四聚·杀螺胺致死鲫鱼对雏鸭的急性毒性观察

金伟,朱磊,马晓荷,汪敏,郭见多,张世清

氯硝柳胺是一种杀软体动物剂，于1961年首次被合成生产，因其对血吸虫中间寄主螺类的灭杀效果高效持久，且对哺乳动物毒性低而被广泛深入应用。氯硝柳胺是世界卫生组织唯一推荐使用的杀钉螺剂，也是我国目前最常用的杀钉螺药物[1]。氯硝柳胺对鲫鱼、草鱼、鲢鱼等常见鱼类的毒性极大。既往研究表明，草鱼在氯硝柳胺0.227 6 mg/L 浓度以上，1 h 内100%死亡，鲢鱼在氯硝柳胺0.295 9 mg/L 浓度以上，1 h内100%死亡[2]。目前安徽省有螺面积26 520.76 hm2，其中23 036.01 hm2为湖沼地区[3]，占全省有螺面积的86.7%。在湖沼地区开展药物灭螺不可避免的造成鱼类死亡。由于湖沼地区农民有在野外水域放养鸭、鹅、番鸭等水禽的传统，一些疫区农民反映家鸭在食用被四聚·杀螺胺悬浮剂毒杀的鱼后出现疑似中毒死亡现象。针对此类情况，我们在安徽省当涂县的试验现场开展了四聚·杀螺胺悬浮剂致死鲫鱼对雏鸭的急性毒性试验，对食用四聚·杀螺胺毒杀鱼类是否会导致雏鸭急性中毒进行论证。

材料与方法

1试验材料

1.1生物试材试验中所用鲫鱼为当地水产市场采购体重30～50 g 之间的活体鲫鱼，总数为150条。试验所用雏鸭为当地饲养场采购的生长时间满60 d体重不超过1 200 g 的雏鸭，总数为20只。

1.2试验药剂本次试验所用氯硝柳胺制剂为江苏艾津农化有限公司生产的26%四聚·杀螺胺，产品农药登记号为WP20110222，产品生产批号为2017021001。空白对照为脱氯水。

2试验方法

2.1试验环境本次试验选择安徽省马鞍山市当涂县湖阳镇作为试验现场。在当地石臼湖堤坝外选择一处平坦空地制作圈养铁笼并搭建简易雨棚，对试验用雏鸭实施圈养。试验实施时间为2018年7～8月期间，试验期间的室外环境温度为30 ～35℃，室外环境相对湿度40%～65%。

2.2试验用鱼的分组处理从150条鱼中挑选100条活力较好的随机分为2 组，每组50条，分别作为试验组和对照组。试验开始前1 h将试验组的鱼以氯硝柳胺有效成分浓度20 g/L 的四聚·杀螺胺悬浮液浸杀处死，并在处死后继续在药液中浸泡30 min以上，对照组鱼采用离水后自然死亡的方式予以处死。两组鲫鱼在处理完毕后分别予以切碎并按照40 g 一份每组各称取10份备用。

2.3试验实施将20只雏鸭随机分为2 组，每组10 只并进行编号，其中1～10 号为对照组，11～20号为试验组。由于家养雏鸭正常喂食规律为每日喂食三次，每次喂食的间隔时间约为6 h，因此本次试验在试验开始前6 h对试验用雏鸭予以禁食以确保试验时雏鸭有足够进食需求。在开始喂食碎鱼肉前将两组雏鸭分别称重并记录，之后按照试验组和对照组分别喂食相应分组的碎鱼肉，每只雏鸭喂食一份碎鱼肉。喂食后再次禁食6 h。在禁食6 h期间观察行为有无异常[4]。之后恢复正常喂食规律，每隔6 h以稻谷喂食一次，下午第三次喂食后夜间不予喂食。按需给食，喂食量至所有家鸭停止进食为宜。试验从喂食鱼肉起持续观察168 h，每次喂食同时分别观察两组家鸭的行为、进食及排便状况。观察满168 h后对每组家鸭再次禁食6h，之后进行称重。对比两组雏鸭试验168 h后的体重变化，初步判断食用经四聚·杀螺胺浸杀处死的鲫鱼对雏鸭是否存在毒性。

3统计分析

试验所得数据使用WPS表格录入计算机，分别计算试验前后两组雏鸭的体重均数及体重增加值均数，使用t检验分别对比两组雏鸭试验前和试验后的体重状况。

结果

1喂食后雏鸭行为观察

喂食后6 h 期间分别对两组雏鸭的活动状况进行观察，均未发现活动异常。在禁食满6 h 的首次喂食中，两组雏鸭均表现出强烈食欲，进食积极迅速。在之后每次喂食均对两组雏鸭进食情况进行观察，两组雏鸭在试验后的6 h 到168 h 期间，每次喂食均表现积极迅速，未发现有厌食、喂食时不活动或行动迟缓等情况。两组雏鸭在每次进食后均正常排便，未观察到不排便或大便性状异常。

2两组雏鸭的体重对比

在试验开始前和试验结束后分别对两组雏鸭进行称重，并计算各试验对象个体在试验期间的体重增加值，结果见表1。

分别计算两组雏鸭试验前和试验后的体重均数以及体重增加值均数，并对两组雏鸭的三项均数进行t检验。结果显示，试验组和对照组雏鸭在试验前体重均数差异无统计学意义。在试验后，其体重均数无统计学意义，但是其体重增加值差异有统计学意义，试验组体重增加值低于对照组。见表2。

表1试验组和对照组雏鸭试验前后的体重值(单位:g)

表2两组雏鸭试验前后的体重对比

讨 论

已有研究表明，氯硝柳胺乙醇胺盐对雏鸭无急性毒性作用，对3 ～4 w 的雏鸭1 次口服剂量达到100 mg/只时并未出现临床症状[5]。 吴月英等在施用氯硝柳胺的荒地中放养成年鸭子，经2 个月持续观察，鸭子未出现不良反应[6]。 汪伟明[7]等对家鸭分别进行了氯硝柳胺直接喂食和喂食氯硝柳胺毒杀死鱼的试验，结果也未观察到家鸭的急性中毒现象。

氯硝柳胺在中毒的鱼体内主要以氯硝柳胺原形、与氯硝柳胺结合的葡萄糖苷酸以及氯硝柳胺硫酸酯等形式存在[8]。 本次试验中，雏鸭在食用四聚·杀螺胺毒杀的鲫鱼后6 h 内未出现急性中毒症状，也未出现其它不良反应。 在之后每次喂食的观察中均表现出较强食欲，进食积极快速，未出现厌食、活动力减弱或行动迟缓等症状；每次进食后均正常排便，大便未见异常性状。 试验观察满168 h 未见异常。据此结果可以认为四聚·杀螺胺悬浮剂中氯硝柳胺及其它主要成分在鱼体内的各代谢产物对雏鸭不会造成急性中毒，该结论与既往研究基本一致。

本次试验中发现试验组雏鸭体重增长有所减缓，该结果与汪伟明[7]研究中观察到的家鸭体重下降现象基本一致。 对于该现象，汪伟明认为与氯硝柳胺的刺激性气味影响家鸭食欲有关，对于该观点笔者表示认同。

综上，通过本次研究，可以认为四聚·杀螺胺毒杀的鲫鱼不会造成雏鸭的急性中毒，但由于氯硝柳胺的气味刺激等因素可能会造成雏鸭短期食欲下降并导致体重增长放缓。 由于本次研究重点关注急性毒性，因此未对两组雏鸭进行更长时间持续观察，对于试验组雏鸭在试验结束后的长期体重增长情况尚缺乏观察数据。 由于氯硝柳胺是一种对鱼类和部分两栖动物有较强毒性的灭螺药，因此在灭螺工作中须谨慎控制施药区域，避免过度施药造成环境污染，也易造成灭螺工作与水产养殖的矛盾。