3种不同方法检测肺炎支原体抗体IgM结果比较

蓝仙娥 文尚梅

(1.广东省清远市妇幼保健院检验科 清远 511500；2.广东省清远市妇幼保健院儿科 清远 511500)

肺炎支原体(M.Pneumonia)是人类支原体肺炎的病原体，主要病理改变以间质性肺炎为主，或并发支气管肺炎[1]。抗体IgM是急性感染的指标，实验室进一步检查，对确定病因，对症治疗具有重要的临床价值。本研究为比较分析肺炎支原体抗体IgM检测的常用方法检测结果，特选定我院1832例疑似肺炎支原体感染的患儿末梢血及血清，进行肺炎支原体抗体IgM检测，并对其检测结果进行对比分析，具体报告如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

应用医学样本对比勘验法，选取入住我院1832例疑似肺炎支原体感染的患儿，收取其末梢血及血清样本进行检测，并对其检测结果进行统计分析。所有患儿均符合《实用儿科学》的诊断标准，起病缓慢，患者伴有乏力、咽痛、头痛、咳嗽、发热、食欲不振、腹泻、肌痛、耳痛等症状[2]。其中，男1034例，女798例，年龄0～14岁，中位数年龄5岁。3组患者临床资料差异不明显，不具有统计学意义(P>0.05)。

1.2 仪器与试剂

胶体金法采用珠海丽珠试剂股份有限公司提供的肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒对病人末梢血进行检测；间接免疫荧光法采用比尔赛有限公司提供的九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒；酶联免疫吸附法用欧蒙试剂公司提供的抗肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒。

1.3 检验方法

用微量吸管取病人末梢血10μl进行胶体金检测；干燥管抽取患儿静脉血2～3ml，分离血清备检测，采用间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法检测。

1.4 观察指标

与临床检出阳性率研究结果进行对比分析，检出率一致性好，与临床符合率高，视为检出效果好。

1.5 统计学分析

本次调查均采用DAS(统计设计和分析系统)对研究数据进行统计分析，阳性率以%表示，计量资料组间比较用χ2检验。当P<0.05时，有统计学意义。

2 结果

2.1 3种方法阳性检出率

1832例中采用胶体金法检测阳性770例，阴性1062例，阳性率42.07%；间接免疫荧光法检测阳性375例，阴性1457例，阳性率20.52%；酶联免疫吸附法阳性384例，阴性1448例阳性率21.0%。胶体金法在肺炎支原体抗体IgM检测中的阳性检出率明显高于间接荧光法和酶联免疫吸附法，胶体金法与间接荧光法两组对比(χ2=42.31，P<0.05)；胶体金法与酶联免疫吸附法两组对比(χ2=39.26，P<0.05)；间接荧光法与酶联免疫吸附法两组对比(χ2=0.134，P>0.05)，见表1。

表1 3种方法阳性检出率

总例数(n)阳性例数(n)阳性率(%)胶体金法183277042.07间接免疫荧光法183237520.52酶联免疫吸附法183238421.0

2.2 3种方法阳性率与临床诊断阳性率符合率对比

3种方法阳性检出例数与临床诊断实际阳性例数符合率差异不显著，P>0.05。但是胶体金法一致性较好，间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法高度一致，见表2。

表2 3种方法阳性检出率

阳性例数(n)临床诊断阳性例数(n)阳性符合率(%)Kappa值胶体金法77053970.00%0.557间接免疫荧光法37528375.46%0.632酶联免疫吸附法38428975.26%0.621

3 讨论

3.1 支原体肺炎概况

支原体肺炎是婴幼儿期常见和高发呼吸道疾病，具有极高的危害性，可导致患儿皮肤、神经系统、心血管系统、泌尿系统、运动系统等损伤。从支原体肺炎发病机制来看，支原体感染引起婴幼儿感染、肺部感染支原体导致的肺炎，通过咳嗽、咳痰等传染，代谢较慢[3]。早期诊断中，通过应用肺炎支原体抗体IgM检测来实现对患者疾病的科学治疗，并成为指导预后的指标。具体方法为胶体金法、间接荧光法 、酶联免疫吸附法。

3.2 3组患者不同检测方法的临床疗效比较

胶体金法在肺炎支原体抗体IgM检测中的阳性检出率明显高于间接荧光法和酶联免疫吸附法，胶体金法与间接荧光法两组组差异显著(P<0.05)；胶体金法与酶联免疫吸附法两组差异显著(P<0.05)；间接荧光法与酶联免疫吸附法两组差异不显著(P>0.05)。

文献资料数据进一步佐证，疑似肺炎支原体(MP)感染中,血清MP-IgM抗体联合检测，具有极高的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值(P<0.05)[4]。MP-IgM阳性率为30.1%；不同年龄段间总体的MP-IgM阳性检出率为26.0%，男女性患儿对比为41.2%和35.1%(χ2=31.161,P<0.001)[5]。MP-IgM和MP-IgG的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度中(胶体金法)快速检测MP-IgM和MP-IgG，对提高疾病诊断率、缩短病程、避免交叉感染、减轻患者及社会负担，起效显著[6]。磁微粒化学发光法与被动凝集法的阳性符合率为95.8%,阴性符合率为96.9%,Kappa值为0.893；ELISA法的阳性符合率为97.4%，阴性符合率为98.9%,Kappa值为0.956[7]。

综合来讲，胶体金作为一种常用标记技术，以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体之免疫标记技术，以氯金酸(HAuCl4)在白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等还原剂的作用下，聚合成相应大小的金颗粒，并由于静电作用而使金颗粒成为一种稳定的胶体状态，形成携带着负电的疏水胶溶液。其主要方法原理为：双抗体夹心法原理，用于较大分子量的蛋白(抗原)的检测中检测效果确切，比之间接荧光法(将抗原或抗体吸附在固相载体表面)和酶联免疫吸附法(将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法)在肺炎支原体抗体IgM阳性率检测中对比效果更明显。

综上所述，3种方法与临床总符合率比较好，且各有优缺点，胶体金法在肺炎支原体抗体IgM检测中的阳性检出率明显高于间接荧光法和酶联免疫吸附法，且操作简便，结果报告快速，可作为临床肺炎支原体抗体检测筛查指标；间接荧光法与酶联免疫吸附试验一致性好，与临床阳性符合率高，可作为临床肺炎支原体感染首选项目。