肝素结合蛋白在感染性肺炎诊断中的价值分析*

唐小娟，侯思远，刘美，冯星火，赵鸿梅

(1.辽宁省人民医院暨中国医科大学人民医院a. 检验医学科，b.重症医学科，沈阳110016; 2.吉林省肿瘤医院输血科，长春 130012)

细菌性肺炎是继发于细菌感染的下呼吸道和肺实质的获得性炎症[1]，是临床上一种常见的呼吸道系统疾病，具有相当高的发病和死亡率。目前实验室检测的常用感染指标如降钙素原(procalcitonin，PCT)、白细胞(white blood cell，WBC)计数、C反应蛋白(C reactive protein，CRP)及白细胞介素6(interleukin-6，IL-6)的影响因素较多，诊断感染性疾病的敏感性及特异性欠理想。因此，有关感染性疾病诊断标志物的研究一直是医学研究热点。

肝素结合蛋白(heparin-binding protein，HBP)由活化的中性粒细胞释放，是唯一存在于中性粒细胞颗粒中的可分泌蛋白质。HBP具有广泛的抗微生物活性，由细菌感染激活的中性粒细胞释放，可通过影响血管内皮细胞通透性诱导血管发生渗漏和水肿形成，具有促炎作用。血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)主要在肝脏中产生，在健康人中有少量存在，创伤、感染、急慢性炎症时SAA表达水平会升高[2]。本研究通过细菌性肺炎及非细菌性肺炎患者血液HBP、SAA、PCT及WBC水平，评估各指标在感染性肺炎中的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1研究对象 选取2017年3月至12月在辽宁省人民医院住院的细菌性肺炎患者51例，男29例，女22例，年龄(63.92±15.62)岁，符合任一标准：(1)痰标本细菌培养阳性；(2)影像学诊断为炎症；非细菌性肺炎患者44例，男20例，女24例，年龄(59.09±10.82)岁，其中28例肺炎支原体(MP)感染，16例肺炎衣原体(CP)感染，所有非细菌性肺炎患者痰细菌培养阴性，经MP/CP IgM抗体检测为阳性，急性期或恢复期检测MP/CP IgG抗体滴度升高4倍以上；同期体检健康者51名作为对照组，男27例，女24例，年龄(51.78±9.72)岁，门诊体检血常规、尿常规、肝肾功能及肺CT检查正常且排除近期感染。各组患者间年龄、性别差异无统计学意义。清晨空腹采集枸橼酸钠抗凝血、无抗凝剂血、EDTA抗凝血各1管，EDTA抗凝血混匀后直接用于血常规WBC的检测；将枸橼酸钠(1∶9)抗凝血与无抗凝剂血1 610×g离心5 min分离血浆/血清并分装做好标记后放入-70 ℃冰箱储存，以待检测HBP、SAA及PCT。本试验研究已通过辽宁省人民医院伦理委员会批准(伦理批件号：HS004)。

1.2仪器与试剂 cobas e702全自动生化分析仪(Roche公司)，血浆HBP试剂盒(杭州中翰盛泰医疗器械有限公司)；AFS-1000干式荧光免疫分析仪及其配套血清SAA检测试剂(广州蓝勃生物科技有限公司)；cobas e601电化学发光分析仪及配套PCT检测试剂(Roche公司)；XN2000血细胞分析仪及其配套试剂(Sysmex公司)。

1.3方法 在cobas e702全自动生化分析仪上用免疫比浊法检测血浆HBP，在AFS-1000干式荧光免疫分析仪用免疫比浊法检测血清SAA，在cobas e601电化学发光分析仪上用免疫荧光层析法检测血清PCT水平，WBC计数采用XN2000血细胞分析仪及其配套试剂检测，所有标本检测过程均严格按照厂家提供的试剂说明书及相应SOP文件进行。

2 结果

2.1各组患者血液中HBP、SAA、PCT及WBC检测结果的比较 细菌性肺炎组HBP、SAA与非细菌性肺炎组比较，差异有统计学意义(Z=-6.90和Z=-4.16，P<0.05)，而PCT及WBC计数水平与非细菌性肺炎组比较，差异无统计学意义(F=0.53,t=1.27，P>0.05)。非细菌肺炎组SAA、PCT及WBC水平与健康人对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，HBP水平与健康人对照组比较差异无统计学意义(t=0.23，P=0.07)。见表1。

表1 各组HBP、SAA、PCT及WBC水平的比较

注：a，与非细菌性肺炎组比较，P<0.05；b，与健康人对照组比较，P<0.05。

2.2HBP与SAA诊断细菌性肺炎感染的效能评价 根据细菌性肺炎组与对照组(包括健康人对照组和非细菌性肺炎组)HBP、SAA、PCT及WBC水平绘制ROC曲线，见图1。HBP的ROC曲线下面积(AUC)为0.917，以19.50 ng/mL作为HBP最佳截断值时敏感性为80.4%，特异性为88.4%；血清SAA的AUC为0.834，以18.84 mg/L作为SAA最佳截断值时敏感性为78.4%，特异性为81.1%。HBP与SAA联合检测诊断细菌性肺炎时敏感性和特异性分别为90.2%和80.0%，可以提高对细菌性肺炎诊断的敏感性。见表2。

图1 各指标诊断细菌性肺炎的ROC曲线

表2 各指标对细菌性肺炎诊断的性能参数

2.3HBP、SAA、PCT及WBC在鉴别诊断细菌性肺炎与非细菌性肺炎中的效能评价 在鉴别诊断细菌性肺炎与非细菌性肺炎中，HBP的AUC值为0.908(95%CI：0.849～0.967)，高于SAA、PCT及WBC的AUC值0.748(95%CI：0.644～0.853)、0.623(95%CI：0.509～0.738)和0.611(95%CI：0.495～0.726)，当HBP最佳截断值为20.50 ng/mL时，鉴别诊断细菌性肺炎和非细菌性肺炎的敏感性为78.4%，特异性为88.6%，其鉴别诊断价值高于SAA、PCT。见图2和表3。

图2 各指标鉴别细菌性与非细菌肺炎感染的ROC曲线

表3各指标在鉴别细菌性与非细菌性肺炎感染中的诊断价值

参数曲线下面积P值cut off值敏感性(%)特异性(%)HBP(ng/mL)0.9080.00020.5078.488.6SAA(mg/L)0.7480.00016.3186.354.5PCT(ng/mL)0.6230.0390.1247.168.2WBC(×109/L)0.6110.064---

3 讨论

HBP 具有显著的杀菌活性、趋化特性以及增加血管内皮细胞通透性及调节炎症反应的作用。健康人血浆中HBP含量很低，一般不超过10 ng/mL，严重脓毒症或感染性休克患者血浆HBP水平显著升高，且HBP水平升高与死亡风险增加有关[3]。此外，对呼吸道感染[4]、颅内感染[5]、尿路感染[6]等感染性疾病的研究发现HBP与感染的发生、发展密切相关。

在本研究中，细菌性肺炎组HBP水平皆显著高于非细菌性肺炎组和健康人对照组，在非细菌性肺炎组和健康人对照组间HBP水平差异无统计学意义(P>0.05)，提示HBP是较敏感的细菌性感染标志物。血清SAA水平在细菌性肺炎组、非细菌肺炎及健康对照组各组间比较，差异均有统计学意义(P<0.01)，提示SAA对炎症反应较敏感；联合检测HBP和SAA可为鉴别诊断细菌感染、支原体、衣原体感染提供有力的支持。本研究PCT及WBC在细菌性肺炎组、非细菌肺炎组的水平高于对照组，表明PCT和WBC也是辅助判断是否有感染的一个重要指标。

HBP与SAA诊断细菌性肺炎的AUC分别为0.917和0.834，分析得出识别细菌性肺炎的HBP最佳截断值为19.50 ng/mL，对应的敏感性为80.4%，特异性为88.4%；SAA的最佳截断值为18.84 mg/L时，敏感性为78.4%，特异性为81.1%，这也与陈凤华等[2]的研究结果基本一致；联合应用HBP与SAA诊断细菌性肺炎的敏感性和特异性分别为90.2%和80.0%。因此，HBP与SAA联合检测有助于快速早期诊断细菌性肺炎。吴苑等[4]研究表明HBP在鉴别呼吸道细菌感染和非细菌感染时的诊断价值较其他炎症指标较优越，对辅助各专科医生分析不同部位细菌感染有重要的诊断作用。本研究中HBP在鉴别诊断细菌性与非细菌性肺炎时的AUC为0.908，敏感性和特异性分别为78.4%和88.6%，其综合鉴别诊断价值优于SAA、PCT与WBC，这进一步支持血浆HBP可用于鉴别感染性肺炎的病原体类型。血清SAA鉴别诊断感染类型的特异性为54.5%，说明SAA是一种非特异性的感染标志物，只提示感染，是辅助诊断感染的一个敏感指标。

综上所述，血浆HBP是较理想的细菌感染标志物，与血清SAA联合检测可提高鉴别诊断细菌性肺炎的敏感性，HBP在鉴别细菌与非细菌肺炎中的诊断价值较高，所以检测HBP对确认感染类型有很大临床意义，有利于指导医生对症使用抗菌药物治疗。本研究的局限性在于不能完全排除患者在入院前已使用抗炎药物治疗，会降低病原微生物阳性检出率及对结果的检测产生影响。