沿海地区人群高尿酸血症患病率及其与SLC2A9基因rs2241480位点多态性的关系

魏晓珠 苏维 陈望 刘爱玲

随着我国经济社会的发展，人民生活水平不断提高，高嘌呤和高蛋白饮食摄入量不断增加，特别是居住在沿海地区的人群，常年食入大量海鲜，导致人群血尿酸含量呈不断上升趋势。当体内血尿酸含量过高时会引起高尿酸血症（hyperuricemia，HUA），长时间高尿酸血症会诱发人体急性或慢性痛风，已成为威胁人类健康的重要疾病之一，且其发病率在全球均呈现逐年上升的趋势[1]，应引起人们的广泛重视。同时，据有关研究结果表明，人体中尿酸相关基因位点的多态性与HUA发病率具有密切相关性[2，3]，且不同地区、不同人群尿酸相关基因位点的多态性分布特征又存在一定的差异性。为此，本文对深圳沿海地区人群HUA患病率现状及其与SLC2A9基因rs2241480位点多态性之间的相关性进行调查分析，现报道如下。

材料与方法

1 研究对象 随机选取2018年3～7月居住在沿海地区的人群2 753例，年龄13～67岁，平均（37±14.62）岁，男1 593例，女1 160例。按不同年龄分为13～21岁372例（男209例，女163例）、22～30岁451例（男254例，女197例）、31～40岁503例（男297例，女206例）、41～50岁676例（男370例，女306例）、51～60岁425例（男245例，女180例）及＞60岁326例（男218例，女108例）等6组。排除标准：白血病、甲低及尿崩症等可导致血尿酸含量继发性升高的患者；近期服用影响尿酸含量的药物（如呋塞米、吡嗪酰胺类和乙胺丁醇等）的患者；肝、肾功能不全、血液疾病、甲亢和各种癌肿放疗或化疗后的患者。同时选取同地区UA含量正常的健康体检人群120例为非HUA组，年龄14～70岁，平均（38±15.71）岁，确保两组的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。所有研究对象均告知并签定知情同意书，本研究经同医院伦理委员会批准同意。

2 仪器与试剂 AU5800全自动生化分析仪、校正品、室内质控物及UA试剂由美国Bankman公司提供；Complete iPLEX Gold Genotyping Reagent Set、ABI7500 PCR、GeneScanTM 120均由美国ABI公司提供；DNA提取试剂盒由北京百泰克公司提供；质谱点样仪MassARRAY NanodisPenser SEQUENOM由美国Sequenom公司；质谱分析仪MassARRAY Compact System SEQUENOM由美国Sequenom公司提供。

3 方法

3.1 标本采集：所有研究对象均于清晨空腹用一次真空采血针管采集静脉血6～8 mL，其中4 mL注入EDTA-k2抗凝管内混匀，平分于2支EP管内，并置于-80℃冰箱内保存备用，另外取2～4 mL注入无抗凝剂的干燥管内，室内静置30 min后于3 500 r/min离心机内离心3～5 min，分离血清检测尿酸。

3.2 血尿酸检测：检测前对AU5800全自动生化分析进行保养、校正及室内质室，待室内结果在控后再行标本检测，所有操作均严格按照仪器、试剂盒说明书及科室SOP文件进行。 HUA诊断标准：我国根据血尿酸的调查结果制定高尿酸血症的诊断标准[4]：男性血尿酸浓度≥417 μmol／L（7.0 mg/mL），女性血尿酸＞357 μmol/L（6.0 mg/mL）判断为HUA。

3.3 DNA提取：严格按照尿酸基因DNA提取试剂盒说明书进行核酸提取操作，将提取到的核酸加到1.5 mL离心管内，于-80℃保存备用。

3.4 引物设计与合成：使用Sequenom MassARRAY As say Design 3.0 Software对SLC2A9基因rs2241480位点进行引物设计，F：5'-ACGTTGGATGCCACTACCTTCTCCCATCAC-3'，R：5'CGTTGGATGAATGAGGGGCTATAAGTCGG-3'，并由广州达安生物技术服务有限公司进行引物合成。

3.5 基因多态性分析：采用Sequenom MassARRAY iPLEX GOLD技术，对HUA组及非HUA组的SLC2A9基因rs2241480位点基因多态性进行检测。

4 统计学处理 应用GraphPad Prism 5软件，计数资料采用率（%）表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 HUA发病率 深圳沿海地区2 753例人群中检出425例HUA，患病率为15.44%，其中男性18.27%（291/1 593），女性11.55%（134/1 160），男性高于女性，差异有统计学意义（χ2=3.78，P＜0.05）。

2 不同年龄和性别人群HUA发病率 深圳沿海地区2 753例人群中＞60岁组的HUA患病率最高，为30.67%（100/326），其次为51～60岁组和41～50岁组，分别为21.18%（90/425）和15.09%（102/676），各年龄组之间差异均有统计学意义（χ2=2.17～3.42，P＜0.05）。60岁及以下各组男性HUA患病率均高于女性，差异有统计学意义（χ2=2.76～3.91，P＜0.05），但＞60岁组女性HUA患病率高于男性，差异有统计学意义（χ2=2.04，P＜0.05），结果见表1。

3 SLC2A9基因rs2241480位点多态性与HUA相关性 425例HUA患者中SLC2A9基因rs2241480位点CC、CT及TT基因型的检出率分别为44.71%（190/425）、30.82%（131/425）及24.47%（104/425），120例非HUA人群分别为18.33%（22/120）、37.50%（45/120）及44.17%（53/120），HUA人群中CC基因型检出率高于非HUA人群，差异有统计学意义（χ2=5.16，P＜0.05）。HUA人群C等位基因频率为60.12%（511/850），明显高于非HUA组的37.08%（89/240），差异有统计学意义（χ2=3.60，P＜0.05）。

表1 不同年龄和性别人群HUA发病率[%（n）]

讨 论

尿酸（Uric Acid，UA）为嘌呤代谢终末产物，在血液中以尿酸盐的形式存在，其含量的稳定主要依赖于尿酸的生成、排泄及重吸收过程之间的平衡，一旦UA形成和排泄中的任一过程发生失调或/紊乱，就会导致其生成增多或排出减少，引发HUA[5]。HUA是以血尿酸含量异常升高而引起的一种无明显症状又易被患者所忽略的疾病，长期保持高浓度血尿酸状态，会诱发人体的急性或慢性痛风，是痛风发病最重要的危险因素。另外，有文献研究表明，血尿酸含量升高还可增加高血压、心血管疾病、肾结石、慢性肾功能不全及代谢综合征的发病风险，加速这些疾病的进展。随着经济社会发展和人口老龄化进程，HUA已成为全球人类“第四高”疾病，其患病率在全球呈逐步上升趋势，应引起全球人类的关注和重视[6-8]。

国内外流行病学调查结果显示，我国HUA发病率呈逐步上升趋势，且HUA发病率在不同地域、种族存在一定的差异性[9，10]，如我国大陆平均HUA患病率的13.3%[11]、美国为21.0%[12]、孙红娟等[13]报道海南地区的22.6%、邓子妮等[14]报道海口市的22.53%、史平等[15]报道北京的11.06%、刘晓琳等[16]报道上海的15.54%、吴伟戎等[17]报导广州的20.73%、邹贵勉等[18]报道广西的23.5%及邵小飞等[19]报道珠海的32.41%。本研究结果显示，深圳沿海地区人群HUA患病率为15.44%，处于国内平均水平稍上，除了可能与不同地区人群的生活习惯、周围环境及食品种类等诸多因素不同有关外，还可能与人群遗传背景不同有关。

据有关文献报道，不同性别HUA患病率也存在很大的差异性[20]，如申洋等[21]报道西部某大型国企男性的高尿酸血症患病率为21.5%，女性为4.0%，孙红娟等[13]报道海南地区男性为29.5%，女性为9.2%，而本研究结果显示，深圳沿海地区男性HUA患病率为18.27%，明显高于女性的11.55%，且除了60岁以上老年人群以外，以男性高于女性，其中60岁及以下男性HUA患病率明显高于女性，差异有统计学意义（P＜0.05），这可能与男女间生理性差异有关，其中雄性激素有抑制体内尿酸排泄作用，而雌激素可使细胞器的磷脂酶对尿酸盐结晶有易感染性而引起细胞反应，抵抗结晶沉淀，从而促进尿酸的排泄[23]。此外，脂联素水平与血尿酸含量呈负相关性，女性血清中脂联素含量高于男性，而60岁以上老年人群男性HUA患病率低于女性，这可能与女性进入围绝经期雌激素水平开始下降、促进尿酸排泄的保护作用逐渐减弱等有关[24]。

有研究表明，近年来HUA发病率呈现低龄化趋势，且不同地区低龄人群HUA发病率也存在很大差异性，如雍雪莲等[23]报道湖北大学生15.43%、郭丹丹等[25]报道北京中小学生的7.3%，而本研究13～21岁组HUA患病率只有5.91%，处于国内较低水平，这可能与不同地区人群的生活水平、高嘌呤和高蛋白摄入及运动量等因素存在很大差别有关。但充分说明了不同地区HUA患病率逐步呈现低龄化趋势，应引起社会和家庭高度重视。

高尿酸血症是一种复杂性疾病，除了与周围环境因素有关外，多种基因和多个位点都参与高尿酸血症的发病，且在HUA发病中发挥重要作用。有研究结果表明，影响尿酸的遗传因素占HUA发病率的40%～70%[26]。其中SLC2A9基因为尿酸盐转运子基因之一，其基因编码葡萄糖载体GLUT9蛋白具有GLUT9L和GLUT9S 2种异构体，这2种异构体均有生理性转运尿酸盐的作用[10]。有研究表明，SLC2A9基因有使尿酸水平增高和诱发痛风的作用，是目前影响力最大的易感基因位点，且存在种族特异性[1，2]。本研究结果显示，深圳沿海地区人群HUA人群中SLC2A9基因rs2241480位点CC基因型检出率及C等位基因频率均明显高于非HUA组，差异有统计学意义（P＜0.05），与国内外有关文献报道的一致，这说明了SLC2A9基因rs2241480位点CC基因型和C等位基因可能是导致本区人群HUA的致病基因。

综上所述，深圳沿海地区人群有一定的HUA患病率，并呈现低龄化发病趋势。不同地区、人群、性别及遗传背景的人群中HUA患病率存在一定的差异性，且高尿酸相关基因位点呈多态性分布。因此，加强不同区域人群血中UA浓度筛查及HUA基因位点多态性分析，对早发现、早诊断及早预防HUA发病具有重要意义，同时基因多态性分析为靶向治疗、预防药物的研发提供科学依据。