重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗（H5 N1Re-11株、Re-12株+H7N9Re-2）对黄羽肉鸡免疫效果抗体监测试验

赵东旭，孟福强，李叔伟，姜 宇

（哈药集团生物疫苗有限公司，哈尔滨 150000）

1 材料与方法

1.1 供试材料

哈药集团生物疫苗有限公司重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗（H5 N1Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2）。

抗体监测试剂：禽流感H5N1 Re-11株和Re-12以及H7N9 Re-2株抗原及阳性血清，由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供，1%红细胞悬液，由哈药集团生物疫苗有限公司质量管理部提供（SPF级公鸡红细胞）。

1.2 试验鸡群

广东清远某黄羽肉鸡养殖场，饲养量20 000只黄羽肉鸡，正常免疫鸡群19 000只，1 000只不免疫重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗。

1.3 免疫剂量及方法

首免：15日龄，免疫剂量0.3mL·羽-1，颈部皮下注射。二免：45日龄，免疫剂量0.5mL·羽-1，肌肉注射。三免：75日龄，免疫剂量0.5 mL·羽-1，肌肉注射。

1.4 血样采集

免疫前先测定基础抗体的15日龄黄羽肉鸡，于29日龄（首免后2周）、36日龄（首免后3周）、43日龄（首免后4周）、52日龄（二免后1周）、59日龄（二免后2周）、66日龄（二免后3周）、73日龄（二免后4周）、82日龄（三免后1周）、89日龄 （三免后2周）、97日龄（三免后3周）、104日龄（三免后4周）、111日龄（三免后5周）、118日龄（三免后6周）分别每组采集10份血样，离心制备血清并按照国家标准红细胞血凝抑制实验（HI）进行抗体检测。

1.5 检测试剂和检测方法

试验均用国家标准红细胞血凝抑制试验（HI）进行抗体检测，待检血清HI抗体滴度≥4 log2时为抗体合格。

2 试验结果

免疫后各毒株抗体效长规律（log2）见附表。对于120日龄出栏的黄羽肉鸡选择H5+H7亚型三价灭活疫苗进行3次免疫，首免是15日龄，二免是45日龄，三免是75日龄，选择在不同日龄对鸡群进行抗体监测，首次免疫14 d后抗体滴度达到5 log2以上，59日龄也就是二免14日龄后，H5N1 Re-11、H5N1 Re-12、H7N9 Re-2抗体滴度均＞7 log2，对鸡群有很好的保护作用。

附表 免疫后各毒株抗体效长规律（log2）

3结论

对于120日龄出栏的黄羽肉鸡，选择15、45、75日龄进行3次免疫，首次免疫后14日龄H5 Re-11、H5 Re-12、H7 Re-2抗体滴度＞4 log2，对鸡群有保护力，2次免疫后28日龄H5 Re-11、H5 Re-12、H7Re-2抗体滴度＞7 log2，说明对黄羽有较好的保护力。2019年高致病性禽流感发生率较高，死亡率低，尤其是对于黄羽肉鸡来说，死亡率不高，养殖户不能引起足够的重视，这就会对于鸡的生长性能带来严重的影响，从而给黄羽肉鸡养殖业带来严重的损失。尤其是在冬季建议慢速型的黄羽肉鸡出栏之前免疫3次禽流感疫苗，这样对于慢速型黄羽肉鸡整个生长周期都会有很好的保护作用。