浅谈粘液型铜绿假单胞菌药敏方案

陈 惠

（中国医科大学附属盛京医院大连医院，辽宁 大连 116600）

粘液型铜绿假单胞菌由于生物被膜影响，临床单依据体外敏感试验应用于临床，效果非常不理想。有研究表明，大环内酯类抗生素能有效减低生物被膜的抵抗作用，与体外敏感药物联合运用，能使敏感药物容易穿过被膜屏障接触到菌体，提高抗菌效果[1]。由此，积累两年来本实验室的实例，以及参考相关文献，从检出情况、药敏操作要点、结果分析以及敏感药物选择等方面总结如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

2017和2018年由本院送检标本培养结果中共分离出铜绿假单胞菌共计115株，其中粘液型铜绿假单胞菌34株，占29.6%，，剔除同一患者相同部位重复分离菌。

1.2 试剂与仪器

标本的培养与分纯所用哥伦比亚血平板、麦康凯平板均购于法国梅里埃公司，菌株的鉴定与药敏复合板购于德国西门子公司。

1.3 粘液型铜绿假单胞菌的分布

本院送检标本培养结果中共分离出粘液型铜绿假单胞菌来自呼吸科62例，重症监护室43例，其余科室10例；标本类型：痰液标本112例，伤口分泌物3例。患者平均年龄≥60岁，临床科室以呼吸内科、重症监护室、骨外科为主，标本类型以痰或伤口分泌物为主。

1.4 细菌鉴定和特殊方式的药敏试验

细菌鉴定与药敏试验中，配制0.5个麦氏标准菌液不能采用常规挑取菌落方法。经反复验证，我室使用无菌棉棒刮取粘性菌落配制菌悬液，将菌悬液管反复颠倒振摇，静置2小时取上清液来配制0.5麦氏单位菌悬液，效果较好。质控菌株选自大连市质控中心下发的标准菌株大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853。

2 结 果

比较起非粘液型铜绿假单胞菌，粘液型铜绿假单胞菌药敏结果似乎更乐观些，结果统计如下：亚胺培南敏感率79%，耐药率21%；美罗培南敏感率86%，耐药率14%；阿米卡星敏感率86%，耐药率14% ；左氧氟沙星敏感率71%，中介7%，耐药率22%；哌拉西林/他唑吧坦敏感率86%，耐药率14%；头孢他啶敏感率86%，耐药率14%；头孢吡肟敏感率71%，耐药率29%，也未检出多重耐药菌。

3 讨 论

铜绿假单胞菌在实验室中很常见，是重要的致病菌和院内感染菌。它的形态多样，其中有种为粘液型，它的许多特殊性给实验室和临床带来很大麻烦。比较起非粘液型铜绿假单胞菌，粘液型铜绿假单胞菌药敏结果似乎更乐观些，而实际工作中，药敏实验对临床指导意义相当不理想，这也是临床困惑。

求其原因，（1）粘液型铜绿假单胞菌能在体内产生厚厚的生物被膜，阻止抗菌药物的进入；（2）粘液型铜绿假单胞菌具有一定的粘稠性，普通方法挑取菌落时，会出现菌落无法混匀造成实际菌液浓度过低情况。用我室静置2小时后的上清液配制0.5个麦氏单位菌悬液，效果较理想；（3）药敏试验只是测定了浮游细菌对抗生素的敏感性，并不能反应生物被膜覆盖下的细菌对抗生素的敏感性。

临床标本检出粘液型铜绿假单胞菌是，很重要一点是应该与临床沟通或做相应备注，考虑其生物被膜的可能。这时，临床应联合用药，选择能破坏或抑制生物被膜的药物联合体外敏感药物，使敏感药物较容易穿透生物被膜屏障，达到抗菌目的。如，克林霉素或左氧氟沙星单独作用时，生物被膜形态及存活细菌数无改变；二者联合应用后，生物被膜结构被破坏，存活细菌数量显著减少[2]。各种侵入性的插管操作、导管等可诱发细菌生物被膜的产生。故临床医生同时应加强有菌观念和严格无菌操作的观点，有研究约90%的机械通气患者气管处有细菌定值并反复发生感染，在多糖基质的屏蔽下，某些抗菌药物（如美罗培南）即使浓度高达100倍，甚至1000倍MIC也不能杀灭生物被膜中的细菌。此外，生物被膜中细菌分泌的多糖基质还可作为抗原引起人体免疫系统损伤的疾病过程，导致某些慢性感染性疾病的反复发作[3]。