胱抑素C、NGAL检测在肝硬化并发急性肾损伤早期诊断中的应用价值

韩学贞，位晨晨

(郸城县第二人民医院 检验科，河南 周口 477150)

急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)是肝硬化(liver cirrhosis，LC)患者常见的并发症之一，经多种途径使患者致病。研究证实，LC患者肾损伤程度及变化均直接影响其预后，故对LC患者的肾功能状态进行早期评估极其重要[1]。目前，肾功能状态评估临床主要依赖传统的生化检测指标如血清肌酐(serum creatinine，SCr)、尿素及尿量的变化，但这些指标受多种因素的影响，均在肾功能受损较为严重时才会发生改变，对肾功能早期评估的预测价值有限。为此，本研究通过对2016年1月至2018年12月收治的118例肝硬化并发急性肾损伤(liver cirrhosis acute renal injury，LC-AKI)患者的胱抑素C(cystine C，Cys-C)和尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin，NGAL)结果进行回顾性分析，旨在探索Cys-C和NGAL检测水平变化在LC患者并发AKI的早期诊断、病情进展等方面的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2016年1月至2018年12月郸城县第二人民医院收治的经症状体征、影像学和检验结果确诊为LC-AKI的患者(LC-AKI组)120例作为研究对象。LC-AKI患者的诊断符合2012年改善全球肾脏病预后组织(kidney disease improving global outcomes，KDIGO)发布的AKI诊断标准[2]，排除恶性肿瘤、慢性肾小球肾炎、合并严重心脑肺疾病以及其他原因引起的AKI。按照2012年KDIGO的分期标准[2]，将LC-AKI组41例SCr增加≥26.0 μmol·L-1或增至基线水平的150%～200%的LC-AKI患者纳入Ⅰ期；将40例SCr增至基线水平的201%～300%的LC-AKI患者纳入Ⅱ期；将37例SCr增至基线水平的301%以上或绝对值≥353.6 μmol·L-1，或开始肾脏替代治疗的LC-AKI患者纳入Ⅲ期。同时收集120例无继发AKI的LC患者作为对照组。参与本研究的患者及家属均知情并自愿签署同意书，本研究经医院伦理委员会审核批准。两组年龄、性别构成、体质量指数(body mass index，BMI)等指标比较，差异无统计学意义(均P>0.05)，具有可比性。见表1。

表1 两组患者一般资料比较

注：BMI—体质量指数。

1.2 仪器与试剂检测仪器为东芝TBA120全自动生化分析仪(TBA120)，Cys-C、SCr和NGAL检测试剂、质控品、校准品均由四川新健康成生物股份有限公司提供。

1.3 检测方法分别采集两组患者清晨空腹静脉血3.0 mL，自然完全凝固后。按常规(3 500 r·min-1，离心10 min)方法分离血清待测，样本避免溶血和污染。4 h内采用胶乳免疫比浊法在日立XX上检测Cys-C(正常参考区间为0.51～1.09 mg·L-1)，采用苦味酸法检测SCr(正常参考区间为38.0～106.0 μmol·L-1)。同时收集患者24小时尿量，测量总量后。量取10 mL按常规(3 000 r·min-1离心10 min)方法收集上清液，在TBA120上采用免疫比浊法检测NGAL(正常参考区间为<50.0 ng·mL-1)。以上操作由科室同一检验技师在仪器上在质量控制合格后，完成样本检测。

1.4 观察指标比较LC-AKI组与对照组以及LC-AKI组不同分期检测Cys-C、SCr、NGAL及24小时尿量的差异，分析Cys-C和NGAL与SCr和24小时尿量的相关性，Cys-C、SCr和NGAL检测结果超过正常参考范围上限为异常病例。

2 结果

2.1 两组Cys-C、SCr和NGAL检测水平分析以及24小时尿量比较LC-AKI组患者Cys-C、SCr和NGAL检测水平高于对照组，24小时尿量低于对照组，差异有统计学意义(均P<0.05)。随着病情进展，Cys-C、SCr和NGAL检测水平呈现逐步升高的趋势，24小时尿量则呈逐步下降的趋势，Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期间比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组Cys-C、SCr和NGAL检测水平分析及尿量比较

注：与对照组比较，aP<0.05；与Ⅰ期比较，bP<0.05；与Ⅱ期比较，cP<0.05；Cys-C—胱抑素C；NGAL—尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白；SCr—血清肌酐。

2.2 两组Cys-C和NGAL与SCr、尿量相关性分析LC-AKI组患者Cys-C和NGAL与SCr呈正相关，与24小时尿量呈负相关(均P<0.05)；对照组患者Cys-C和NGAL与SCr和24小时尿量无相关(均P>0.05)。见表3、4。

表3 LC-AKI组Cys-C和NGAL与SCr、24小时 尿量相关性分析

注：Cys-C—胱抑素C；NGAL—尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白；SCr—血清肌酐。

表4 对照组Cys-C和NGAL与SCr、24小时尿量 相关性分析

注：Cys-C—胱抑素C；NGAL—尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白；SCr—血清肌酐。

2.3 Cys-C和NGAL在LC-AKI组Ⅰ期患者中单项与联合检测阳性率比较在LC-AKI组Ⅰ期患者中Cys-C和NGAL联合检测的阳性检出率[90.24%(37/41)]高于Cys-C[65.85%(27/41)]和NGAL[73.17%(30/41)]单项的阳性检出率，差异有统计学意义(均P<0.05)。

3 讨论

LC是各种肝病发展的晚期阶段，可出现多种并发症，肾脏是最易受损的器官之一。AKI是LC患者常见的一种并发症，通过多种途径导致LC患者肾功能发生AKI，早期发现并诊断、给予治疗，是避免LC患者发生AKI和改善LC患者预后的关键[3]。目前，SCr和尿量是推荐诊断AKI的主要指标，但这两项指标受进食、机体代谢、收集耗时等因素的影响，在临床上的应用受到极大的限制。研究证实，SCr和尿量在肾脏早期病变时，几乎无明显改变，对AKI的早期诊断缺乏敏感性和特异性[4]。仅仅在肾损伤晚期才出现明显改变，无法及时反映LC患者的肾脏早期病变。因此，筛选敏感能预测早期肾损伤指标，对LC-AKI患者早期诊治，改善预后的意义重大。

国内外研究表明，Cys-C、NGAL、尿白细胞介素-18等指标与AKI关系密切[5,8]。Cys-C作为患者早期肾损伤的敏感指标，在体内的水平与患者性别、年龄、炎症和恶性病变等因素无关。仅通过肾脏代谢、血清水平改变与肾功能密切相关，是目前反映肾小球过滤率较为理想的内源性标志物[6]。当患者肾功能有轻度变化(如肾小球滤过功能受损等)或早期损伤时，Cys-C在血液循环中的水平迅速升高，其检测敏感性、稳定性在评价肾功能方面的应用已被广泛认可[7]。NGAL是通过微阵列基因表达谱分析检测列最早、最稳定出现的蛋白质之一，属于急性诱导的肾脏损伤保护性蛋白，与中性粒细胞明胶酶共价结合。在病理状态下(肾小管受到如缺血或毒性药物等有害刺激)，当炎症发生、免疫细胞或肾小管上皮细胞受到损伤性刺激时，NGAL才被诱导而发生高表达[8]。NGAL、mRNA上调，进而NGAL合成增加，在血液和尿液中表达增高。肾小管吸收障碍，大量从尿液中排出，从而致尿液NGAL水平显著增高。研究已证实，在早期AKI，NGAL预测患者肾小管损伤的严重程度价值高于SCr[9]。

本研究结果显示，LC-AKI组患者Cys-C、SCr和NGAL检测水平高于对照组，24小时尿量低于对照组，与童运涛等[10]研究报道一致。说明LC患者只要存在肾损伤，都会导致Cys-C和NGAL水平的升高，这一变化对判断LC患者肾功能是否改变极为重要。随着病情进展，Cys-C、SCr和NGAL检测水平呈逐步升高的趋势，24小时尿量则呈逐步下降的趋势，Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期间比较均有明显差异，与钟蕊等[11]报道一致。预示Cys-C和NGAL水平变化对辅助诊断早期AKI具有积极的临床价值，并对于AKI病情进展监测和预后判断具有一定的参考价值。LC-AKI组患者Cys-C和NGAL与SCr呈明显正相关，与24小时尿量呈负相关，对照组患者Cys-C和NGAL与SCr和24小时尿量无相关，表明Cys-C和NGAL可作为判断LC患者是否肾损伤的有效指标。在LC-AKI组Ⅰ期患者中Cys-C和NGAL联合检测的阳性检出率高于单项的阳性检出率，表明在LC并发AKI的早期，应采用多指标联合来提高LC患者肾损伤的检出率，为临床提供及时准确的诊断依据，有利于降低患者病死率及致残率。

综上所述，Cys-C和NGAL检测能早期发现肝硬化患者的肾功能损伤，可作为LC-AKI早期诊断指标，动态监测对LC-AKI的病情进展、评估预后等方面有较高的应用价值。但由于本研究纳入的病例样本有限，后续仍需进一步增强循证依据。