由B.cinerea 侵染造成的采后病害[26]；寡壳聚糖可以通过诱导CHI 和GLU 活性的升高，减轻脐橙果实采后炭疽病的发生[27]。与之相似，在本试验中，用5 g/L 山梨酸钾和48 ℃热水处理接种灰葡萄孢后的猕猴桃果实，探究其在24 ℃和0 ℃贮藏条件下对果实CHI 和GLU 活性的影响，结果表明：在24 ℃贮藏条件下，热激和山梨酸钾在第2 天诱导了两种酶活的迅速升高；在0 ℃贮藏条件下，CHI 和GLU 活性在第14 天出现明显的高峰。以上结果说明热激和山梨酸钾处理可能通过提高果实CHI 和GLU 活性，从而提高果实抗病性，抑制果实的病情发展。综上所述，在本研究中，热激、山梨酸钾及其复合处理均不同程度提高了猕猴桃果实PPO、POD、CHI、GLU 活性，从而减轻猕猴桃灰霉病发生。

SSC、TA、Vc 含量是反映果实风味和营养的重要指标。本研究中热激和山梨酸钾处理对SSC 含量变化没有影响，并在一定程度上延缓了TA、Vc 含量的下降，降低了果实采后营养物质的损失。另外，热激、山梨酸钾及其复合处理均显著降低了猕猴桃果实在低温贮藏90 d后的失重率和腐烂率。因此，热激、山梨酸钾及其复合处理有助保持猕猴桃采后果实的品质，并提高果实的贮藏性。

山梨酸钾作为世界公认的安全性食品添加剂，以其高效的抑菌特性及较为低廉的成本已被广泛应用于饮料、肉类以及化妆品等行业，且相关研究报道证实了其对果蔬防腐的有效性[28-29]，而山梨酸钾处理对猕猴桃果实采后病害的抑制效应及其对长期贮藏下猕猴桃果实品质影响鲜有报道。Ma 等[30]的研究表明热水处理较好地维持了猕猴桃果实在贮藏期间的品质，且减轻其冷害，而热水对于猕猴桃真菌病原及其对长期贮藏下猕猴桃果实腐烂的抑制效应则少见报道。因此，本研究将山梨酸钾复合热水处理，探究其对于离体灰霉菌和猕猴桃果实的影响，以期在猕猴桃采后长期贮藏过程中，在不损害甚至能更好地维持其营养品质的基础上，降低灰霉病发生，从而减轻果实霉烂带来的经济损失，为猕猴桃的防腐保鲜探究一种更加安全有效的措施。

4 结 论

1）在离体试验中，在24 ℃下的4 d 培养期间，5 g/L山梨酸钾及其与热水复合处理均始终抑制灰霉菌菌落直径的扩展（P＜0.05），而48 ℃热水处理的菌落直径在培养的2～3 d 均与同时期对照组无明显差异（P＞0.05）。

2）在接种试验中，5 g/L 山梨酸钾、48 ℃热激处理一定程度上抑制了灰霉菌在猕猴桃上的生长和繁殖，而复合处理不仅延迟了果实灰霉病发时间，且复合处理的果实病斑直径和发病指数均显著低于其他组（P＜0.05）。灰霉菌侵染初期，热激和山梨酸钾能够迅速诱导果实启动防御反应，提升多酚氧化酶PPO、过氧化物酶POD、几丁质酶CHI 和β-1，3-葡聚糖酶GLU 活性，但随着灰霉菌在果实内不断繁殖和蔓延，营养物质逐渐被分解，果实抗病能力减弱，防御相关酶活性下降。

3）山梨酸钾和热水处理延缓了冷藏期间果实可滴定酸和Vc 含量的下降，维持了可溶性固形物含量的稳定，且有效降低贮藏90 d 出库时猕猴桃果实的失重率及腐烂率（P＜0.05）。