异黏蛋白及血管内皮生长因子在上皮性卵巢癌中的表达及与上皮性卵巢癌临床特征的关系

2020-04-16郑文玲黄晓玲

中国当代医药 2020年8期

郑文玲　黄晓玲

[摘要]目的研究異黏蛋白（MTDH）与血管内皮生长因子（VEGF）在上皮性卵巢癌中的表达，及其与上皮性卵巢癌临床病理特征间的联系。方法选取本院2017年2月～2019年1月接诊的40例上皮性卵巢癌患者作为研究组、20例良性上皮性卵巢癌患者作为常规组，再选取20例健康者作为健康对比组。使用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组化SP法，分别检验每组患者MTDH、VEGF mRNA以及蛋白的表达。结果不同国际妇产科联盟（FIGO）分期上皮性卵巢癌患者的MTDH mRNA、VEGF mRNA表达以及MTDH、VEGF阳性表达率比较，差异有统计学意义（P<0.05）;不同淋巴结扩散情况下上皮性卵巢癌患者的MTDH mRNA、VEGF mRNA表达以及MTDH、VEGF阳性表达率比较，差异无统计学意义（P>0.05），且在上皮性卵巢癌中MTDH和VEGF的表达成正相关（P<0.05）。结论 VEGF及MTDH和上皮性卵巢癌的发生和恶化均有紧密关系。

[关键词]异黏蛋白;血管内皮生长因子;上皮性卵巢癌;临床病理特征

[中图分类号] R737.9 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2020）3（b）-0073-04

Expression of metadherin and vascular endothelial growth factor in epithelial ovarian cancer and its relationship with clinical features of epithelial ovarian cancer

ZHENG Wen-ling HUANG Xiao-ling

Department of Obstetrics and Gynecology， People′s Hospital of Luohu District， Guangdong Province， Shenzhen 518000， China

[Abstract] Objective To investigate the expression of metadherin （MTDH） and vascular endothelial growth factor （VEGF） in epithelial ovarian cancer and its association with the clinicopathological features of epithelial ovarian cancer. Methods Forty patients with epithelial ovarian cancer who were admitted to our hospital from February 2017 to January 2019 were enrolled as study group， 20 patients with benign epithelial ovarian cancer were enrolled in the routine group， and 20 healthy people were selected as healthy comparison group. The expressions of MTDH， VEGF mRNA and protein in ovarian epithelial tissues of each group were examined by reverse transcription-polymerase chain reaction （RT-PCR） and immunohistochemical SP method. Results The expressions of MTDH mRNA， VEGF mRNA and the positive expression rates of MTDH and VEGF in patients with different International Federation of Gynecology and Obstetrics （FIGO） stage epithelial ovarian cancer were significantly different （P<0.05）. MTDH mRNA and VEGF mRNA in patients with epithelial ovarian cancer with different lymph node spread， there were no significant differences in mRNA expression and positive expression rates of MTDH and VEGF （P>0.05）， and there was a positive correlation between the expression of MTDH and VEGF in epithelial ovarian cancer（P<0.05）. Conclusion There is a close relationship between VEGF and MTDH and the occurrence and deterioration of epithelial ovarian cancer.

[Key words] Metadherin; Vascular endothelial growth factor; Epithelial ovarian cancer; Clinicopathological features

目前，临床中发病率较高的女性生殖器恶性肿瘤为卵巢癌，该疾病主要发生在卵巢表皮的上皮组织中，具有极高的死亡率[1]。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）会使肿瘤血管的通透性增强，提高恶性肿瘤的浸润作用，同时增加内皮细胞的繁殖，促进产生肿瘤新生血管，继而加速恶性肿瘤的扩散和恶化[2]。异黏蛋白（metadherin，MTDH）基因也叫星形胶质细胞升高基因1（AEG-1）。相关资料[3]表明，MTDH不仅能够诱发癌症，也是产生血管的主要物质。本研究重点探讨VEGF与MTDH在上皮性卵巢癌中的表达，以及其和上皮性卵巢癌临床病理特征之间的联系，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2017年2月～2019年1月我院接诊的40例上皮性卵巢癌患者作为研究组，选取20例良性上皮性卵巢癌患者作为常规组，与20例健康人进行比较。所有研究对象的年龄均在24～60岁，平均（33.5±6.2）岁。所有患者术前均没有接受放疗和化疗。参考国际妇产科联盟（FIGO）（2000年）分期标准发现，在研究组患者中，10例患者处于Ⅰ、Ⅱ期，30例处于Ⅲ、Ⅳ期。手术期间取其部分卵巢组织，放入液氮中冷藏，用于RT-PCR检测。部分组织使用福尔马林处理，行石蜡包埋切片，用于免疫组化检测。三组的一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会的批准，且所有研究对象均详细了解研究，签订知情同意书。

1.2方法

1.2.1 RT-PCR半定量检验收集样品的总RNA，通过逆转录酶试剂盒，合成cDNA第1链。取2 μl的cDNA产物置入0.5 μl TransTaq DNApolymerase、5 μl的BufferⅡ、4 μl目的片段长度，2.5 mmol/LdNTPs相应的上、下游引物各1 μl在50 μl反应体系内实施PCR扩增，并将GAPDH作为内参照物[4]。

1.2.2免疫组化染色将样品切片展开微波修复处理，将免疫组化染化参考SP试剂盒的要求进行，再实施DAB染色[5]。判断结果：MTDH表达主要在细胞膜后者胞质，而VEGF表达在细胞质中，细胞质或胞膜呈现棕黄色代表阳性。参考癌细胞的染色程度以及细胞阳性百分比展开计分[6]。染色轻度：无色为0分，黄色为1分，棕黄色为2分，黄褐色为3分。取每张切片中的5个视野，计算细胞的阳性百分率。若阳性细胞≤5%判断为0分，6%～25%之间为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分。总分≤1分为阴性（-），2分为弱阳性（+），3～4分为阳性（++），超过5分表现为强阳性（+++）[7]。

1.3观察指标

本研究的观察指标为：①不同卵巢上皮组织中MTDH与VEGF mRNA的表达。②对比研究组卵巢癌样品中MTDH、VEGF以及蛋白表达和临床病例特点间的联系。③三组样品中MTDH和VEGF蛋白表达的相关性。

1.4统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，进行t检验;计数资料以率（%）表示，进行χ2检验;相关性分析采用Spearman分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1三组卵巢上皮组织中MTDH与VEGF mRNA表达的比较

研究组MTDH mRNA的相对表达量明显高于其他两组（P<0.05）。且研究组VEGF mRNA的表达量均高于其他两组（P<0.05）。但常规组与健康对比组比较，差异无统计学意义（P>0.05）（图1～2）。

2.2三组卵巢上皮组织中MTDH与VEGF蛋白表达的比较

研究组MTDH与VEGF蛋白的阳性表达率高于其他两组，差异有统计学意义（P<0.05）。但常规组与健康对比组比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

2.3研究组MTDH、VEGF以及蛋白表达和临床病理特点间的关系

不同FIGO分期上皮性卵巢癌患者的MTDH mRNA、VEGF mRNA表达以及MTDH、VEGF阳性表达率比较，差异有统计学意义（P<0.05）;不同淋巴结扩散情况下上皮性卵巢癌患者的MTDH mRNA、VEGF mRNA表达以及MTDH、VEGF阳性表达率比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表2～3）。

2.4 MTDH与VEGF蛋白表达的相关性

所有研究对象中MTDH和VEGF蛋白均表现为阳性的患者数量共有26例，而表现为阴性共有5例，MTDH阳性蛋白的表达与VEGF蛋白的表达成正相关（r=0.44，P<0.05）。

3讨论

相关实验[8]表明，MTDH和乳腺癌、多形性胶质母细胞瘤、肾细胞癌等众多癌症均有紧密联系。VEGF属于促血管生成因子中特异性较高的类型，主要以影响肿瘤生成的方式参与实体肿瘤的病情发展过程中[9]。MTDH基因能够刺激数条信号通路，来更改相关基因的表达，如：c-Myc、Ha-ras等具有的致癌效果[10]。本研究结果显示，不同FIGO分期上皮性卵巢癌患者的MTDH mRNA、VEGF mRNA表达以及MTDH、VEGF阳性表达率比较，差异有统计学意义（P<0.05）;不同淋巴结扩散情况下上皮性卵巢癌患者的MTDH mRNA、VEGF mRNA表達以及MTDH、VEGF阳性表达率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。现阶段国内外和上皮性卵巢癌组织中MTDH和VEGF表达相关的资料相对较少，本研究相关性因素分析结果显示，MTDH与VEGF蛋白表达成正相关（r=0.44，P<0.05）。提示MTDH和VEGF蛋白表达或许具有协同作用，其共同介导了卵巢癌的发病及恶化，上述两种物质共同介入了卵巢癌的发病及恶化的整体过程，对于临床诊断具有重要意义[11-13]。

综上所述，MTDH与上皮性卵巢癌的临床病理特点具有紧密联系，且与VEGF的表达呈现正相关[14-15]。MTDH是产生血管的重要物质，能够和VEGF共同调节上皮性卵巢癌的发生、恶化以及扩散，同时检测以上两种指标能够作为上皮性卵巢癌预后效果的黄金指标[16]。

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