肺炎支原体检测方法的比较分析

方治翔

（浙江长兴县人民医院，浙江 湖州 313100）

肺炎支原体（MP）是最小的原核细胞型微生物，可以在无生命的培养基上生长，也是一种导致儿童和成人支气管炎和原发性非典型肺炎的重要病原体。MP感染可发生在所有任何年龄段的人群中，尤其是经常发生于儿童上呼吸道和下呼吸道的急性感染，并且已经变成是中老年重症肺炎病人不得已住院的重要原因[1-3]。在实验室测试中对由病原体如MP、病毒和细菌引起的感染类病症具有重要的检测诊断价值，因为在MP感染的早期阶段没有典型性和特定性的临床特征。对于MP感染的早期诊断和治疗非常重要的是寻找敏感和特定的检测参数。

1 资料与方法

1.1 一般资料 测试对象是我院2019年1月-2019年6月临床证实的114例肺炎支原体肺炎患儿，并检查了其咽拭子、血清样本。男性56例，女性59例，年龄9个月-14岁，平均年龄为7.0岁，所选儿童的临床症状以发烧，咳嗽和哮喘为主要特征。

1.2 方法

1.2.1 FQ-PCR 在生理盐水中放置涂片，除去残留的溶液，加入裂解物，并在95 ℃加热10 min后，将上清液进行PCR测试，并在荧光测量仪中放置反应容器，后期由电脑进行主要的数据分析。选用ABI7500型实时荧光定量PCR仪，中山大学达安基因股份有限公司生产的肺炎支原体核酸定量检测试剂盒。严格按说明书进行操作和结果判定。

1.2.2 血清被动凝集法 取患者3 mL血液经过3500 r/min离心5 min后分离出血清，进行MP复合抗体检测，选用富士瑞必欧株式会社生产的肺炎支原体抗体检测试剂盒（被动凝集法）。严格按说明书进行操作和结果判定。

1.2.3 间接免疫荧光法 取患者3 mL血液经过3500 r/min离心5 min后分离出血清，进行MP-IgM检测，选用欧蒙呼吸道病原体谱抗体抗体IgM检测试剂盒。严格按说明书进行操作和结果判定。

1.3 统计学方法 采用t检验，数据具有一定的准确性。

2 结果

114个样本检测最高的是FQ-PCR阳性率为93.8%，间接免疫荧光法检出阳性率为86.0%，阳性率最低的为间接免疫荧光法50.9%，据结果具有一定的准确性，对整体测试结果进行详细的分析之后。FQ-PCR法是目前最准确的检测方法。具体数据见表1。

3 讨论

MP是人类支原体肺炎的致病因子，支原体肺炎的病理变化主要是间质性炎症，在某些时候会并发支气管肺炎，我们将此称为原发性非典型性肺炎。这种病症通过飞沫进行传播，在身体里会潜伏为2-3周，每年青少年发病率最高，在秋冬季发病率明显大大增加，多为头痛，喉咙痛，发热，咳嗽等症状，均为一般呼吸道症状，大多数患者并出现明显的病症。因此在治疗方面，我们通常会采用中医和西医相结合的方式为每位患者进行详细的诊断。

表1 检出阳性率

由于MP感染的临床症状并不明显且与其他肺炎无法区分，所以对支原体肺炎的诊断主要取决于临床检查。通常我们有三种检测方法分别是FQ-PCR、血清被动凝集法、间接免疫荧光法。FQ-PCR：灵敏度、特异性都能满足临床，但是MP死亡后其DNA仍可存在于部分患者体内，时间达7周-7个月，且不易降解，导致DNA检测结果不能很好地用于治疗效果的评价。血清被动凝集法：患者血清MP抗体滴度≥1:160作为近期或急性感染的诊断标准；恢复期和急性期MP抗体滴度呈4倍及以上增高或减低时，可确诊。间接免疫荧光法：实验室易受人为判断荧光结果影响，包括抗原含量不足可能会产生假阴性，体内含有类风湿因子、多种自身免疫性抗体等与包被抗原有交叉反应可能出现假阳性。

根据这项研究，使用FQ-PCR检测阳性率在114例样本中是最高的，为93.8%，其次是血清被动凝集法为86.0%，间接免疫荧光法的阳性率最低为50.9%，该项数据结果具有一定的准确性。在实际操作检测过程中，除肺炎支原体自身的阳性结果外，其他病原体检测结果为阴性，且与其他病原微生物无不良反应，说明检测方法具有特殊性。综上所述，病原学与血清学联合诊断仍然是目前提倡的MP感染诊断策略，由实验室测试的结果来进行病情分析，随后确定治疗该病的具体方案。

总而言之，FQ-PCR法在快速诊断的早期阶段更为有效，其临床意义更为重要，与血清被动凝集法和间接免疫荧光法相比较，未来应使用FQ-PCR法作为主要的检测手段，可以更加提高治疗的准确性。