2018年贵阳地区猪伪狂犬病与猪圆环病毒2型感染情况调查

徐春志，邓珊珊，蔺俐仲，张 海，袁 林，景书灏，杨 峰，袁翠霞，陈 红，杨 源，刘 艳

（1.贵阳市动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550081；2.贵阳市清镇市农业农村局，贵州 贵阳 551400；3.贵阳市草地站，贵州 贵阳 550081；4.贵阳市息烽县农业农村局，贵州 贵阳 550300）

猪伪狂犬病（Pseudorabies,PR）是由猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒（猪除外）及脑脊髓炎为主要症状的一种急性传染病[1]。世界动物卫生组织将其列为B类传染病，我国农业农村部将其列为二类动物传染病。猪圆环病毒（Porcine circovirus,PCV）在分类学上属圆环病毒科圆环病毒属，为已知的最小的动物病毒之一，猪圆环病毒有PCV1、PCV2和PCV3 3个血清型，PCV1对猪的致病性较低，偶尔可使怀孕母猪的胎儿感染，造成母猪繁殖障碍[2]。PCV2是引起猪皮炎与肾病综合征、猪呼吸道病综合征、猪繁殖障碍等疾病的主要病原，我国农业农村部将猪圆环病毒病列为二类动物传染病。猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型均可以感染不同日龄的猪，一年四季均可发病，对妊娠母猪、仔猪等易感，成年猪常常呈隐性感染，均可引起怀孕母猪流产、死胎、产木乃伊胎等，感染仔猪的死亡率较高。这两种病在世界范围内均广泛流行，对养猪业的健康发展造成严重危害。

PRV于1947年在我国首次发现，随后便在全国范围内广泛流行。我国于20世纪90年代开始推广应用PRV gE基因缺失弱毒疫苗免疫接种，在之后的一段时间内PR的发生与流行得到了一定控制，但自2011年底以来，我国猪场包括PR疫苗免疫合格猪场陆续发生PRV变异株的感染[3]。由于PRV变异株的出现，导致目前PRV在我国各地区仍然存在不同程度的流行。PCV于1974年首次在猪肾上皮细胞系中被发现。1998年，Meehan等[4]首次将PCV分为PCV1和PCV2，随后在世界各地相继报道该病，2016年又发现了PCV3。我国于2000年在猪群中首次发现PCV2，此后PCV2在全国各地养殖场不断被报道，尤其是近几年PCV2的流行给我国养猪业造成了巨大的经济损失。对PCV2的治疗目前尚无特效治疗药物，PCV2的防控主要是采取疫苗免疫注射预防，但是由于不同地区毒株的变异较大，导致疫苗免疫效果不佳。

本试验通过采用荧光定量PCR方法对贵阳地区6个区（市/县）2018年采集的154份组织病料样本进行PRV和PCV2核酸检测，旨在了解PRV和PCV2在贵阳地区的流行情况，以期为今后贵阳市规模化猪场PRV和PCV2防控策略的制定提供参考依据，以降低伪狂犬病和圆环病毒病的发病率，提高养殖场（户）经济效益。

1 材料与方法

1.1 病料

2018年1—12月从贵阳地区不同规模化猪场无菌采集疑似病料（颌下淋巴结、肠系膜淋巴结、流产胎儿等），保存于-70℃超低温冰箱。共采集贵阳地区6个区（市/县）30个猪场154份病料。

1.2 检测试剂盒

猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型荧光PCR检测试剂盒、核酸提取试剂盒均购自北京世纪元亨生物技术有限公司。

1.3 检测方法

检测方法和结果判定严格按照PRV和PCV2荧光定量PCR检测试剂盒说明书进行。

2 检测结果

从贵阳市6个区（市/县）的30个养殖场共采集154份病料组织，采用荧光定量PCR进行PRV和PCV2核酸检测，结果见表1。检测结果显示，PRV核酸阳性病料16份，阳性率为10.39%（16/154）；PCV2核酸阳性病料29份，阳性率为18.83%（29/154）；PRV和PCV2混合感染的阳性病料8份，阳性率为5.19%（8/154）。其中PRV核酸阳性率最高的是息烽县（20.00%），其次是开阳县（13.16%）、清镇市（9.68%）、修文县（7.27%），花溪区和白云区均未检测出PRV；PCV2核酸阳性率最高的是开阳县（26.32%），其次息烽县、花溪区和白云区均为（20.00%）、清镇市（16.13%）、修文县（14.55%）；清镇市、开阳和修文县检测出PRV和PCV2混合感染的病料。

表1 疑似病料PRV和PCV2检测结果

3 讨论

本试验对贵阳地区6个区（市/县）30个规模化猪场进行了PRV和PCV2感染情况调查，结果表明：2018年贵阳市被调查的规模化猪场PRV的核酸检出率为10.39%（16/154），PCV2的核酸检出率为18.83%（29/154），PCV2的核酸检出率明显高于PRV的核酸检出率。说明PRV和PCV2仍然是危害贵阳市养猪业健康发展的动物传染病之一，且规模化猪场PCV2感染率高于PRV。

我国2011年前PRV感染率普遍在20%以下，在2011—2013年PRV的感染率呈阶梯式上升，2014—2016年PRV野毒感染率已居高不下，上海2013—2015年的感染率高达60.6%，新疆2014—2015年的感染率高达68.23%，2015年河北、河南、辽宁、山东、陕西等5省的感染率高达51.88%[5]。张文通等[6]对2012—2014年间收集的鲁北地区380份病料组织进行了病原学调查，PRV总体阳性率为20.26%，其中散养户、小型养猪场、中型养猪场和大型养猪场的PRV阳性率分别为10.50%、30.00%、15.10%和5.40%。苏琳琳等[7]2016—2017年对云南省9个地区收集的54个猪场的381份疑似病料进行PRV病原核酸检测，结果显示PRV平均阳性率为23.1%，其中母猪、保育猪和肥育猪阳性率分别为28.8%、23.4%和20.4%，公猪精液为25.0%，流产胎儿和仔猪为22.3%。任衍倍等[8]对在新疆14个地区采集的430份猪病料进行PCV2检测，检出率为4.88%。宋玉慧[9]对2014—2015年在河南省18个地区采集的146份临床疑似样本进行PCV2病原核酸检测，PCV2的核酸阳性率为28.08%。李海全等[10]于2015—2017年间在四川省7个市县地区14个猪场共采集疑似病料、精液、血样等样品181份，进行PCV2核酸检测，阳性率为49.2%。曹启明[11]于2015—2016年间在江苏部分地区共采集575份病死猪淋巴结组织进行PCV2核酸检测，检测出287份病料为PCV2阳性，阳性率为49.91%。以上数据表明，PRV和PCV2全国各地均存在很大程度的感染，部分区域的养殖场感染率达到了50%以上，且一些养殖场还存在一定程度PRV和PCV2混合感染的情况，严重影响猪场猪群健康生长。

近年来，贵阳市为发展生态畜牧业大力推行“公司+农户”的生猪养殖模式，该模式在一定程度上缓解了大型养殖场所不能避免的环保问题，使生猪养殖在环保高压态势下继续蓬勃发展，虽然养猪户有大型养殖公司专业技术人员的指导，但是由于养殖户本身专业知识欠缺，养殖技术有限，使得在养殖过程中PRV和PCV2在部分养殖户存在严重感染情况；又因猪伪狂犬病和猪圆环病毒病没有被国家列为强制免疫病种，大多养殖场（户）不重视猪伪狂犬病和猪圆环病毒病的疫苗免疫工作或免疫效果不好，导致疫病散发、多发。建议针对猪伪狂犬病和猪圆环病毒病的防控，养殖场（户）应选择与本地区流行的毒株核酸同源性较高的疫苗进行免疫，疫苗免疫后要重视免疫效果监测，对免疫不合格的要及时补免，同时养殖场（户）还应重视猪场生物安全防护措施，制定严格的生物安全规程并落实到位，大型养猪场可以根据自身情况开展动物疫病净化工作。