冠心病患者血清固醇调节元件结合蛋白-1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1及纤维蛋白原水平变化的意义分析

杨永强，陈志军

冠心病是由冠状动脉动脉粥样硬化引起的心脏病，导致血管狭窄或阻塞、心肌缺血、缺氧或坏死[1]。世界卫生组织将冠心病分为5类：无症状心肌缺血、心肌梗塞、心绞痛、缺血性心力衰竭和猝死[2]。冠心病的病因常与高血压、总胆固醇(TC)或低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、肥胖、吸烟、酗酒、超重、糖尿病、缺乏体育活动、饮食不良和心理社会因素有关[3-4]。胆红素是一种抗氧化剂，可以破坏脂质，进一步降低内源性抗氧化酶的活性，保护心血管细胞，研究表明，低水平的胆红素和高水平的尿酸(UA)也会引起牙冠。心脏病的危险因素。纤维蛋白可以增加内皮素的分泌，抑制一氧化氮的合成，引起冠状动脉痉挛，加速动脉粥样硬化的形成。

核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1(NLRP1)炎性小体由NLRP1、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白水解酶-1(caspase-1)和凋亡相关斑样蛋白组成。活化的caspase-1可诱导白细胞介素(IL)-1β、IL-18成熟，并参与多种炎症疾病的病理过程。本研究旨在探讨冠心病患者血清固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)、NLRP1、血清人纤维蛋白原(FIB)水平变化意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年6月至2018年12月于珠海医院就诊的112例冠心病患者为观察组，男60例，女52例，年龄(55.7±8.4)岁，范围45～65岁；同时选取医院112例健康体检者为对照组，男58例，女54例，年龄(54.9±8.1)岁，范围45～65岁，2组差异无统计学意义(P>0.05)。冠心病诊断标准：(1)典型心绞痛或心肌梗死；(2)心电图显示静息时心肌缺血，或心电图负荷试验阳性；(3)45岁以上的患者。纳入标准：(1)符合上述冠心病诊断标准；(2)患者及其家人签署了知情同意书，并愿意与研究合作。排除标准：(1)痛风、糖尿病、血液系统疾病患者；(2)肝功能不全患者；(3)恶性肿瘤患者；(4)肾功能不全患者。

1.2 方法 (1)血脂、胆红素、血尿酸测定方法：抽取早晨空腹肘静脉血3 ml，3 000 r/min(离心半径r=10 cm)速度离心10 min，取血清于-20 ℃放置保存待用。用日立7180自动生化分析仪测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、总胆红素(TBIL)和UA。(2)FIB、内皮素-1(ET-1)、血栓素2(TXB2)测定方法：抽取早晨空腹肘静脉血3 ml，3 000 r/min(离心半径r=10 cm)速度离心10 min左右，取血清于-20 ℃放置保存待用。用日立7180全自动生化分析仪测定FIB、ET-1、TXB2。(3)IL-1β、IL-18表达和高敏C反应蛋白(hs-CRP)检测方法：早晨使用 25 IU/ml 肝素抗凝管，空腹肘静脉血10 ml，分离血浆于-20 ℃放置保存待用，采用密度梯度法分离PBMCs，将其分为2个无菌干离心管进行RNA和蛋白质的提取。采用酶联免疫吸附法检测血浆IL-1β、IL-18和hs-CRP。(4)SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白检测方法：早晨使用25 IU/ml肝素抗凝管，空腹肘静脉血10 ml，分离血浆于-20 ℃放置保存待用，采用密度梯度法分离PBMCs，将其分为2个无菌干离心管进行RNA和蛋白质的提取。采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹分析检测SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白。

1.3 观察指标 (1)观察2组患者的血清TC、LDL-C、TG、UA水平。(2)观察2组患者的HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平。(3)观察2组患者的FIB、ET-1、TXB2水平。(4)观察2组患者的血浆IL-1β、IL-18表达和hs-CRP水平。(5)观察SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA和蛋白表达水平。

1.4 统计学处理 用SPSS 13.0统计软件对冠心病患者的数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差(x±s)表示，采用t检验。计数资料用率表示，采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清TC、TG、LDL-C、UA水平 观察组患者的TC、TG、LDL-C、UA水平显著高于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 观察组和对照组患者的TC、TG、LDL-C、UA水平比较(x±s)

注：与对照组比较aP<0.05。TC为总胆固醇，TG为三酰甘油，LDL-C为低密度脂蛋白胆固醇，UA为尿酸

2.2 HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平 观察组患者的HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平均低于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 观察组和对照组患者的HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平比较(x±s)

注：与对照组比较aP<0.05。HDL-C高密度脂蛋白胆固醇，DBIL为直接胆红素，IBIL为间接胆红素，TBIL为总胆固醇

2.3 FIB、ET-1、TXB2水平 观察组患者的血清FIB、ET-1、TXB2水平均高于对照组(P<0.05)，见表3。

表3 观察组和对照组患者的FIB、ET-1、TXB2水平比较(x±s)

注：与对照组比较aP<0.05。FIB为纤维蛋白原，ET-1为内皮素-1，TXB2为血栓素2

2.4 IL-1β、IL-18表达和hs-CRP水平 观察组患者的血浆 IL-1β、IL-18 表达和 hs-CRP 水平高于对照组(P<0.05)，见表4。

表4 观察组和对照组患者的血浆IL-1β、IL-18表达和hs-CRP水平比较(x±s)

注：与对照组比较aP<0.05。IL为白细胞介素，hs-CRP为高敏C反应蛋白

2.5 SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA和蛋白表达水平观察组患者的SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05)，见表5。

表5 观察组和对照组患者的SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白表达水平比较

注：与对照组比较aP<0.05；NLRP1为核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1，SREBP-1为固醇调节元件结合蛋白-1，caspase-1为半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1

3 讨论

冠心病的主要原因是冠状动脉粥样硬化。冠状动脉动脉粥样硬化与脂质代谢紊乱、炎症激活和内皮功能障碍有关。其发病机制极为复杂。在正常人体内，胆红素可以促进胆固醇的代谢，保护低密度脂蛋白免受氧化，是体内不可缺少的物质。如果身体的胆红素水平低，容易发生冠心病，因为胆红素水平的降低会减少胆固醇的分解，增加血脂，从而增加冠心病的风险。因此，胆红素水平的降低可能导致冠心病。最近的研究表明，随着脂质代谢和糖代谢紊乱，UA水平的升高会对细胞造成巨大的损害，损害冠状动脉壁，并导致冠状动脉动脉粥样硬化的形成。而本次研究也表明观察组患者的HDL-C、DBIL、IBIL、TBIL水平均低于对照组(P<0.05)，这说明血脂水平发生异常与冠心病的发生具有一定关系。

部分患者长期存在高血糖，导致心肌血管内皮缺氧和内皮损伤。血管内皮损伤后，多种细胞因子被释放，如内皮素ET-1、TXB2具有血管收缩作用，TXB2也具有较强的血小板聚集作用，同时伴有高脂血症，加速动脉硬化的发生。纤维蛋白原是由肝脏合成的凝块蛋白具有促进血小板聚集，增加血液粘度和外周阻力的作用。趋化单核/巨噬细胞在内膜下迁移，以促进红细胞粘附和血栓形成，且纤维蛋白水平越高，风险越大。本次研究结果表明，观察组患者的血清FIB、ET-1、TXB2水平均高于对照组(P<0.05)，说明冠心病的发生与高FIB有关。

在冠状动脉粥样硬化早期，单核细胞受血管内皮细胞调节，分化为巨噬细胞。巨噬细胞可以吞下氧化后的低密度脂蛋白胆固醇，形成泡沫细胞，进而促进冠状动脉粥样硬化的发展。本次研究结果表明，观察组患者的血浆IL-1β、IL-18表达和hs-CRP水平高于对照组(P<0.05)进一步证实了IL-1β和IL-18参与冠心病的发展过程。

在本研究中，冠心病患者的NLRP1炎性体表达增加并且与体内IL-1β和IL-18水平一致，说明NLRP1炎性参与了冠心病患者体内炎症水平的变化。SREBP-1主要调控脂肪酸和糖代谢，并且参与调节肿瘤、脂肪变性和巨噬细胞介导的天然免疫反应。研究结果表明，观察组患者的SREBP-1、NLRP1和caspase-1的RNA蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05)，说明冠心病患者SREBP-1与NLRP1炎性体表达升高。

综上所述，冠心病的发病机制非常复杂，脂质代谢和炎症是其发展的重要原因。研究结果也表明，FIB、SREBP-1与NLRP1炎性体表达升高与冠心病的发病有关。为以SREBP-1和NLRP1炎性体为靶点防治冠心病等炎症性疾病提供新的临床方向。