SATB1蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理的关系

苗雨莉，杨维霞，付欣，石丛艳

1.通用环球西航医院病理科，陕西 西安 710021；

2.空军军医大学西京医院病理科，陕西 西安 710032；

3.西北工业大学医院病理科，陕西 西安 710072

胃癌具有较高的发病率和死亡率，在癌症导致的死亡中，胃癌居第二位，胃癌患者早期临床症状多不明显，且症状与胃炎等其他胃部疾病难以区别，多数确诊时癌症已进展至晚期[1]。在晚期胃癌患者，肿瘤从原发病灶发生侵袭和转移是造成患者死亡的主要原因[2]。因此，寻找可能预测胃癌侵袭、转移的指标对于监测病程进展及预后判断具有重要价值。作为一种组织特异性的核基质结合蛋白，AT 富集序列特异结合蛋白1(special AT-rich sequence-binding protein 1，SATB1)在多数肿瘤细胞中均有异常表达，能调控涉及肿瘤发生的1 000多种基因的表达[3-4]。本研究通过检测胃癌患者癌组织及癌旁组织中SATB1 的表达水平，探讨SATB1表达与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017 年1～7 月通用环球西航医院收治的62 例行手术治疗的胃癌患者为研究对象。入选标准：①术后经组织病理学明确诊断为胃癌；②术前无放疗和化疗史；③符合手术治疗的指征；④患者知情同意本研究。排除标准：①合并其他系统原发性肿瘤的患者；②合并严重心、肝、肾等重要脏器功能障碍者；③不能配合完成本研究者。62 例患者中，男性38 例，女性24 例；年龄39～78 岁，平均(61.22±11.17)岁；Ⅰ期7例，Ⅱ期16例，Ⅲ期24例，Ⅳ期15例。

1.2 研究方法 收集所有患者癌组织及癌旁组织(距癌组织5 cm以上)，称重后立刻置于-80℃液氮罐中冷冻保存。采用免疫组织化学法(IHC)检测SATB1蛋白的表达水平，收集患者性别、年龄、肿瘤部位、临床分期、淋巴结转移以及分化程度等临床资料，分析胃癌组织中SATB1表达与患者临床病理特征的关系；所有患者术后随访观察2年，术后随访以电话及门诊方式进行，记录患者随访期内生存情况，总生存率(overall survival，OS)计算终点为各种因素导致的死亡。根据随访结局将患者分为生存组和死亡组，分析SATB1在此两组间的表达差异，并进一步使用Kaplan-Meier 生存曲线分析SATB1表达与患者预后的关系。

1.3 SATB1检测方法

1.3.1 主要试剂 兔抗人SATB1 多克隆抗体(英国BeacomBio公司)，Envision法免疫组织化学试剂盒(丹麦DAKO公司)，DAB显色试剂盒(丹麦DAKO公司)。

1.3.2 免疫组化染色及判定标准 病变组织以石蜡包埋，4 μm 连续切片至过胶玻片上，56℃条件下烤片2 h，使用二甲苯连续脱蜡3次，梯度乙醇脱二甲苯，水洗。染色采用免疫组化Envision法，染色步骤严格按说明书要求进行。采用DAB显色，严格控制显色时间，常规脱水、封片。使用已知阳性切片作为阳性对照，磷酸盐缓冲液(PBS)替代SATB1一抗作为阴性对照。判定标准：SATB1为核转录因子，定位在细胞核中，以胞核出现棕黄色颗粒为阳性表达，采用二级计分法对SATB1表达情况进行判读，计算阳性细胞百分比并赋予分值，0～5%计为0分，5%～10%为1分，10%～50%为2分，50%以上计3分；观察染色强度并赋予分值，无色计0分，淡黄色计1分，黄色或深黄色计2分，黄褐色或棕褐色计3分。以上两项分值乘积＜3分为阴性(-)，≥3分为阳性(+)。

1.4 统计学方法 应用SPSS20.0 软件进行数据统计分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较使用独立样本t 检验；计数资料采用率表示，采取χ2检验；生存分析采用Kaplan-Meier法，并使用Log-rank法进行显著性检验。所有检验均采取双侧检验，检验水平α=0.05。

2 结果

2.1 SATB1 蛋白在胃癌组织和癌旁组织中的表达 SATB1蛋白在细胞核中呈阳性表达，显示为棕黄色颗粒，见图1，在胃癌患者癌组织中STAB1阳性表达率为54.84% (34/62)，在癌旁组织中STAB1 呈极弱阳性或阴性，阳性表达率为9.68%(6/62)，胃癌癌组织STAB1阳性表达率明显高于癌旁组织，差异有统计学意义(χ2=28.933，P＜0.01)。

2.2 胃癌组织中SATB1 蛋白表达与临床病理特征的关系 胃癌组织中SATB1阳性表达率与性别、年龄、分化程度和肿瘤部位不相关(均P＞0.05)，而与临床分期和淋巴结转移明显相关(均P＜0.05)；其中Ⅲ、Ⅳ期患者癌组织SATB1 阳性表达率为69.23%，明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者的30.43%，差异有统计学意义(P＜0.05)；有淋巴结转移的胃癌患者癌组织SATB1 阳性表达率为70.59% (24/34)，明显高于无淋巴结转移者的35.71%(10/28)，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 胃癌组织中SATB1蛋白表达与临床病理特征的关系(例)

2.3 胃癌组织中SATB1 蛋白表达与预后的关系 本研究2年随访观察期内，62例胃癌患者有11例(17.74%)因癌性死亡；根据随访结局将其分为生存组与死亡组，死亡组患者的SATB1 阳性率为81.82%(9/11)，明显高于生存组的49.02%(25/51)，差异有统计学意义(χ2=3.930，P＜0.05)。对胃癌患者生存资料进行Kaplan-Meier 生存分析，Log-rank 检验结果提示，SATB1阴性组整体生存情况优于SATB1阳性组，差异有统计学意义(Log-rank χ2=0.024，P＜0.05)，见图1。

图1 SATB1阳性和阴性胃癌患者Kaplan-Meier生存曲线分析

3 讨论

胃癌是是临床上具有高致死率的癌症类型，在我国，胃癌患者确诊并接受手术治疗后的5 年生存率仅为20%～30%[5]。从原发病灶发生侵袭和转移是胃癌致死的主要原因，因此寻找可能预测胃癌侵袭、转移的指标对于监测病程进展意义重大。SATB1 作为一种细胞特异性的核基质结合蛋白，由763 个氨基酸组成，参与组织特异性基因表达以及染色体重塑等，通过为特异性DNA序列和酶等提供停泊位点，SATB1还可以远距离调控基因表达过程[6]。报道显示，SATB1对与肿瘤发生相关的1 000多个基因具有调控作用[7-8]，促进肿瘤进展、转移，因而有“基因组组织者”之称。

在对原发性乳腺癌患者的研究中，研究者发现在恶性程度高的患者组织样本中，SATB1表达均呈阳性，同时研究还发现SATB1高表达者具有较差的预后[9]。在前列腺癌的相关研究中，研究者指出SATB1表达与骨转移和Gleason 评分呈明显正相关[10]。郭志成等[11]应用免疫组织化学技术检测了SATB1 在60 例膀胱癌患者癌组织和30例正常膀胱组织中的表达，结果显示两者差异有统计学意义。本研究中免疫组化染色结果显示，胃癌癌组织中STAB1阳性表达率显著高于癌旁正常组织，提示SATB1在胃癌癌组织中表达上调。胃癌具有恶性程度高，侵袭性强，易转移等特点，其发生、发展过程受众多基因调控，是一个复杂的多步骤、多阶段过程[12]。ZHANG 等[13]在一项纳入15 项研究，3 174例胃肠道癌患者的荟萃分析中指出SATB1过表达与临床分期晚、淋巴结转移以及远处转移密切相关，且SATB1过表达通常提示预后不良。本研究通过单因素分析发现，胃癌癌组织中SATB1阳性表达率与患者性别、年龄、分化程度以及肿瘤部位无关，而与临床分期和淋巴结转移具有明显相关性，其中SATB1阳性表达率在Ⅲ、Ⅳ期患者明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者(69.23% vs 30.43%)，有淋巴结转移的胃癌患者癌组织SATB1阳性表达率明显高于无淋巴结转移者(70.59%vs 35.71%)，提示胃癌癌组织中SATB1表达上调可能与胃癌侵袭、转移相关。事实上，在前列腺癌的相关研究中，研究者发现SATB1可能通过调节上皮-间质转化而促进前列腺癌转移[14-15]。本研究分析了所有入选患者的随访生存资料，发现SATB1 阳性表达组整体生存情况不及SATB1阴性表达组，预后相对更差，这一结果与袁春銮等[16]研究结论相似，其研究中SATB1阴性表达的胃癌患者预后优于SATB1阳性表达患者，中位生存期显著长于阳性表达患者(54.0 个月vs 24.0 个月)，进一步表明SATB1与胃癌患者预后有密切关系。

综上所述，SATB1 蛋白在在胃癌癌组织中表达上调，其高表达与胃癌临床分期晚、淋巴结转移、预后不良等密切相关，表明SATB1可能在胃癌浸润和转移中起重要作用，在预测胃癌恶性程度以及预后判断中具有重要意义。

本研究不足在于随访时间尚短，未能获得中位生存时间，此外，本研究为小样本研究，纳入病例数量有限，研究结果可能存在一定偏差，更全面、准确的结果尚需要进行大样本研究论证。