中草药饲料添加剂对断奶仔猪养分消化率、血液免疫性能的影响

2020-04-17简仕燕吴文旋马政发郭子義

饲料工业 2020年7期

■简仕燕吴文旋，2，3* 赵鹏，4 王菲马政发郭子義

（1.贵州大学动物科学学院动物营养与饲料科学研究所，贵州贵阳550025；2.贵州大学新农村发展研究院，贵州贵阳550025；3.贵州省山地畜禽养殖污染控制与资源化技术工程实验室，贵州贵阳550025；4.遵义市动物疫病预防控制监测站，贵州遵义563000）

仔猪早期断奶技术在我国高度集约化饲养条件下已成为一种关键技术[1]，但影响仔猪早期断奶成功的因素比较复杂，如营养、环境和断奶应激等都会造成“断奶仔猪应激综合征”，导致仔猪腹泻、营养不良以及生长受阻，降低了养猪行业的效益[2]。为此，养猪场使用抗生素来提高仔猪生长性能，降低发病率；然而，由于抗生素的滥用，不仅使得仔猪的机体受损、肠道菌群产生耐药性以及造成严重的环境污染，而且还威胁到人类的健康，且国家已在2020年1月1日起禁止在动物饲料中使用抗生素。因此寻求抗生素替代品成为当前动物营养研究的热点。

中草药所含的有效活性成分健康且丰富，既能在利于仔猪肠道吸收、改善仔猪健康状况和增加仔猪抗病能力的条件下促进仔猪生长发育，且不易产生耐药性，对保护环境和维持生态平衡起着积极的作用[3-5]。前人研究表明，黄柏、黄连、白头翁、金荞麦、朱砂莲均有防治仔猪下痢的功效[6-8]，且黄柏搭配黄连有协同抗菌作用，黄芪有增强机体免疫功能的作用[9-12]。因此，本试验借鉴前人搭配中草药的原则，将白头翁、黄连、黄柏、金荞麦、黄芪、朱砂莲制成新型中草药添加剂饲喂断奶仔猪，在已完成其对断奶仔猪生长性能、腹泻率、血浆生化指标影响的基础上，进一步从养分消化率、血浆免疫性能等方面研究中草药添加剂降低仔猪断奶应激的影响，扩大抗生素替代品选择面，为生产实践提供技术积累。

1 材料方法

1.1 试验设计

选用白头翁、黄连、黄柏、金荞麦、黄芪、朱砂莲等6 味天然保健植物原料，粉碎过120 目筛后分别按照30∶10∶20∶20∶10∶10（组方1）和10∶30∶20∶20∶10∶10（组方2）两个比例混合分装制成中草药饲料添加剂。选取150头体况良好，体重（7.19±0.4）kg、断奶日龄（24±2）d 接近的断奶仔猪，公母各半，按照单因素随机区组设计随机分成5组：对照组、处理Ⅰ组、处理Ⅱ组、处理Ⅲ组、处理Ⅳ组，每个处理3 个重复，每个重复10头仔猪。仔猪断奶后先进入保育舍3 d，期间观察仔猪健康状况、合群性，逐渐饲喂处理日粮，然后进入试验期。对照组饲喂常规日粮，处理Ⅰ组、处理Ⅱ组及处理Ⅲ、处理Ⅳ组在对照组的基础上分别添加0.5%、1.0%中草药饲料添加剂组方1 及0.5%、1.0%中草药饲料添加剂组方2。试验共持续30 d，其中第1～15 d为第一阶段，第16～30 d为第二阶段。试验仔猪自由采食及饮水，喂量以有少量剩余为宜。每天8:00、12:00、18:00 准时饲喂。仔猪正常免疫，圈舍常规消毒、光照充足、干燥通风。准确记录每组腹泻仔猪头数、每期试验仔猪腹泻数。每天观察仔猪生长发育、采食及健康状况。试验仔猪日粮参照中国猪饲养标准（NY/T65—2004）配制，基础饲粮组成及营养水平见表1。

表1 仔猪基础饲粮组成及营养水平

1.2 测定指标

1.2.1 养分消化率

在正试期第12～15 d及27～30 d每天下午随排随收新鲜粪便，加入10%的HCl 固氮后立即置于-20 ℃冰箱保存；同时在采集粪便期间每天采集饲粮样品，混匀后制备成分析试样，参照《饲料分析及饲料质量检测技术》[13]测定总能（GE）、干物质（DM）、粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）、粗纤维（CF）、粗灰分（Ash）、酸不溶灰分（AIA）。GE 采用氧弹式热量计测定（6400 CALORIMETER，Parr），CP 采用全自动凯氏定氮仪（K1100F，济南海能仪器）测定，CF 采用Van Soest 纤维素分析法（FIBRETHERM automatic system FT12，德国）测定，采用乙醚浸提法测定EE，AIA及Ash采用灼烧法检测。采用内源指示剂法（AIA 法）测定日粮养分消化率，计算公式如下：

养分消化率（%）=100-100×[饲料中AIA 含量（%）/粪中AIA 含量（%）]×[粪中养分含量（%）/饲料中养分含量（%）]

1.2.2 血液免疫指标

血样采集及血浆制备：在正试期第16、31 d 每组每个重复内随机抽取3 头仔猪（每组9 头），空腹称重后采用一次性肝素抗凝真空采血管采集前腔静脉血5 ml，3 000 r/min 离心15 min，分离血浆，-20 ℃冰箱保存待测。检测指标包括：免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、干扰素γ（IFNγ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素2（IL-2）。试剂盒及检测方法由武汉基因美生物有限公司提供，检测仪器为全波段酶标仪（MUL⁃TISKAN Sky, Thermo Scientific）。

1.3 数据统计分析

试验数据先采用Microsoft Excel 2010 软件进行初步处理，再用SAS 9.2 进行单因素方差分析。采用Duncan's法进行平均值多重比较，各组间差异显著性水平定为P＜0.05。试验数据以“平均值±标准差”（Mean±SD）表示。

2 结果与分析

2.1 对养分消化率的影响

表2 中草药饲料添加剂对断奶仔猪养分消化率的影响(%)

由表2可见，试猪采食15 d后，处理Ⅱ组DM分别高于对照组、处理Ⅳ组6.02%、6.45%(P＜0.05)；处理Ⅱ组、处理Ⅲ组CP 分别高于对照组5.68%、6.55%（P＜0.05），分别高于处理Ⅳ组6.94%、7.85%(P＜0.05)；处理Ⅲ组EE高于对照组6.24%(P＜0.05)；各组CF和Ash差异不显著(P＞0.05)。至30 d，处理Ⅲ组CP 分别高于对照组、处理Ⅱ组、处理Ⅳ组8.32%、10.00%、8.87%(P＜0.05)；处理Ⅲ组EE 高于对照组、处理Ⅳ组6.43%、6.23%(P＜0.05)；各组DM、CF、Ash差异不显著(P＞0.05)。

2.2 对血液免疫性能的影响

表3 可见，15 d 时，处理Ⅳ组IgM 分别高于对照组、处理Ⅰ组、处理Ⅱ组24.84%、19.12%、15.47%（P＜0.05）；处理Ⅲ组、处理Ⅳ组IgG分别高于对照组、处理Ⅰ组、处理Ⅱ组31.99%、16.03%、34.70%及33.67%、17.50%、36.42%（P＜0.05）；处理Ⅲ组IFN-γ高于处理Ⅳ组24.49%（P＜0.05）；处理Ⅱ组、处理Ⅲ组、处理Ⅳ组TNF-α分别高于对照组21.61%、19.46%、38.42%（P＜0.05），高于处理Ⅰ组20.68%、18.54%、37.35%（P＜0.05）；各组IL-4与IL-2无显著差异（P＞0.05）。至30 d，处理Ⅲ组、对照组IgG 分别高于处理Ⅰ组、处理Ⅱ组18.19%、15.00%及16.90%、13.73%（P＜0.05）；其余指标差异不显著（P＞0.05）。

表3 中草药饲料添加剂对断奶仔猪血浆免疫相关指标的影响

3 讨论

3.1 中草药饲料添加剂对断奶仔猪养分消化率的影响

张世昌等[14]用三颗针、黄芪、山楂3种中药为添加剂饲喂断奶仔猪后，显著改善了仔猪的耗料增重比和腹泻率，并显著提高了粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和磷的消化率。游永波等[15]用以苍术、山楂、神曲和甘草为主的10味中草药配伍添加剂饲喂生长猪，其粗蛋白、粗脂肪和粗灰分的消化率均显著提高。方热军等[16]研究表明，与抗生素相比，1%的中草药添加剂提高干物质消化率2.28%，提高表观氮存留率6.32%。总体来看，本试验研究结果表明中草药饲料添加剂可提高早期断奶仔猪养分消化率，这得到以上学者研究报道的支持。这可能是因为黄柏、黄连含有的小檗碱抑制了仔猪病原微生物的生长，提高蛋白酶和脂肪酶活性，利于营养物质的消化吸收[17-20]。这也印证了本课题组前期研究结果，处理组生长速度高于对照组（简仕燕等，2019）[21]。

3.2 中草药饲料添加剂对断奶仔猪血浆免疫指标的影响

增强机体抗病力是提高生长性能的重要前提，众多研究均表明，中草药饲料添加剂有利于提高断奶仔猪免疫性能。Yue等[22]发现，经过30 d的饲养试验后，0.9%千里光超微粉组可以显著提高血清中IgA、IgG、IgM含量。马玉芳等[23]报道，断奶仔猪采食含黄芪、鱼腥草等制成中草药饲料添加剂后，在第14、28 d 时血清IgG 水平均显著提高。张世昌等[24]指出，饲喂断奶仔猪0.25%的黄芪、三颗针、山楂制成的中草药饲料添加剂可提高IgG、IgA、IgM 含量。谢红兵[25]发现，断奶仔猪采食0.4%方剂D（由绞股蓝、茵陈、板蓝根、甘草组成）后，其IL-2、IFN-γ显著高于抗生素组。王鹏[26]在断奶仔猪日粮添加1.0%、2.0%中草药饲料添加剂（陈皮、神曲、山楂、黄芩提取物），研究发现其TNF-α高于基础日粮组、显著高于抗生素添加组。以上结果与本试验结果总体趋势一致，这与中草药原料的理化特性有关。其中，黄芪可益气、健脾升阳，提高动物机体免疫力，能消除氟苯尼考诱导的免疫抑制作用，增强机体免疫功能；黄芪多糖等免疫增强剂能显著提高环磷酰胺所致免疫抑制模型小鼠的免疫功能[27]，提高IgG等的浓度[28]。肖华丽等[29]报道，白头翁可以增强巨噬细胞的吞噬率，提高免疫功能。路西明等[30]研究显示，金荞麦能促进机体生长发育，增强动物机体特异性免疫和非特异性免疫机能。王航等[31]认为，黄连所含的生物碱可改变巨噬细胞膜蛋白构象从而激活巨噬细胞，增强其吞噬和呼吸爆发功能。范文彤[32]、张芮琪等[33]报道，黄芪多糖可增加IL-2 的产生和提高其活性、提高腹腔巨噬细胞百分率及吞噬指数，增强体液免疫，促进T 淋巴免疫细胞功能，显著提高小鼠的非特异性免疫功能。戴玲等[34]研究显示，白头翁蛋白在体内显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的作用，并可诱导巨噬细胞产生一氧化氮，对巨噬细胞分泌IL-1亦有一定的提高作用，对小鼠腹腔巨噬细胞有免疫增强作用。Zhu等[35]、周霞等[36]指出，黄连素是从黄连中提取或人工合成的一种异喹啉类生物碱，具有抗炎和抑制免疫反应等作用。总之，中草药饲料添加剂可提高断奶仔猪血液免疫机能，增强抵抗力。