肇庆地区妇女HPV分型检测联合宫颈TCT及宫颈活检结果分析

钟纬经,梁浩和

（广东省肇庆市中医院 病理科，广东 肇庆 526020）

宫颈癌是临床常见的女性生殖系统高发性恶性肿瘤之一，严重威胁女性生命健康。在我国，宫颈癌的发病率与死亡率占据了全世界总量的三分之一［1］。据有关研究统计，该病死亡人数在十年时间内提升了25%。在发达国家，该病的筛查防治工作不断完善，由此也更好地控制了发病率，但对于发展中国家而言，宫颈癌的发病率则逐年提升［2］。当下，对于宫颈癌的筛查手段集中在TCT 检查，然而多数检查诊断工作中对于高危型HPV 缺乏足够的重视，由此导致诊断准确率下降，出现漏诊几率，导致患者错失最佳治疗时机［3］。宫颈癌的早期诊断与治疗是优化患者生命质量的关键。本研究中，主要分析肇庆地区妇女人乳头瘤病毒（human papillomavirus, HPV）感染状况，探讨分型检测联合新柏氏液基细胞学检测（thinprep cytologic test,TCT）检测的特异性、准确率，并以病理活检结果为金标准，观察两种检测方法的临床诊断价值，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择 2017 年6 月至2019 年6 月肇庆地区在本院行宫颈癌筛查的妇女2316 例为研究对象，行HPV 检测，分析肇庆地区妇女HPV-DNA 感染率及基因亚型特点，此次研究均经本院伦理委员会批准，患者年龄17～88 岁，平均（46.33±10.64）岁；孕产次1～3 次，平均（1.73±0.60）次；并选取同期在本院联合TCT 检测的妇女2 046 例，患者年龄18～73 岁，平均（45.37±10.68）岁；孕产次 1～3 次，平均（1.75±0.63）次。

1.2 方法

HPV 检测：辅助患者保持膀胱截石位，采用无菌棉将宫颈外口做全面的清洁，而后通过一次性宫颈刷经阴道放置入宫颈管，采用顺时针旋转10 圈方式获取宫颈分泌物。而后再将采集的分泌物放置在专业的HPV 保存液无菌封闭环境中存放，采用专用试剂盒，运用PCR 荧光法处理，针对各分型HPV 检测，做好全程质控管理。

TCT 检查：采用一次性宫颈刷在宫颈中采集分泌物，与HPV 检测操作一致，而后将分泌物样本放在细胞保存液内进行振荡漂洗，而后再进行密封保存送检。通过TCT 自动细胞制片机做好宫颈细胞涂片，进行染色固定处理后，通过TCT 细胞学巴氏染色进行诊断。

1.3 观察指标

分析肇庆地区妇女HPV-DNA 感染率及基因亚型特点；观察HPV 联合TCT 检测联合检查在诊断宫颈癌及癌前病变的分布的灵敏度、特异性、符合率。

1.4 统计学方法

应用SPSS 19.0 软件统计分析。以百分比描述HPV 基因亚型感染分布情况，同时计算HPV、TCT 或联合检出的灵敏度、特异性、假阳性率及假阴性率。

2 结果

2.1 HPV检测结果及基因分布

行HPV 检测的2316 例妇女中：共检出414 例为阳性结果，其中单纯感染高危类型病毒327 例，单纯感染低危类型病毒57 例，高危和低危病毒合并感染30 例。感染高危病毒中同时感染两种及以上高危类型病毒60 例；感染低危类型病毒中同时感染两种及以上低危类型病毒1 例。

2.2 HPV与TCT同时检测的准确性

宫颈癌筛查2046 例妇女：首先行HPV 筛查共检出209 例为阳性结果，再进行TCT 进一步检查，HPV 与TCT 联合检出81 例为阳性结果，宫颈活检病理确诊为宫颈癌和癌前病变者35 例，HPV 与TCT 联合检测方法阳性结果与病理结果比较显示，灵敏度为85.37%（35/41），特异性为72.62%（122/168），假阴性率为14.63%（6/41），假阳性率为27.38%（46/168）TCT 阳性中：不能排除高级别鳞状上皮内病变的非典型鳞状上皮细胞（atypical squamous cell cannot exclude HSIL,ASC-H）9 例、低级别鳞状细胞病变（low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL）21 例、意义不明确的非典型鳞状细胞（atypical squamous cells of undetermined significance, ASC-US） 20 例、高度鳞状上皮内病变（high-grade squamous intraepithelial lesion, HSIL） 25 例、非典型腺细胞（atypical glandular cell,AGC）4 例、鳞状细胞癌2 例。

表1 肇庆地区妇女HPV 感染状况及基因亚型分布特点

3 讨论

宫颈癌属于临床上常见的恶性肿瘤，对女性患者的身心构成严重创伤。该病发病机制尚未明确，但是有关研究认为该病与患者宫颈高危型HPV 感染有密切联系［4］。HPV 侵入人体后，出现宫颈鳞状上皮细胞感染，一般情况下机体会自行清理，但是部分患者会出现持续性感染。HPV 病毒感染如果长时间持续，则可能增加宫颈癌的发生风险，及时治疗HPV 病毒感染是挽救患者生命的有效手段。

经病毒学、流行病学等专家研究表明，特定类型HPV 感染是引发宫颈浸润癌的首要因素。有99.7% 宫颈癌患者中检验发现存在HPV-DNA 感染，基因亚型最为常见的是HPV16、18、45、31等亚型［5］。HPV 致病力程度与不同宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）、宫颈癌内HPV 感染分布状况，HPV 可以划分成中国人常见型、低危型与高危型等情况。当前低危型是引发低度宫颈上皮内瘤变与扁平疣类疾病的重要原因，包括HPV6、11、42、43、44；高危型共13 种，集中在 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68，是引发CINⅡ～Ⅲ及宫颈癌的重要原因［6］。在中国群体中，常见的亚型主要集中在HPV53、HPV66、CP8304。本研究单一行HPV 检测的2316 例妇女中：共检出414 例为阳性结果，其中高危类型病毒357 例：基因亚型以HPV58（65 例）、HPV39（35 例）、HPV56（15 例）、HPV16（69 例）、HPV52（92 例）为主；低危类型病毒87 例：基因亚型以 HPV81（CP8304）（33 例）、HPV6（17 例）、HPV11（15 例）为主。表明肇庆地区妇女人乳头瘤病毒（HPV）感染主要高危类型病毒为主，基因分型主要以HPV58、HPV39、HPV16 及 HPV52 较为多见。

有关研究表明［7］，单一性的HPV 感染所引发的宫颈癌风险提升仅仅为19.9 倍，但是多重性的HPV 感染则会让风险性提升31.8 倍。本研究单一行HPV 检测的2316 例妇女中：共检出414 例为阳性结果，其中单纯感染高危类型病毒327 例，单纯感染低危类型病毒57 例，高危和低危病毒合并感染30 例。感染高危病毒中同时感染两种及以上高危类型病毒60 例；感染低危类型病毒中同时感染两种及以上低危类型病毒1 例。可以表明本地HPV 感染主要集中在单纯型为主，同时多重感染一般是性活动相对频繁的群体中，感染一般为一过性情况，没有引发后续宫颈上皮内瘤样病变。对于HPV 阳性情况，液基细胞学属于正常的群体，一般推荐其采用6 至9 个月的HPV-DNA 复查，如果有HPV 感染，则属于高危群体范围，需要用药与定期到院复查［8］。

有关研究表明［9］，宫颈癌筛查的定期进行可以有效的提升宫颈癌与癌前病变的及时检出率，有效的做到早期诊断与治疗，减少该病死亡率，有效的提升患者的生存率。高危型HPV 感染与宫颈癌出现有着密切的联系。从CIN 转变为宫颈浸润癌，一般会有10 至15 年的过度时间。如果做到早期的诊断发现，可以防控疾病发展。一般在筛查的手段上，可以选择宫颈细胞学检查（传统宫颈刮片与TCT）、阴道镜检查、宫颈活检、HPV检测［10］。宫颈刮片细胞学检查会出现相对高的假阴性、漏诊等情况，由此更多的采用TCT。TCT检查可以观察到病变宫颈细胞，具有较高的检查特异性，但是在宫颈病变的检查的灵敏度相对不足，无法有效的观察宫颈病。在国外研究中，HPV 检测灵敏度会比细胞学筛查更高，同时能够提升与预测病情发展以及术后复发等风险，该检测的阴性预测值相对高，可以降低细胞学检查阳性患者的检查频次，随访间隔时间可以相对延长，降低反复高频率检查导致的女性伤害。HPV 感染提示获得性免疫缺陷综合征，如果有HPV 感染，则不一定是CINⅡ或宫颈癌。在HPV 的检查上需要检测方式的敏感度尽可能更高，但是如果HPV检测敏感度高则会使得非病变风险低病毒载量感染者被判断为阳性，一般属于一过性感染。如果属于一过性HPV 感染被检测为阳性，则可能导致患者不必要的诊治费用、心理层面的焦躁不安等问题，甚至会引发治疗有关的出血、远期妊娠并发症等风险。鉴于此，联合检查的方法，取长补短，发挥协同作用，HPV 检测的灵敏度和阴性预测值很高，假阳性率较高；TCT 检查的特异度较高，灵敏度较低，假阴性率较高；联合HPV 与TCT 检测，筛查宫颈癌变的灵敏度、特异度明显提高，降低漏诊率和误诊率。

本研究HPV 与TCT 联合检测方法阳性结果与病理结果比较显示，灵敏度为85.37%（35/41），特异性为72.62%（122/168），假阴性率为14.63%（6/41），假阳性率为27.38%（46/168）。亦充分论证了HPV 与TCT 联合检测，可有效提高诊断准确率，减轻患者心理负担，具有极大的社会经济学效益。