冠心病患者脂蛋白相关磷脂酶A2水平变化及临床意义

袁丽萍，林卫，卢新兆，黄晓华

福建医科大学附属龙岩第一医院检验科,福建龙岩 364000

随着经济水平的迅速发展，人们生活水平不断提高，受不合理生活方式的影响，冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）的发病率及病死率均在逐年上升，据推算我国冠心病现患病人数为1 100万[1]。冠心病通常是由多种危险因素共同或相互作用下发病。传统危险因素包括家族史、年龄、性别（尤其是男性及绝经女性）、高血压、高血糖、肥胖、高血脂等。非传统危险因素包括血尿酸、同型半胱氨酸、胆红素、脂蛋白a、高密度脂蛋白胆固醇酯、血小板平均体积、血浆纤维蛋白、尿微量白蛋白、幽门螺旋杆菌、非对称性二甲基精氨酸、脂联素、脂蛋白相关磷脂酶A2（lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2） 等[2]。动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是冠心病的发病基础，AS 发病机制复杂，其中炎症机制是相对新的一种学说，炎症反应贯穿AS发病的各个阶段，可能是多种致AS因素致病机制的共同环节或通路。Lp-PLA2是新型血清炎性标志物，其处于脂质代谢和炎症反应的交叉点，被认为在AS的发生和发展中扮演重要角色[3]。该研究方便收集2019年9—11月因拟诊冠心病在该院住院并行冠状动脉造影（CAG）的173例患者资料进行分析，旨在观察冠心病患者血Lp-PLA2水平的变化，探讨Lp-PLA2对冠心病的诊断价值，同时检测血尿酸（UA）水平，比较不同冠脉病变患者之间Lp-PLA2、UA的差异。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取的173例患者根据CAG检查结果，参考美国心脏协会冠心病的诊断标准，分为冠心病组和对照组。冠心病组患者主要冠状动脉至少有1支狭窄≥50%，对照组患者CAG检查结果未达到上述标准。冠心病组121例，其中男80例、女41例；年龄 34～87岁，平均年龄（65.67±10.88）岁；其中单支病变51例。对照组52例，其中男34例、女18例；年龄44～82岁，平均年龄（62.54±11.59）岁。所有患者均在 CAG前测定 Lp-PLA2、UA等相关指标。以上入选人员均知情该次研究且签署知情同意书，并经过医院伦理委员会批准。

排除标准：严重肝肾功能不全者；明显脑血管或周围血管病变者；癌症患者；血糖不易控制的糖尿病者；合并痛风者；确诊为风湿性疾病患者；口服可导致高尿酸的药物者。

1.2 标本处理

分离血清后标本保存于2～8℃冰箱中待测Lp-PLA2。采用脂蛋白相关磷脂酶A2检测试剂盒(免疫层析法)测定Lp-PLA2水平，试剂盒检测灵敏度为5 ng/mL。按照试剂盒内说明书操作步骤进行操作。操作步骤：取出样本恢复至室温，混合均匀后使用；取出试剂卡，吸取血清5 μL，加入到稀释液中，混匀后加稀释液70 μL，样本垂直滴加至加样孔中；将卡壳加入卡槽中，置于免疫定盘分析仪内，进行孵育检测；仪器自动在5 min时读取定量结果。检测仪器为免疫定量分析仪ZYBio-Q7。

1.3 统计方法

所有数据应用SPSS 19.0统计学软件进行统计分析。计量资料以（）表示，组间差异比较以t检验，计数资料以频数及百分比表示，组间差异比较以χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Lp-PLA2和UA水平

冠心病组Lp-PLA2水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.001），冠心病组UA水平高于对照组，差异无统计学意义（P＞0.05）。 见表 1。

表1 两组患者的Lp-PLA2、UA水平比较()

表1 两组患者的Lp-PLA2、UA水平比较()

组别Lp-PLA2（ng/mL） UA（μmol/L）冠心病组(n=121)对照组(n=52)t值 P值271.09±60.27 190.55±37.03 10.726＜0.001 393.26±98.37 376.02±66.90 1.338 0.183

2.2 Lp-PLA2、UA与不同冠脉病变的关系

不同冠脉病变的Lp-PLA2水平，双支冠脉病变高于单支冠脉病变，差异有统计学意义（P＜0.001），三支冠脉病变高于单支冠脉病变，差异有统计学意义 （P＜0.001），三支冠脉病变与双支冠脉病变之间差异无统计学意义（P＞0.05）。3组间UA水平两两比较差异无统计学意义（P＞0.05）。 见表 2。

表2 冠心病组冠脉病变支数与Lp-PLA2、UA水平比较()

表2 冠心病组冠脉病变支数与Lp-PLA2、UA水平比较()

注：*表示与单支冠脉病变相比，P＜0.001

项目Lp-PLA2（ng/mL） UA（μmol/L）单支冠脉病变(n=51)双支冠脉病变(n=38)三支冠脉病变(n=32)236.37±52.64（287.94±46.26）*（306.43±58.47）*388.59±112.71 394.95±79.19 398.69±97.01

2.3 冠心病患者Lp-PLA2水平和UA水平的ROC曲线分析

Lp-PLA2诊断冠心病的ROC曲线下面积为0.868（95%置信区间为 0.814~0.922，P＜0.001），以 252.27 ng/mL为最佳截断值，敏感性、特异性分别为0.702、0.942。UA水平的曲线下面积0.570，差异无统计学意义（P＞0.05）。见图1。

图1 冠心病患者Lp-PLA2、UA水平ROC曲线

3 讨论

目前关于炎症相关的生物标志物，如C-反应蛋白、纤维蛋白原、D-二聚体、CD40、髓过氧化物酶、生长分化因子-15、Lp-PLA2等，反映了冠心病的不同病理生理通路。Lp-PLA2是磷脂酶A2超家族成员之一，约70%的Lp-PLA2通过载脂蛋白B与LDL结合，随LDL运转到血管壁上易损区域，LDL被氧化为氧化型LDL，Lp-PLA2将氧化型LDL水解为溶血卵磷脂和氧化型游离脂肪酸，后二者通过上调粘附分子的表达，激活白细胞并将巨噬细胞和单核细胞募集到AS斑块中，而AS斑块中的上述炎症细胞随后产生更多的Lp-PLA2，加快AS进程。

通过检测Lp-PLA2可反映粥样斑块的不稳定性，进而反映冠心病的严重程度[4]。Li等[5]对Lp-PLA2与冠心病相关性的Meta分析表明，Lp-PLA2的活性与冠心病风险有显著关联。该研究显示，冠心病患者Lp-PLA2水平明显超出对照组，双支、三支冠脉病变Lp-PLA2水平高于单支病变。郭武辉等[6]根据多层螺旋CT血管造影检查的主要冠状动脉狭窄程度分组，结果显示中度狭窄组 （狭窄程度≤75%）、重度狭窄组 （狭窄程度＞75%）血清Lp-PLA2水平均高于轻度狭窄组 （狭窄程度＜50%）。但也有研究认为Lp-PLA2与冠心病患者的病死率和心血管事件无显著相关性[7]。LP-PLA2与动脉斑块稳定性、冠状动脉狭窄程度和冠心病预后的相关性尚需大样本、多中心和随机试验来证实。该研究VA水平在冠心病3组间差异无统计学意义（P＞0.05），提示UA水平不能用于反映冠以病的严重程度。

反映Lp-PLA2水平可通过测定血清或血浆Lp-PLA2质量和活性两种方式，常用方法有免疫层析法、胶体金法、酶联免疫法、免疫荧光层析法、化学发光免疫分析法、胶乳免疫比浊法等，测定活性可采用连续监测法、速率法。近年多个研究称Lp-PLA2活性检测优于质量检测[8]。宋冬林等[9]用ELISA法检测Lp-PLA2，显示采用174.12 ng/mL为最佳截断值，诊断冠心病的敏感性、特异度分别为0.934、0.928。该组采用免疫层析法，以252.27 ng/mL为最佳截断值，敏感性、特异性分别为0.702、0.942。该组检测方法需采用专用仪器，若能使用可用于自动生化分析仪的试剂，则更有利于临床推广。

Lp-PLA2受生理变异很小，基本不受体位改变和日常活动的影响，故标本采集时无需固定体位和时间，无需空腹，但测定前2 h应避免剧烈运动。当前Lp-PLA2检测方法较多，不同试剂Lp-PLA2水平的范围跨度较大，各个实验室需要确定自己的最佳截断值。Lp-PLA2水平受种族影响，研究发现[10]Lp-PLA2水平在维吾尔族中最高，汉族中最低。更需要注意的是Lp-PLA2水平受性别、年龄的影响。研究发现[11-12]男性健康成年人的血清Lp-PLA2活性高于女性，男性各年龄段间差异无统计学意义（P＞0.05），而女性＞40岁组则高于＜40岁组[11]。但性别差异是由于性别本身（如性激素水平）所致，还是由于受到其他因素在男女两性中分布特征不同的影响尚无定论。有研究显示[13]在无激素替代治疗的绝经后女性高血压患者，性激素结合球蛋白与Lp-PLA2呈负相关。

综上所述，高水平的Lp-PLA2患者应当警惕冠心病的可能，Lp-PLA2水平可用于评价冠脉病变的严重程度。