微波消解ICP-MS法测定黄芫花中五种有害元素

李宝霞，董双涛，沈丹丹，马 郑

(1.山西药科职业学院，山西 太原 030031；2.大连市药品检验所，辽宁 大连 116021)

黄芫花，别名绛州芫花、北芫花、黄闷头花、叩皮花、痒眼花，为瑞香科植物河朔荛花的干燥花蕾。我国的产地主要有山西、河南、河北，其中以山西省最为丰富。本品味辛、苦，性寒，泻下逐水。临床用途有急慢性肝炎，痰饮咳喘，水肿胀满，癫痫，人工引产等[1-2]。黄芫花是我国传统中药，最早可追溯于《神农本草经》[3-4]和《本草纲目》，《中国药典》1977年版一部[5]曾收载本品。二萜原酸酯类和黄酮类是本品的主要化学成分，其中黄酮类以木犀草素为苷元的葡萄糖苷为主[6]。黄芫花有小毒，服用后可能会有腹泻、胃痛等不适症状，有文献报道黄芫花的乙醇提取液具有一定毒性[1]。因此，黄芫花的毒性问题值得关注。黄芫花的毒性除来自有机化合物外，有害元素也应值得关注。近年来，随着土壤、空气等污染问题，使得中药材的有害元素问题格外突出[7]。因此，开展黄芫花的有害元素研究，对于揭示本品的质量和安性评价有积极意义。

电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定有害元素具有灵敏、快速、专属的特点[8-9]，国内学者报道了使用该法用于中药材中有害元素的检测[10-13]，但黄芫花中有害元素的检测分析尚未见报道。本文建立了微波消解ICP-MS法测定不同产地黄芫花的五种有害元素的方法，方法学验证表明本法符合中国药典的相关技术要求，测定结果可为黄芫花安全性评估提供有益借鉴。

1 材料与试药

MARS-5高压微波消解仪，美国CEM公司；NexIon300X型电感耦合等离子体质谱仪，美国PE公司； Sartorius LE244S型分析天平，德国赛多利斯公司；Milli-Q Academic 超纯水仪，美国Millpore公司。

单元素标准溶液：汞 (批号163019-2)，铅 (批号163063-1)，镉 (批号171037-2 )，砷(批号156014-2)，锗(批号157028)，铟(批号171005)，铜(批号171048-2)，铋(批号171007-2)均来源于国家有色金属及电子材料分析测试中心，浓度：1000μg/mL 。硝酸为优级纯，天津科密欧化学试剂有限公司。

编号1采自运城盐池柏口窑，生长环境为路边；2采自运城绛县，生长环境为田地；3采自霍州霍山，生长环境为山坡林下；4采自太原五龙沟，生长环境为山坡；5采自太原清徐县，生长环境为路边；6采自太原天龙山，生长环境为山坡林下；7采自安徽亳州，生长环境为山坡;8采自霍州陶唐峪，生长环境为山坡。

2 方法与结果

2.1 标准溶液的制备精密量取上述单元素溶液适量，加3%硝酸稀释成每1L含Pb、As、Cd、Cu 质量浓度为100μg/L的混合元素贮备液。精密量取混合元素贮备液适量，加3%硝酸稀释至刻度，制成含Pb、As、Cd、Cu质量浓度分别为0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、12.5、25.0、50.0、100.0μg/L标准系列工作溶液。

精密量取Hg单元素标准溶液适量，加3%硝酸稀释成10μg/mL的Hg元素贮备溶液。精密量取Hg元素贮备溶液加3%硝酸制成质量浓度分别为0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg/L标准系列工作溶液。该溶液临用新制。

2.2 内标溶液的制备以In为内标测定Cd元素，以Ge为内标测定Cu、As元素，以Bi为内标测定Hg、Pb元素。精密量取锗、铟、铋元素溶液适量，用3%硝酸稀释制成含Ge、In、Bi 10μg/L的溶液。

2.3 ICP-Ms测定条件功率1500W，冷却气体流量15L/min; 雾化体积流量1.0mL/min，采用碰撞反应池模式；蠕动泵转速40r/min。测定方式：跳峰模式；扫描次数20次；重复三次。

2.4 供试品溶液的制备精密称取0.5g样品粉末(过50目筛)，置高压微波消解罐内，精密加入6mL硝酸，静置过夜。次日按程序微波消解：首先5min由室温升至120℃，120℃维持2min消解；然后5min内升温至120℃，维持5min；再5min内升温至180℃，维持15min，消解功率为800W。消解完毕后，冷至室温，缓慢释放压力，置90℃电热板上加热赶酸至硝酸剩余约1mL，用消解液完全转移至50mL量瓶中，再用水洗涤消解罐3次，合并洗涤液，加水稀释至刻度，作为供试品溶液。

2.5 空白溶液的制备除不加样品外，照2.4项下供试品的制备方法，同法制备。

2.6 方法学考察

2.6.1 线性关系考察 照“2.3”项下的测定条件，以峰强度为纵坐标，以质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，得各元素的回归方程，相关系数和线性范围。结果见表1。

表1 各元素的线性关系、检测限及精密度

2.6.2 检测限 连续测定空白溶液11次，测定元素的信号响应值，以测定元素信号值的3倍标准偏差(δ)所对应的质量浓度为检出限，结果见表1。结果显示，各元素的检出限均能满足分析要求。

2.6.3 精密度试验 取“2.1”项下的混合标准溶液、Hg单元素标准溶液，连续进样六次，测定各元素的含量，RSD值在0.55%～2.60%之间，表明仪器的精密度良好。

2.6.4 重复性试验 精密称取0.5g样品(1)号粉末，照“2.4”项下的方法同法平行制备6份，各元素的RSD值在1.10%～4.20%，结果表明方法的重复性良好。

2.6.5 稳定性试验 精密称取0.5g样品(1)号粉末，照“2.4”项下的方法制备供试品溶液，室温放置0、4、6、8、16、24 h后进样分析，各元素的RSD在3.54%～4.85%，结果表明样品放置24 h内稳定。

2.6.6 加样回收率试验 精密称取样品(1)号粉末0.5g，分别精密加入各元素标准溶液，依法测定，计算平均回收率在95.24%～101.16%之间，RSD均小于5.0%(n=6), 结果见表2。

表2 稳定性及回收率试验结果(n=6)

2.7 样品测定取“1”项下的样品，照“2.4”项下的制备方法，依法测定，结果见表3。由表中可知，安徽亳州的药材质量较好，有害元素的含量相对较低。太原周边地区(如4、5、6号)有害元素含量相对较高。

表3 不同产地黄芫花中有害元素检测结果

3 讨论

微波消解法具有操作简便、效率高，灵敏专属等优点，目前是元素分析的首选方法。在该消解条件下，样品溶液清澈透明，满足分析测定要求。

有害元素是中药安全性评价的重要内容。近年来，我国药品监管正向从严方向发展。越来越多的中药材已经将毒性元素的检测纳入质量标准当中。如中国药典2015年版已经对甘草等中药材的有害元素限度进行了规定。因此，开展中药材中毒性元素的质量控制是大势所趋。本文建立了微波消解ICP-MS法测定不同产地黄芫花中的五种有害元素的方法，结果显示五种有害元素均未超过限度，符合中国药典的规定。方法学验证表明本法灵敏、准确、专属，适用于黄芫花中的五种有害元素的测定。本研究可为黄芫花的安全性评估提供有益借鉴。