超高效液相色谱法测定生远志及其炮制品中远志皂苷B的含量

郭 健

（白城医学高等专科学校，吉林 白城 137000）

在临床上远志药品具有消肿安神的功效，成分主要是皂苷类、黄酮类等，其中远志的皂苷包括多种原型皂苷，例如：远志皂苷A、远志皂苷B等。近代研究指出，皂苷成分是远志发挥镇静安神等作用的主要原因，进过实验室的不懈研究发现远志药材中远志皂苷B能发挥出镇静催眠的作用。目前在对远志皂苷成分的测定时，主要是依靠远志皂苷的水解产物细叶远志皂苷作为检测指标，但使用这种方法并不能精确的测定出远志药材中远志皂苷B的准确含量，所以本次试验使用超高效液相色谱法测定生远志及其炮制品中远志皂苷B的含量，并对多种远志药材的炮制品进行实验，完善远志药品和其炮制品的质量指标。

1 资料与方法

1.1 资料数据：本次试验使用Agilent1100型超高效液相色谱仪对远志药品中远志皂苷B的含量进行测定；使用梅特勒多利多公司所生产的电子天平和赛多利斯公司所生产的电子天平进行称量；使用上海利导超声仪公司生产的SK250SP超声仪进行测定。本次试验选用成都普斯生物科技公司所提供的98%纯度的远志皂苷B作为对照品进行实验，使用不同产地所生产的远志进行实验。

1.2 方法：使用市面上常规炮制远志的方法进行远志的炮制。①炒远志：将远志在热锅中使用中火进行翻炒，将远志的表面炒成金黄色后取出。②蜂蜜灸远志：取少许炼蜜，加入一定量的开水进行稀释，然后将其浇在远志上，使用文火炒远志，使远志把炼蜜吸收，炒至远志不粘手且颜色深黄有斑即可，比例为10 kg远志2 kg炼蜜。③酒灸远志：将远志洗净，把酒和远志同时放入锅内进行炖煮，就被远志吸收后就可以将远志取出放置在阴凉干燥的地方风干，比例为10 kg远志3 kg酒。④甘草汁炒远志：洗净甘草、远志，同时置于锅内加水煮汤，使用文火煮汤，直至远志将锅内汤汁全部吸收为止，停火后将远志取出放置在阴凉干燥的地方风干，比例为10 kg远志6 kg甘草汁[1]。

1.2.1 溶液制备：首先制备对照的储备溶液，将98%含量的远志皂苷B进行测量称定，加入70%的甲醇进行制备；然后制备实验用的远志溶液，使用60目的筛网筛取1 g远志，将其放置在锥形瓶中加入50%的甲醇进行重量测定，使用超声波进行处理后进行称定，使用甲醇溶液补齐缺失的部分，使用微孔滤膜进行过滤皆可以得到。

1.2.2 进行溶液的重复性测试：选择一个产地的远志粉末进行分析研究，首先进行精密选取6份每份1 g的远志粉末，使用“1.2”的项下方法进行制备，制成试验品溶液后进行测定，对远志皂苷的色谱峰值进行计算，如果实验结果为2.26%就证明超高效液相色谱法测定的重复性良好。

1.2.3 进行稳定性测试，使用仪器对实验溶液进行取样，在第0、2、4、6、8、10、12 h分别进行测定，如果测定结果中远志皂苷的B峰面积的RSD都为1.64%证明试验品中的远志皂苷B溶液在12 h之内是稳定的[2]。

1.3 评价指标：根据对照的远志及远志炮制品的含量进行测定，实验超高效液相色谱法测定生远志及其炮制品中远志皂苷B的含量的相关方法。

1.4 统计学方法：使用SPSS20.0的统计学方法对数据进行分析研究，进行t或卡方检验，P＜0.05，有统计学意义。

2 结果

对实验组远志样品含量进行测定：将购买的远志样品和远志的炮制品进行精密取样，取样1 g左右，使用“1.2.1”项下方法制备溶液，在“1.2”色谱条件下进行测定。计算所有样品中远志皂苷B的含量，见表1。

在远志的炮制品中蜂蜜灸远志中远志皂苷B的含量较少，别的远志种类的差别不大。蜂蜜灸远志是现代临床中常用的远志药物之一，蜂蜜灸远志对患者的肠胃功能影响较小，其毒性也较小，这可能与蜂蜜灸远志的远志皂苷B含量较少的因素有关，通过本次实验可得超高效液相色谱法可以测定生远志及其炮制品中远志皂苷B的含量。

表1 购买的生远志以及炮制远志的远志皂苷B的含量

3 讨论

在临床中远志一般起着安神益智的作用，但远志存在着明显的消化道毒性，会给患者的肠道系统造成破坏。通过本次试验证明，远志皂苷B既能起到安神益智、镇咳祛痰的作用也会给患者的消化系统造成一定的破坏，所以对远志药物中远志皂苷B的含量进行控制是很有必要的[3]。本次试验选择了4种来自不同地区的远志，测定其远志皂苷B的含量，通过使用超高效液相色谱法进行测定可得远志中远志皂苷含量在1.56%～2.12%，河北产的远志皂苷B的含量最多。剩余产地的远志中远志皂苷含量的差异不大。通过本次试验，发现在蜂蜜灸远志的远志皂苷B的含量最少，这与蜂蜜灸远志的毒性较小有很大的相关性，别的炮制方法对远志中远志皂苷B含量的影响不大，但对远志皂苷中别的成分还需要继续研究，而经过试验可以看出超高效液相色谱法可以有效测定生远志及其炮制品中远志皂苷B的含量[4-5]。