两台全自动血细胞分析仪新鲜血白细胞分类检测结果直接比对的可行性分析

欧阳贵平，谢香萍，陈有华

（江西省赣州市南康区第一人民医院检验科，江西 赣州 341400）

依据《医疗机构临床实验室管理办法》要求实验室内采用不同方法或仪器检验的同一项目，应进行一致性比较，定期实施比对（至少每年一次）[1]。我科尝试采用两台血细胞分析仪白细胞分类检测结果进行直接比对及两台仪器白细胞分类结果分别与人工镜检分类结果比对,对两种方法的比对结果进行比较,分析采用两台血细胞分析仪白细胞分类检测结果进行直接比对的可行性,并对两台仪器的白细胞分类结果数据的一致性进行分析，报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 日本Sysmex公司生产的Sysmex XN-10全自动血细胞分析仪和迈瑞公司生产的BC-5390全自动血细胞分析仪,两台仪器均使用原装配套试剂、校准品和质控品；Sysmex XN-10全自动血细胞分析仪采用血涂片人工分类计数验证白细胞分类计数结果的准确性,作为比对试验的参比仪器；CH31奥林巴斯显微镜、BASO瑞氏－姬姆萨染色液。

1.2 实验条件 两台仪器按各自厂家要求做好维护、保养,开机后空白测试,均在校准有效期内,测试结果符合厂家要求，确认仪器正常工作状态，使用单项中值室内质控品在控的条件下进行检测工作。

1.3 方法

1.3.1 仪器5种白细胞分类重复性（CV%）测定 将2份无脂浊、无黄疸、无溶血、两台仪器检测没有触及我科人工复检规则的新鲜EDTA-K2抗凝血(两份血白细胞分类检测结果相近)分别在两台仪器重复检测11次，记录2至11次结果，用于观察仪器白细胞分类检测结果的精密度。

1.3.2 比对试验 选取无脂浊、无黄疸、无溶血、没有触及本科室人工分类规则的本院门诊、住院、体检新鲜血液分析标本30份(包含中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞分类百分比高、中、低值)在参比仪器Sysmex XN-10全自动血细胞分析仪全自动进样模式重复3次检测,在比对仪器BC-5390全自动血细胞分析仪上重复3次检测，检测试验在2h内完成，记录各参数检测结果。将上述30份标本每份制作3张末梢血涂片，瑞氏－姬姆萨染色后由有经验工作人员人工镜检白细胞分类计数,取3张涂片白细胞分类计数均值为靶值。

1.3.3 数据处理 采用Excel 2016软件和SPSS 16.0进行数据处理，30份血标本3次白细胞人工分类结果平均值作为参比仪器的准确度验证值和两台仪器比对的靶值、3次Sysmex XN-10全自动血细胞分析仪分类结果平均值作为参比仪器验证测定值及两台仪器直接比对的靶值、3次BC-5390全自动血细胞分析仪分类结果平均值作为比对测定值。各分类结果依据靶值计算偏差（偏差＝测定值－靶值），计量资料用（x±s）表示，组间比较采用方差分析（ANOVA）、P＜0.05差异有统计学意义，检验结果的一致性采用线性回归分析和回归系数t检验，P＜0.05认为两种结果存在线性回归关系。

1.3.4 判断标准 批内精密度采用国内学者蒋叙川[2]报告的白细胞分类批内精密度判断标准见表1；以《全国临床检验操作规程》第四版，对不同检测项目的分析质量要求,确认参与比对的各检测系统的不精密度均符合要求的前提下,可依据医疗机构医师的临床经验提出的建议指标确定不同检测项目的分析质量要求[1]，我科与本院临床医师共同探讨,决定采用WS／T246-2005白细胞人类计数参考方法Rumke表95%可信区间[3]，作为本实验室白细胞分类比对的判断标准,中性粒细胞（N）、淋巴细胞（L）符合率≥90%，单核细胞（M）、嗜酸性粒细胞（E）符合率≥80%，嗜碱性粒细胞（B）符合率≥70%作为本实验室比对的合格标准。

2 结果

2.1 两台仪器白细胞分类结果批内精密度CV%符合要求，见表1。

2.2 两台仪器白细胞分类结果直接比对及两台仪器分类结果与人工分类结果比对 五类白细胞在白细胞分类表对应的观测值Rumke表的95%置信区间的符合率均达到本实验室质量目标要求,30份新鲜血白细胞人工分类结果与两台仪器检测结果符合率,符合率=符合例数/比对例数×100%,见表2。

2.3 30例样本白细胞人工分类结果与两台全自动血细胞分析仪白细胞分类计数 三组结果方差分析差异无统计学意义（P＞0.05），见表 3。

2.4 两台仪器分类结果的一致性分析 两种仪器检测结果直线回归及一致性分析 两台仪器检测结果直接比对中性粒细胞（N）、淋巴细胞（L）、单核细胞（M）三种细胞分类结果相关系数（r）均大于0.99，除嗜碱性粒细胞（B）外，认为两种仪器的检测结果存在相关关系（P值均<0.05）；两台仪器与人工分类结果比对只有中性粒细胞 （N）、淋巴细胞（L）两类细胞r＞0.96，两种比对方法嗜碱性粒细胞（B）分类结果相关系数（r）值很小，三组检测结果无相关关系（P<0.05）。 见表 4。

表1 两台血细胞分析仪各项参数的CV%

表2 30例样本人工分类与两台血细胞分析仪白细胞分类计数结果比对符合率（%）

表3 30例样本人工分类与两台全自动血细胞分析义白细胞分类计数结果（%，x±s）

3 讨论

本实验采用新鲜抗凝血评价两台仪器的批内精密度，XN-10血细胞分析仪五种白细胞分类的CV值均小于BC-5390血细胞分析仪，说明XN-10血细胞分析仪五种白细胞分类精密度较BC-5390高，两台仪器嗜碱性粒细胞（B）CV值均大于其它四种白细胞，这与嗜碱性粒细胞（B）外周血数量少且分布不均匀有关[2]。目前，国内各级临床检验中心对白细胞分类结果的没有建立室间质量评价系统,对于白细胞分类结果的比对大部分学者采用的是血液分析仪白细胞分类结果与作为金标准的传统人工镜检分类结果比对[4-8]，也有部分学者采用血液分析仪白细胞分类结果与各种白细胞直接计数结果比对[9]，传统的白细胞人工镜检分类和白细胞分类直接计数要经过大量手工操作，如：手工推片、固定染色、人工稀释、充池、镜检等步骤，其操作复杂耗时长，工作效率低，常因人为因素造成误差[10]。本实验采用白细胞人工分类结果验证的血细胞分析仪作为参比仪器,进行实验室内不同仪器间白细胞检测结果直接比对和一致性分析,因为血细胞分析仪只能起到筛查作用,对异常细胞的检测能力存在缺陷,触及复检规则的标本,要人工复检[11,12]。故本次试验样本只选择没有触及复检规则的标本,比对结果与两台仪器白细胞分类结果直接与人工分类结果比对基本一致，仪器间结果比对符合率、一致性均高于仪器结果与人工分类结果直接比对，这与仪器检测细胞数多，分类计数原理比较接近,手工分类细胞计数少、精密度较低有关。此次比对试验因为嗜碱性粒细胞（B）数量少，符合率较低，统计显示三组结果之间均无线性相关，有文献报道嗜碱性粒细胞 （B）＜5%不适用仪器与人工分类的比对试验[13]。

综上,两台全自动血细胞分析仪白细胞分类的测定结果直接比对能达到了解两台仪器间检测结果一致性的要求，有提高比对效率、减轻检验人员工作量的优点,比对结果与仪器结果与人工分类直接比对基本一致,可以用较少的标本验证参比仪器的准确度，加大两台仪器的直接比对样本，可以节省工作量,比对结果能反映两台仪器测定结果的可比性，比对结果可靠。随着各个品牌的全自动血细胞分析仪白细胞分类室内质控品[14]以及室内质控数据室间比对的应用[15]，白细胞分类结果仪器间直接比对值得进一步研究。

表4 人工分类与两台仪器检测白细胞分类结果数据回归分析