三种不同仪器检测超敏C反应蛋白结果的一致性分析

何广营 林晓玲 李冯坚

超敏C反应蛋白（hs-CRP）是一种常见的急性时相反应蛋白（acute phase proteins，APR），因其能与肺炎链球菌的荚膜C多糖发生沉淀反应而得名，在组织损伤、炎症或感染时，由肝受细胞素产生物刺激产生，临床上主要作为一种非特异性炎症指标。hs-CRP不仅用于一般感染性疾病的监测，还用于心肌梗死、急性胰腺炎、多发创伤、肿瘤、类风湿关节炎等多种疾病引起的全身炎症综合征的评估[1]。因此，及早、反复监测hs-CRP对疾病的诊断、疗效判断及监测具有重要意义。随着疾病越来越复杂化、种类多化且来势凶猛，为了及时、准确地提供hs-CRP结果，目前很多实验室购置了多台检测hs-CRP仪器。根据ISO15189的规定，同一实验室中不同仪器检测相同项目时，需要对检测结果的一致性进行评估，确保结果的一致性。本研究对3种不同仪器检验hs-CRP结果的一致性进行了比较分析，现将报告报道如下。

材料与方法

1 标本来源 选取2018年3～7月来深圳龙华区人民医院门诊就诊的感染发烧患者156例，年龄12～57岁，平均28±21.03岁，其中男89例，女67例。所有研究对象均知情并签定知情同意书，且经同医院伦理委员会同意批准。

2 仪器与试剂强生VITROS5600全自动干片生化免疫分析仪、hs-CRP试剂盒及校准品由美国强生公司提供；贝克曼AU5800全自动生化分析仪、hs-CRP试剂盒及校准品由美国Bankman公司提供；BC-5390全自动血球仪-超敏C反应蛋白一体机、hs-CRP试剂盒及校准品均由深圳迈瑞公司提供。

3 方法

3.1 标本采集：所有研究对象均采集静脉血2管，一管2 mL加入EDTA-K2抗凝管内，充分混匀；另一管3～5 mL于一次性无抗凝剂的干燥管内，及时送检。

3.2 标本处理：无抗凝剂静脉血室内静置30 min后于3 500 r/min离心机离心5 min，分离血清及时进行检测，不能及时检测的标本置于2℃～8℃冰箱内保存并尽快检测；全血标本充分混匀后及时进行检测，2 h内必须完成检测。

3.3 hs-CRP检测：检测前对VITROS5600、AU5800及5390分析仪进行保养、定标及校正，然后进行各仪器配套的室内质控物进行检测，待结果在控后再进行研究标本检测，确保检测结果的准确性。VITROS5600和AU5800生化分析仪器检测患者血清中hs-CRP浓度，BC-5390血球-超敏C反应蛋白一体机检测全血中hs-CRP浓度，所有操作均严格按仪器、试剂盒说明书及科室SOP文件进行。

4 统计学处理 采用GraphPad Prism 5及EXCEL对所有数据进行统计分析及作图，计量资料采用平均值±标准差（ ±s）表示，组间比较采用t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 三种不同仪器检测hs-CRP浓度比较 156例患者血清中hs-CRP浓度参考仪器检测结果为93.64±79.74 mg/L，迈瑞BC-5390全自动血球-超敏C反应蛋白一体机检测的结果为87.98±76.57 mg/L，两者差异无统计学意义（t=0.912 4，P＞0.05），而VITROS5600干片生化免疫分析仪检测的结果为182.38±158.79 mg/L，明显高于参考仪器，差异有统计学意义（t=6.805 6，P＜0.05）。

2 三种不同仪器检测hs-CRP浓度相关性 3种仪器检测hs-CRP浓度之间均呈正向相关性，5390血球-超敏C反应蛋白一体机与AU5800生化分析仪检测hs-CRP结果之间相关系数（r2）为0.968 536；VITROS5600干片生化免疫分析仪与AU5800之间相关系数（r2）为0.952 974，结果见图1、2。

图1 BC5390和AU5800检测hs-CRP结果相关性

图2 VITROS5600和AU5800检测hs-CRP结果相关性

讨 论

C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）是由白细胞介素-6（IL-6）诱导肝脏合成的急性时相反应蛋白[2]，各种急性和慢性感染、组织损伤、恶性肿瘤、手术创伤等均可导致CRP水平迅速升高，4～6 h开始升高，36～50 h达到峰值，病变好转时又迅速降至正常[3]，且不受年龄、血型、体温、贫血、妊娠等因素的影响，是可靠和灵敏的炎性反应急性期反应指标[4，5]，且术后CRP检测有助于感染、深静脉血栓及弥散性血管内凝血（DIC）等并发症的监测[6，7]。hs-CRP 超敏C反应蛋白是临床实验室采用超敏感检测技术，能准确检测低浓度C反应蛋白，提高了试验的灵敏度和准确度，是诊断低水平炎症状态的灵敏指标[8，9]，血清hs-CRP水平与动脉粥样硬化及急性脑梗死（ACI） 的发生、严重程度及预后密切相关[10，11]。因此，及时、快速为临床提供准确的hs-CRP结果，对临床疾病的诊断、疗效的判断及并发症的发生监控具有十分重要的意义。

目前，实验室检测CRP的方法很多，如酶联免疫分析、放射免疫分析、免疫比浊法（速率散射比浊法和免疫透射比浊法）、免疫层析法及免疫速率法[12-14]，检测仪器从单机到多用机，仪器和试剂盒的检测灵敏度也越来越高，速度也越来越快，为临床快速地提供了准确的hs-CRP结果。但不同仪器、试剂及方法学原理不同及检测系统的差异，相同项目经不同仪器实际检测的结果存在明显差异[15-20]，给治疗带来一定困难。本研究结果显示，贝克曼AU5800全自动生化分析仪检测的hs-CRP结果稍高于迈瑞BC-5390全自动血球-超敏C反应蛋白一体机，但差异无统计学意义（P＞0.05），两者结果具有良好的一致性，这可能与这两种不同仪器检测hs-CRP都采用免疫比浊法有关，两者之间的细微差异可能与这两种不同仪器的性能上存在一定差异有关。而强生VITROS5600干片生化免疫分析仪检测hs-CRP结果明显高于AU5800和BC-5390分析仪，差异有统计学意义（P＜0.05），这可能与VITROS5600分析仪采用免疫速率法检测hs-CRP，检测方法学原理不同于另外2种仪器等有关。但3种不同仪器所检测hs-CRP结果之间具有良好的正相关（r=0.953 0～0.968 5），这也说明了不同方法学所导致检验结果不一致性，属于系统性误差，可以通过调节相关系数来加以校正，达到不同仪器检测相同项目结果的一致性。

综上所述，不同仪器、试剂及方法学检测相同项目时会影响结果的一致性，但结果之间相关性很好，可通过调节系数达到结果的一致性。确保实验室检测结果一致性最理想的方法是同一实验室最好采购相同的仪器和试剂，否则要对不同仪器、试剂及方法学对检测结果一致性的影响进行评估，并加以校正。