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高光谱成像技术在肉类安全无损检测的应用研究进展

2020-03-22夏杨毅

食品与生物技术学报 2020年12期
关键词:肉类波长牛肉

夏杨毅, 赵 鸾

(1. 西南大学 食品科学学院,重庆400715;2. 重庆市特色食品工程技术研究中心,重庆400715)

肉类是人类饮食中的重要组成部分,可以提供人体所需的营养物质如维生素、矿物质及必需氨基酸等[1]。 然而肉类在生产和销售过程中易受微生物及其他有毒、有害物质污染和自身物理、化学以及生物学变化引发腐败变质,危害人体健康,故实现肉类安全无损检测意义重大。 高光谱成像(hyperspectral imaging,HSI)技术作为一种新型无损检测技术,融合了传统光谱学技术和计算机视觉技术的优势, 可同时获取样品的光谱信息和图像信息,目前已有多篇文献报道其在肉类营养品质(如蛋白质、水分、脂肪)[2-3]、食用品质(如颜色、嫩度)[4-6]、技术品质(如pH、持水力)[7-8]以及安全品质(如微生物含量、TVB-N 值)[9-10]无损检测方面具有重大潜力。

为追踪HSI 技术在肉类安全无损检测方面的最新应用进展,作者重点综述了其在肉类有毒有害物质检测、肉类掺假检测、肉类分选分级中的研究现状,讨论了其存在的不足及发展趋势,以期为肉类安全无损检测方法的研究提供参考。

1 HSI 技术

HSI 技术是基于食品化学成分和物理特征的差异,致使特定波长的吸收度、分散度、反射率以及电磁能量等光谱信号差异,进行定性或定量分析的无损检测技术,系统主要由光源、分光设备、CCD 图像采集系统、计算机硬件及软件等构成。HSI 系统有点扫描、线扫描、面扫描、单镜头扫描等4 种成像方式,点扫描方式精确度最高,线扫描方式应用最广泛[3,11]。 光谱范围涵盖了紫外至近红外波段,以及波长大于2 560 nm 的波段[12],其中,光谱范围380~800 nm 和400~1 000 nm 的可见光/近红外(visible near-infrared,VIS/NIR) 已广泛应用于食品分析,光谱范围900~1 700 nm 能满足食品分析的精确性[13];输出的高光谱图像是一个三维数据立方体,也称超立方,可以看作二维空间维度(X、Y)和一维光谱维度(λ)组成的一个三维数据矩阵(X、Y、λ),提供了海量信息数据包括定性信息、定量信息和冗余信息[14]。

HSI 技术通过SG(savitzky-golay)平滑[15-18]、导数法[6,17-21]、标 准 正 态 变 量(standard normal variate,SNV)[22]、 多 元 散 射 校 正 (multiplicative scatter correction,MSC)[23-27]等对原始光谱进行标定,通过回归 系 数 (regression coefficient,RC)[15]、 稀 疏 表 示(sparse representation,SR)[14]、 主成分分析(principal component analysis,PCA)[6,14,20,22-24,28]、 遗 传 算 法(genetic algorithm,GA)[20]、灰度共生矩阵(gray level co-occurrence matrix,GLCM)[22-23]、 连 续 投 影 算 法(successive projections algorithm,SPA)[29]、入侵杂草优化(invasive weed optimization,IWO)[30]等筛选特征波长,通过多元线性回归(multivariable linear regression,MLR)[15,29]、 支 持 向 量 机 (support vector machine,SVM)[18,21,24]、 最小二 乘支 持向量 机 (least squares support veotormaohine,LS-SVM)[14,30]、偏最小二乘回归(partial least squares regression,PLSR)[9,16-17,19,25,27,31]、人工神经网络(artificial neural network,ANN)[6,20]、反向传播人工神经网络 (backpropagation artificial neural network,BP-ANN)[22]、 反 向 传 播 神 经 网 络(backpropagation neural network,BPNN)[26,32]、线性判别分析(linear discriminant analysis,LDA)[28]建立分类模型或预测模型。

2 HSI 技术在肉类有毒有害物质无损检测中的应用

2.1 微生物

肉类的腐败变质进程与贮藏环境内微生物含量密切相关,微生物从肉类中汲取生长所需营养成分,且其降解产物会降低肉类的食用品质,故实现微生物无损检测对维护肉类安全至关重要。 肉类组成成分的化学变化与贮藏期间的微生物代谢密切相关,HSI 技术可将光谱的变化情况与实际细菌负荷进行关联, 实现无损预测肉类细菌总数[9]。BARBIN 等[31]采用HSI 技术(900~1 700 nm)研究了不同冷藏温度下猪肉腐败过程中细菌总数和嗜冷菌总数, 通过加权系数法筛选特征波长建立PLSR模型。 结果表明,模型的R2p均高达0.81,RMSEP 分别是1.0、1.5,并获得了猪肉腐败过程细菌总数和嗜冷菌总数的可视化分布图。基于相同波段,FENG 等[9]采用HSI 技术研究了鸡肉腐败期间细菌总数及可视化分布, 将反射率图像转化为Kubelka-Munk 单位的超立方,经逐步回归法筛选7 个特征波长建立PLSR 模型,其R2cv和RMSECV 分别为0.883 6、0.50 lg(CFU/g)。 HUANG 等[22]开发了一种基于光漫反射的HSI 技术(450~900 nm)来预测冷藏期间猪肉的细菌总数,利用PCA 算法从126 个融合特征中提取主成分建立BP-ANN 预测模型, 其R2p和RMSEP分别是0.830 8、0.243 lg(CFU/g),效果优于基于单一特征建立的预测模型。 近年来,相关学者持续深入研究,HSI 技术也在牛肉[32]、羊肉[33-36]、鱼肉[37-38]、香肠[39-40]、腊肉[41]等微生物污染检测及可视化方面取得了累累硕果。

2.2 生物胺

生物胺与肉类腐败程度有关,主要来源于微生物生长和代谢产物,包括精胺、亚精胺、腐胺、尸碱、酪胺和组胺等[42],广泛存在于生鲜肉、熟肉制品[43],与肉类安全程度息息相关。 新鲜肉腐败期间,其主要化学成分发生降解,光谱反射率下降,致使新鲜肉和腐败肉光谱存在显著差异性[15]。基于这一特性,CHENG 等[15]将HSI 数据与猪肉腐胺、尸胺、酪胺及组胺总含量进行关联, 建立SPA-MLR、RC-MLR、SPA-MLR、RC-MLR 4 类预测模型, 比较后发现RC-MLR 模型是定量预测猪肉生物胺指数并实现其可视化分布的最佳模型,R2p和RMSEP 分别是0.957 和4.866 mg/kg。YANG 等[14]采用PCA 和SR 算法分别处理400~1 000 nm 及1 000~1 800 nm 两波段HSI 数据,建立LS-SVM 模型预测牛肉贮藏过程生物胺含量, 发现基于400~1 000 nm 波段的SRLS-SVM 模型取得了最佳的预测效果, 其R2p和RMSEP 分别为0.943 和1.026, 在此基础上融合2种算法建立SR-PC-LS-SVM 模型, 模型的预测能力提高至0.969。 上述文献表明,波长范围的选择关系到模型最终预测效果,HSI 技术有望用于评估肉类贮藏期间生物胺含量。

2.3 亚硝酸盐

肉制品中亚硝酸盐的规范使用可以增加肉的风味和防止腐败,违规使用则会对人类身体健康造成严重威胁[44]。 HSI 系统中光谱吸收峰的高度与肉类中亚硝酸盐含量成正相关,故可通过建立数学模型将HSI 数据与国标实测亚硝酸盐含量进行关联可实现肉类亚硝酸盐含量的无损检测。 杨昆程等[19]基于HSI 系统(900~1 700 nm)探讨了腊肉贮藏期间亚硝酸盐含量的快速预测方法,发现联合一阶导数和矢量归一化处理原光谱建立的PLSR 模型具有较好的预测效果,R2cv和RMSECV 分别是0.972 和0.251。 陈晓东等[20]利用HSI 技术(400~1 000 nm)对香肠贮藏期间的亚硝酸盐含量进行预测,先后建立了PLSR 模型及GA-ANN 模型, 其中GA-ANN 模型的R2cv和RMSECV 分别是0.918 和0.365。 在此研究基础上,刘峥等[16]分别使用特征波长和全光谱建立PCA 模型及PLSR 模型预测香肠贮藏期间的亚硝酸盐含量,对比后发现基于全光谱建模的预测效果更好,其中PLSR 模型的R2cv和RMSECV 分别是0.982 9 和0.059 2,提升了预测模型的准确度。以上研究初步证明,HSI 技术在检测肉制品亚硝酸盐含量方面是可行的,然而鲜有文献获得肉制品亚硝酸盐含量的可视化分布图像。

HSI 技术在肉类有毒有害物质无损检测的应用如表1 所示。

表1 HSI 技术在肉类有毒有害物质无损检测方面的应用Table 1 Application of HSI technology in nondestructive testing of toxic and hazardous substances in meat

3 HSI 技术在肉类掺假无损检测中的应用

3.1 掺假肉

掺假肉与肉类原本品质不同,极易导致严重的安全、经济以及宗教问题[45]。当电磁辐射与肉类发生相互作用时,肉类的不同成分在特定波段具有典型的反射特征,致使种类不同的异种肉或新鲜度不同的同种肉光谱反射率差异明显[46],基于这一特性可将HSI 技术用于杂肉掺假检测和同源肉掺假检测。过去主要利用HSI 技术检测杂肉掺假,包括猪肉掺假羊肉[47]、鸡肉掺假牛肉[48]、马蹄掺假牛肉[46]、猪肉掺假牛肉[49]等。 近年来,杨清华等[25]基于HSI 技术(400~1 000 nm)对掺加猪肉的牛肉进行检测,该法利用阈值提取光谱和光谱-理化值共生距离法分割图像建立PLSR 模型评估牛肉掺加猪肉情况,其R2p和RMSEP 分别是0.951 5、0.032 9。 ZHENG 等[17]基于HSI 系统(400~1 000 nm)建立了鸭肉掺假羊肉的PLSR 预测模型并实现了掺假肉分布的可视化,模型的R2p和RMSEP 分别是0.995 0、2.51, 再次拓宽了HSI 技术的肉类掺假检测范围。 基于HSI 技术的同源肉掺假检测也初见起色,ZHAO 等[30]采用相同波段对掺加变质牛肉的鲜牛肉糜进行检测,由IWO 提取7 个特征波长建立LS-SVM 模型, 其R2p和RMSEP 分别是0.95%、5.67%, 并获得了牛肉掺假的可视化分布图像。以上研究充分证明,HSI 技术是检测肉品掺假的有利工具,未来需要继续研究利用HSI 技术鉴别杂肉掺假、同源肉掺假,构建既精准又稳定的预测模型,同时开发用于实时检测肉类掺假的便携式手持设备。

3.2 注水肉

注水肉对肉类营养价值、嫩度、色泽、风味等均有一定程度的影响,降低了肉类的食用品质[50]。 此外,还有部分不法商贩使用不合格水源,极易导致病原微生物污染肉类, 加速肉类的腐败变质进程。因此,实现注水肉的无损检测对维护肉类安全至关重要。 由于正常肉和注水肉的含水率不同,注水肉的光谱反射率显著高于正常肉,将HSI 数据的差异与肉类含水率的不同进行关联可区分正常肉和注水肉。 於海明等[26]采用HSI 技术(358~1 021 nm)对正常猪肉和注水猪肉进行区分,该法通过回归系数权重法筛选与含水率相关的特征波长,再经傅里叶变换获取频谱特征参数,根据全波长、特征波长以及频谱特征参数建立BPNN 分类模型区分正常猪肉和注水猪肉,结果显示,基于频谱特征构建的模型分类正确率高达98.8%, 可用于注水猪肉的快速识别。 未来相关学者应把握该契机联合HSI 技术和化学计量学方法深入研究猪肉以及其他品种肉类注水肉的检测方法,同时,利用注胶肉和正常肉的光谱差异研究注胶肉的检测方法。

3.3 冻融肉

市场中冻融肉和非冻融肉的混淆容易引发肉类掺假行为。 其中,肉类在冻融过程脂类氧化产物、冰晶、 甲醛等存在会对光谱的反射率产生影响;肉类在解冻过程中营养成分大量流失,理化指标和微生物指标的改变也会影响光谱的反射率。 新鲜肉的光谱反射率明显高于冻融肉,将肉类冻融过程发生的变化与HSI 数据进行关联可用于区分冻融肉和非冻融肉。 过去HSI 技术已被报道可用于区分猪肉[51-52]、鱼肉[53]、虾[54-55]等品种新鲜肉和解冻肉。 近年来,HSI 技术也被报道可用于鉴别新鲜牛肉与冻融牛肉、成熟牛肉与成熟冻融牛肉等,何加伟等[27]利用HSI 技术(950~1 500 nm)建立PLSR 分类模型对包含新鲜牛肉与冻融牛肉的45 个样品进行分类,其判别正确率高达94.4%。CRICHTON S 等[18]基于HSI系统(500~1 010 nm)对新鲜牛肉和新鲜冻融牛肉、成熟牛肉和成熟冻融牛肉、新鲜牛肉和成熟牛肉等分类方法进行研究, 发现在全波长下建立的SVM分类模型精确度最高, 其分类正确率分别高达100%、98%、100%, 该研究指出下一步可选择400~500 nm 波段研究冻融牛肉分类方法。综上所述,HSI技术和分类算法相结合在冻融肉类检测具有极大潜力。HSI 技术在肉类掺假无损检测的应用如表2 所示。

表2 HSI 技术在肉类掺假无损检测方面的应用Table 2 Application of HSI technology in non-destructive testing of meat adulteration

4 HSI 技术在肉类分选分级无损检测的应用

对生鲜肉和加工肉进行分选分级不仅是评价其品质的重要方面, 也是保证食品安全的重要举措。HSI 技术包含的光谱信息可提供肉类的水分、脂肪、蛋白质等化学特征,图像信息可提供肉类的大小、形状、颜色、纹理等物理及几何特征,将HSI 数据与肉类的颜色、持水力、质地等内外特征进行关联可实现生鲜肉和加工肉的分选分级。 在早期的研究中,HSI 技术已被用于生鲜肉品质分选分级,如QIAO 等[6]基于HSI 技术(430~1 000 nm)探讨了猪肉品质的分类方法,该法利用主成分分析和聚类分析评估不同组别的猪肉质量, 建立ANN 模型对猪肉质量等级进行分类。 结果显示,该法成功将猪肉品质分为RFN、RSE 两类,总校正率为75%~80%。LIU等[28]采用基于Gabor 滤波的HSI 技术(400~1 000 nm)对猪肉品质进行分类,建立LDA 分类模型将猪肉分为RFN、PFN、PSE、RSE 4 类, 平均分类精度高达(84±1)%,研究指出后期可结合特征波长和调谐Gabor 滤波器实现对猪肉品质实时分类。 邢素霞等[23]基于HSI 技术提取6 个鸡胸肉光谱、5 个纹理及12 个颜色特征建立K-means-RBF 模型将鸡胸肉品质按可食性分为4 类, 分类准确率高达100%。

目前,HSI 技术也初步应用于加工肉分选分级,如龚爱平等[29]基于HSI 系统(874~1730 nm)对腊肠品质进行分级, 采用SPA 提取10 个特征波长构建SPA-MLR 腊肉品质分类模型, 判别准确率高达100%。 陈晓东等[21]采用HSI 技术(400~1 000 nm)建立SVM 分类模型将香肠分为可食用及不可食用两类,分类准确率为82.3%。 基于同一波段,董小栋等[24]开发了一种深入融合光谱信息的肉品分类及检索方法, 该法融合光谱特征和图像特征建立SVM分类模型, 将腊肉分为新鲜腊肉和腐败腊肉两类,分类准确率高达99.2%。 上述文献表明,HSI 技术在肉类分选分级无损检测中具有极大潜力,多源数据融合有助于提高模型的精确性。

HSI 技术在肉类分选分级无损检测的应用如表3 所示。

表3 HSI 技术在肉类分选分级无损检测方面的应用Table 3 Application of HSI technology in nondestructive testing of meat sorting and grading

5 HSI 技术应用过程中存在的问题

与此同时,HSI 技术在发展过程中尚存一些不足亟须解决和突破:一是系统成本高,初期投入较大,具有高空间分辨率和光谱分辨率的系统成本更高,限制了普通中小企业的使用,故后期降低成本是发展的必要条件;二是高光谱超立方体结构不仅包含与变量参数相关的有用信息还包含大量冗余和无关信息如噪声等,故需要高效程序工具来处理数据以及显示图像;三是图像采集时间的限制和图像前后处理程序的限制,故需要开发更精确的硬件系统和先进的数据处理算法;四是光谱采集受采集参数及环境条件的影响,故应通过偏差校正确定最佳的匹配参数;五是大部分学者侧重于研究光谱信息, 忽视了空间信息如纹理特征和结构特征等,同时人为干预、方法不当等原因导致了图像特征的提取效果不佳,构建的模型泛化能力较差,故如何提取空间特征也是急需解决的问题, 关系到实现HSI“图谱合一”; 六是提取关键波长的算法尚不完善,部分文献报道全光谱下建模效果优于特征波长下的,故应尝试更多特征波长的提取方法,确定与检测参数相关性的特征波长;七是系统只能获取表面的成分信息, 因为样品和波段限制了光的穿透深度;八是系统更适用于分析异质样品,因为成像功能在于实现不均匀分布空间的可视化[13]。

6 展 望

HSI 作为一种高效、无损、环保、非破坏的检测技术,在肉类有毒有害物质检测、肉类掺假检测、肉类分选分级等方面均展现了巨大的发展潜力,为食品工业在线实时检测肉类安全提供了一种有效替代方法。综上所述,HSI 技术的后续发展可从以下几方面入手:一是着重研究注水肉检测、注胶肉检测、非法添加物质检测、缺陷肉检测以及其他有害菌检测,全方面发展HSI 技术在肉类品质预测与分类方面的潜力;二是增加研究波段并开发多种提取特征波长的算法,基于选定波长建立一系列多光谱成像系统用于食品工业的在线实时检测;三是开发更多的建模方法,考虑空间信息和光谱信息之间的相关影响建立肉类品质预测或分类模型;四是基于快照HSI 系统研发手持在线检测设备用于食品工业的在线实时检测;五是开发获取光谱特征和空间特征的深度学习算法以及改进计算机硬件及软件的实用性。展望未来,HSI 技术极有可能取代传统检测方法成为肉类加工监测和食品安全与质量控制的一种常规方法。

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