脓毒症急性肾损伤患者尿AQP2、β2-MG的表达及与预后的关系

王锦栋，孙雪梅，王树威

（台州恩泽医疗中心（集团）恩泽医院，浙江 台州318050）

脓毒症是引发机体多器官功能障碍综合征的主要原因[1]。超过35%的脓毒症患者病情最终发展为脓毒症急性肾损伤（Acute kidney injury，AKI）。脓毒症AKI是急性功能障碍综合征，不及时诊治，临床死亡率最高可达70%[2]。尿β2-微球蛋白 （β2-microglobulin，β2-MG）是由淋巴细胞、白细胞及血小板等多种细胞产生的小分子球蛋白，最早在肾小管蛋白尿中被发现。正常情况下，外周血中99.99%的β2-MG在肾小管近端被肾小球滤过，但在肾功能异常时，肾小球滤过能力降低，尿中β2-MG水平升高[3]。 水通道蛋白 2（aquaporin，AQP2）是与水通透有关的细胞膜转运蛋白，主要分布于肾集合管上皮细胞膜[4]。AQP2是调节肾脏水通透性的关键蛋白，可用于评价肾小管功能损伤引起的肾病。但目前尚无β2-MG和AQP2在脓毒症AKI中临床意义的报道。本文探讨了β2-MG和AQP2与脓毒症AKI患者预后的关系，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2016年6月-2020年1月本院收治的脓毒症AKI患者54例，男36例，女18例，年龄 32-75 岁，平均（54.1±11.1）岁。 合并高血压45例，高血脂症42例，糖尿病37例。纳入标准：（1）年龄32-75岁；（2）所有患者符合严重脓毒症诊的断标准[5]；（3）符合 AKI诊断标准[6]，肾功能在 48小时内急速转变，即血肌酐升高≥26.5μmol/L或尿量＜0.5mL/（kg·h）并持续 6 小时及以上；（4）无凝血功能障碍。排除标准：（1）由脓毒症以外的其他因素导致急性肾损伤；（2）有糖皮质激素或免疫抑制剂长期服用史；（3）合并严重免疫缺陷性疾病或恶性肿瘤者；（4）孕妇及哺乳期妇女。研究经本院伦理委员会审批通过且患者知情同意。

1.2 方法 收集脓毒症AKI患者白细胞计数和CRP，采用慢性肾脏疾病流行病学研究公式（CKDEPI）计算肾小球滤过率（eGFR）。收集脓毒症死亡风险（MEDS）评分情况[7]，此指标可反应严重脓毒症患者28天转归情况。随访28天，将脓毒症AKI患者分为AKI死亡组17例和AKI存活组37例，分析影响脓毒症AKI患者预后的相关因素。

1.2.1 试剂与仪器 AQP2 ELISA试剂盒由南京赛泓瑞生物科技有限公司提供（货号：SEA580Hu03）；Elecsys E170化学发光仪由瑞士罗氏公司提供；酶标仪BIO-RAD 680型由美国伯乐公司提供。

1.2.2 操作方法 入院次日留取10mL中段晨尿1小时内3000r/min，离心10分钟，取上清液，冻存于-80℃待测；采集两组清晨空腹静脉血5mL，4℃，3000r/min，离心10分钟，取上清冻存于-80℃待测。采用ELISA法检测尿AQP2水平，操作步骤严格按照ELISA试剂盒；采用免疫分析法测定尿β2-MG水平。

1.3 统计学处理 采用SPSS 25.0软件进行数据分析，计量资料以（±s）表示，采用两组间行独立样本t检验；计数资料用百分率表示，采用χ2检验；采用COX法分析影响脓毒症AKI患者不良预后的因素；Pearson法进行相关性分析。

2 结果

2.1 单因素和多因素分析 经单因素分析，AKI存活组和AKI死亡组年龄、性别、合并高血压、糖尿病、高血脂症差异均无统计学意义（P＞0.05）；与AKI存活组相比，AKI死亡组MEDS评分较高（P＜0.01），eGFR 水平较低（P＜0.01），差异均有统计学意义，详见表1。经多因素COX分析，MEDS评分及高水平AQP2、β2-MG是影响脓毒症AKI患者不良预后的危险因素（HR=2.098、HR=2.323、HR=2.458，P＜0.05），详见表 2。

表1 两组影响预后的单因素分析

表2 影响脓毒症AKI患者预后的COX分析

2.2 相关性分析 脓毒症AKI患者AQP2、β2-MG水平与MEDS评分均呈正相关（r=0.649、r=0.662，均 P＜0.01），与 eGFR 均呈负相关 （r=-0.684、r=-0.676，均 P＜0.05）

3 讨论

AKI是脓毒症中最严重的并发症，主要表现为肾功能急剧下降[8]。有研究证实，大约50%的AKI由脓毒症引起，脓毒症增加了AKI发病率和死亡率，尤其在危重患者中[9]。因此，探讨预后的相关因素有重要的意义。

β2-MG是一种低分子量蛋白，以恒定的速率释放到外周血循环中，被肾小球自由过滤，在肾小管中被完全重新吸收，这些特性可能使β2-MG成为理想的肾小球滤过率判断的内源性生物标志物。目前，临床研究已将β2-MG作为一种有用的生物标记物用于预测急性肾损伤的不良预后[10]。有研究显示，在肾小管损害早期，肾小管重吸收率下降，尿β2-MG水平会显著上升[11]。王琳等[12]研究显示了子痫前期孕妇，因肾功能受损，肾小球过滤率明显低于健康孕妇，血清中β2-MG水平明显高于健康孕妇。本文中脓毒症AKI死亡组，尿β2-MG水平显著高于存活组，提示脓毒症AKI不良预后可能与尿β2-MG水平高有关。

AQPs是一类促进水通过肾小管质膜重吸收的水通道蛋白，AQP2主要表达于肾脏集合管主细胞，也是血管加压素（AVP）的主要靶点。AVP与2型加压素受体（V2R）结合，可调节AQP2活性、促进肾集合管中水的再吸收[13]。梗阻性肾病的发病机制与水通道有关，研究发现，水通道方面调节与线粒体功能有关[14]。王雪颖等[15]研究显示，高血压性肾病患者尿AQP2水平明显高于体检健康者。本研究显示，AKI死亡组尿AQP2水平显著高于存活组，提示尿AQP2是脓毒症AKI不良预后的因素。

MEDS评分对脓毒症预后的判断优于APACHEⅡ评分，对28天脓毒症患者死亡风险具有较好的评估作用[16]。多因素COX分析显示，高水平AQP2和β2-MG是影响脓毒症AKI患者不良预后的危险因素；本组脓毒症AKI患者AQP2、β2-MG水平与MEDS评分均呈正相关，与eGFR均呈负相关。

以上研究结果均提示，尿AQP2、β2-MG水平能对脓毒症AKI患者的预后有一定的提示作用。