奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验研究

钱 坤，张 颖，王 敬，任连泉

（ 1.天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心 300402； 2.天津市动物疫病预防控制中心 300402）

1 奶牛乳房炎发病率情况

奶牛乳房炎在一定程度上对病畜的产乳量造成影响。 会对奶牛厂造成巨大的经济损失， 同时也在一定程度上威胁了公共食品卫生安全。 金黄色葡球菌大都呈慢性经过，危害较为严重。

相关文献证实，在上世纪80 年代，对于我国奶牛乳房炎病因和发病情况加以调查，结果证实：金黄色葡球菌所引发的隐性乳房炎以及临床乳房炎，发病概率分别为17.4%以及18.4%。 在2008 年至2009 年，北京地区一项调查展示出了牛乳房炎发病情况，结果证实：由于金黄色葡球菌所引发的隐性与临床乳房炎发病概率分别达到了37.8%以及33.3%[1-2]。 由此能够看出，此类疾病的发生率呈现出了逐年上升的趋势。 因此有必要使用有效方式，积极鉴定出金黄色葡球菌，进而为疾病的治疗作出贡献。

2 金黄色葡球菌分离以及药敏试验具体过程

2.1 制备干燥药敏片

在此其中包含滤纸片制备以及药液配制。 则取当前临床上常用的几种兽用抗菌制，用药剂量依照说明书，同时结合各个药物药敏纸片纯药物含量水平要求以及抗菌药物原液内百分比，计算出一份所需要的抗菌药物原液重量。 在精准测量各类抗菌药品之后，利用缓冲液与稀释，将药物稀释到所需浓度此后进行含药物纸片制备。

2.2 收集乳汁样本

使用有效方法清除所收集样本内的杂菌。 完成编号之后，放入到冰盒中冷藏保存。 后离心处理，弃去上层油脂以及中层液体，留存底部沉淀物准备检验。

2.3 分离乳汁液样本中病原菌。 详细内容包含显微镜检查、细菌分离培养细菌、纯培养

2.4 细菌生化鉴定

择取通过纯化处理的菌株开展触酶试验、 乳胶凝集试验、甘露醇发酵试验、药敏实验。 观察具体结果。

3 牛乳房炎乳汁中金黄色葡球菌分离鉴定结果特征

3.1 染色镜检特征

通过染色镜检可以发现： 菌体呈现为球状， 直径规格约在0.5～1.0μm。为葡萄串状、短链状以及双球状排列。不存在荚膜、芽孢。 革兰染色阳性球菌。 其可疑似为金黄色葡球菌。

3.2 培养特性

营养肉汤质地较为浑浊，在管内存在少量灰白色沉淀物质。轻轻摇晃之后一并消散。 营养琼脂平板之中配药实验样本，形成圆形，表面光滑度高、湿润，存在隆起的金黄色菌落菌较大为金黄色。

在血液琼脂平板之中，菌落较大，为金黄色。 四周存在较为明显的β 溶血。 而在麦康凯琼脂平板之上，不存在细菌生长，样本为葡萄串状排列，不存在荚膜以及芽孢。

3.3 生化鉴定结果特征

通过触酶试验可以发现，受到感染的样本全部出现气泡，触酶试验结果为阳性[3]。

3.4 乳胶凝集试验

阳性分离株在2 分钟之内发生凝集，乳胶凝集试验为阳性。

3.5 糖发酵试验

通过糖发酵试验实验结果证实：样本中的海藻糖、果糖、甘露醇、蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖生化反应均为阳性。 而木糖醇、棉子糖、蜜二糖、木糖则为阴性。

4 阳性样本药敏试验结果特征

金黄色葡球菌分离菌株针对于青霉素钠耐药率为100%。出现这种现象的原因可能和此类抗菌制剂过度使用存在关联性。而针对红霉素、阿莫西林、氨苄西林钠、土霉素的耐药率分别为56%、63%、69%、75%。 建议不再使用上述药物治疗，其实对于盐酸克林霉素、硫酸链霉素、硫酸卡那霉素表现为中度敏感，可实现交替用药。 而针对于硫酸庆大霉素、头孢噻呋钠、恩诺沙星以及乳酸环丙沙星敏感性较高。 推荐使用上述抗生素视为奶牛乳房炎病畜的临床用药。