乳腺癌患者血清、肿瘤组织中VEGF、IL-17的表达及与临床预后的相关性探讨*

刘俊骥

湖南省邵阳市中心医院 422000

乳腺癌属于临床常见的恶性肿瘤，根据病理类型可分为浸润性导管癌、导管内癌、黏液腺癌等。手术是目前治疗乳腺癌的首选方案，并辅以放疗、化疗、免疫治疗等[1]。因此，如何早期对乳腺癌作出诊断是提升患者生存率的关键。白介素-17(IL-17)是由Th17细胞分泌，其即可对机体起到保护作用，又可在多种肿瘤发病中发挥作用[2]。血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌细胞的表达及促血管细胞活性中发挥重要作用[3]。基于此本文主要探讨乳腺癌患者血清、肿瘤组织中VEGF、IL-17表达及与临床预后相关性。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2016年9月—2017年9月期间收治的60例乳腺癌患者作为乳腺癌组，年龄28～67岁，平均年龄(46.94±5.12)岁；选取40例乳腺良性肿瘤患者作为乳腺良性肿瘤组，年龄26～69岁，平均年龄(47.39±5.26)岁；选取同期于我院体检的20例健康女性作为对照组，年龄23～72岁，平均年龄(47.62±5.47)岁。三组年龄对比，差异无统计学意义(P>0.05)，有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 入选标准 (1)纳入标准：①乳腺癌患者均经病理学检查确诊；②就诊前均未行放疗、化疗等治疗；③均签署知情同意书。(2)排除标准：①合并自身免疫性疾病；②合并哮喘、肺炎及其他心肺疾病；③合并其他恶性肿瘤者；④无法接受长期随访者。

1.3 方法 乳腺癌组患者均行手术治疗或化疗，有手术指征的患者根据不同临床分期选取适宜的术式，无手术指征患者行化疗。

1.3.1 血清检测：乳腺癌组患者治疗前及术后7d抽取患者3ml静脉血测定VEGF、IL-17，乳腺良性肿瘤组患者与对照组均抽取3ml静脉血，测定VEGF、IL-17水平，所有样本均不抗凝，于室温下静置2h，以3 000r/min的速度离心10min，分离上清，置于-70℃下保存待测，均采取酶联免疫吸附法(ELISA)测定。

1.3.2 免疫组织化学方法 采用Envision二步法，IL-17兔抗人多克隆抗体、兔抗人血管内皮生长因子由北京中杉金桥公司提供；CD34鼠抗人单克隆抗体及二抗均由丹麦Dako公司提供；阴性对照以PBS代替一抗；标本于乳腺癌术后取材，利用10%的甲醛固定，利用石蜡包埋，切片厚度5μm，保存于-80℃下。病理切片由2名病理医师观察、判定，选择10个高倍镜(×400)视野，每个视野计数20个细胞，根据细胞染色情况判定。

1.4 观察指标 (1)对比三组VEGF、IL-17水平；(2)对比乳腺癌组手术前后VEGF、IL-17水平；(3)对比肿瘤组织及癌旁组织VEGF、IL-17水平；(4)随访3年，统计乳腺癌复发与未复发患者VEGF、IL-17表达水平，分析其与预后的关系。

2 结果

2.1 三组血清VEGF、IL-17水平对比 乳腺癌组VEGF、IL-17水平>乳腺良性肿瘤组>对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 三组VEGF、IL-17水平对比

2.2 乳腺癌组肿瘤组织与癌旁组织VEGF、IL-17水平对比 肿瘤组织VEGF、IL-17水平较癌旁组织高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 乳腺癌组肿瘤组织与癌旁组织VEGF、IL-17水平对比

2.3 乳腺癌组手术前后血清VEGF、IL-17水平对比 术后，乳腺癌组血清VEGF、IL-17水平均较术前低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 乳腺癌组治疗前后VEGF、IL-17水平对比

2.4 复发与未复发患者血清VEGF、IL-17表达水平对比 随访3年，乳腺癌患者复发34例，未复发26例；复发患者血清VEGF、IL-17表达水平较未复发患者高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 复发与未复发患者血清VEGF、IL-17表达水平对比

2.5 相关性分析 血清VEGF、IL-17表达水平与乳腺癌术后预后均呈负相关(r=-0.412、-0.787，P=0.000、0.000)，即随着VEGF、IL-17表达水平的升高，患者预后越差，复发率越高。

3 讨论

乳腺癌多发于女性，具有发病率高、死亡率高等特点，临床上对其发病机制尚不明确，多认为与遗传、雌激素分泌等因素相关，若不及时做好早期筛查，并采取有效的治疗措施，癌细胞将发生转移，并侵入多个器官，甚至危及患者生命[4]。因此，早期对乳腺癌作出诊断及治疗具有重要意义。乳腺癌的发生发展与新生血管形成密切相关，其中VEGF是内皮细胞特异性有丝分裂原，其属于促脉管形成调节细胞，参与多种肿瘤的恶变过程[5]。刘志春等[6]研究指出，VEGF过度表达可能在三阴性乳腺癌的恶变及进展中发挥重要作用，其表法与三阴性乳腺癌的淋巴结转移、远处转移、侵袭性强等密切相关。Gao S[7]等研究指出，VEGF被认为是淋巴管生成的主要介质，与肿瘤发生及转移密切相关。IL-17是由T辅助细胞亚群Th17细胞分泌，其促炎作用较强，在多种炎症、自身免疫性疾病及肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用[8]。赵严冬等[9]研究指出，IL-17可促进人乳腺癌细胞的侵袭；Alinejad V等[10]研究也指出，炎症是引发乳腺癌的重要因素，Th17细胞通过产生促炎性细胞因子(IL-17)在乳腺癌等多种疾病中发挥作用。本研究结果显示，乳腺癌组VEGF、IL-17水平>乳腺良性肿瘤组>对照组，肿瘤组织VEGF、IL-17水平较癌旁组织高，乳腺癌组术后血清VEGF、IL-17水平均较术前低，充分证明VEGF、IL-17的促瘤作用，其可有效促进乳腺癌组织中新生血管形成，使血管通透性不断增加，抑制肿瘤细胞凋亡，为乳腺癌细胞生长提供良好环境，进而促进肿瘤发生及发展；而肿瘤切除后，VEGF、IL-17来源消失，使其表达水平恢复至正常水平。本研究结果显示，复发患者血清VEGF、IL-17表达水平较未复发患者高，血清VEGF、IL-17表达水平与乳腺癌术后预后均呈负相关，表明乳腺癌患者VEGF、IL-17表达水平与患者临床预后密切相关。

综上所述，VEGF、IL-17在乳腺癌中呈高表达，且其水平与患者临床预后相关性较高，可将VEGF、IL-17作为乳腺癌治疗的实验及理论依据。