复合微生态制剂对生长猪生长性能、腹泻率、血清生化和免疫指标的影响

2020-02-13屈圣富杨加明高凤仙

饲料工业 2020年1期

屈圣富杨加明高凤仙

（湖南农业大学动物科学技术学院，湖南长沙410128）

近年随着畜禽养殖业快速发展，抗生素因具有提高养殖场的经济效益，作为饲料添加剂被广泛使用[1]。但是抗生素的大量使用诱发许多问题：加大畜禽粪便的回收利用的难度、加剧致病菌的耐药性以及抗生素在畜产品中残留等[2-3]。“减抗”、“替抗”已成为当今趋势，寻找一款绿色、安全的新型添饲料加剂成为人们所追求的目标。益生菌是一种活菌制剂，因具有不易产生耐药性、绿色、安全等特点受到人们广泛关注。Qiao 等[4]研究发现，嗜酸乳杆菌可以取代抗生素提高断奶仔猪猪的ADG，同时降低其料肉比。史自涛等[5]研究发现，与抗生素组和对照组相比，粪肠球菌组断奶仔猪的免疫器官发育更好，腹泻率更低。祝永才等[6]研究发现，复合微生态制剂（酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌）可以刺激断奶仔猪肠道免疫球蛋白的分泌，增强机体的体液免疫能力。但是益生菌在猪方面研究主要集中在断奶仔猪，在生长猪研究不多。因此，本试验以生长猪为研究对象，探究在饲料中添加不同浓度复合微生态制剂（枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌）对生长猪生长性能、腹泻率、血清生化和免疫指标影响。旨在为复合微生态制剂在生长猪上的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

复合微生态制剂购自湖南某公司，含有质量比为1∶1∶1的粪肠球菌、枯草芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌，且每种类型菌的活菌数≥1×109cfu/g。试验饲粮参照NRC（2012），其营养水平见表1。

表1 饲料配方及营养水平（风干基础）

1.2 试验动物及饲养管理

选用健康的杜×长×大三元生长猪160 头，体重（33.03±0.28）kg，随机分成4 个组，每个组4 个重复，每个重复10 头猪。Ⅰ组为对照组，饲喂基础日粮；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别饲喂再添加100、200、300 mg/kg的复合微生态制剂的试验日粮。

在湖南省衡阳市某猪场进行试验，所有试验猪在同一栋猪舍，栏舍条件一致，采光和通风良好，自由采食，饲养管理按照其猪场饲养管理制度进行。试验预试期7 d，正式试验期28 d。

1.3 指标测定

1.3.1 生长性能和腹泻率

试验期内，每天记录采食量。于试验期第1 d和28 d，对生长猪进行空腹称重，并结合每天记录采食量和试验天数，计算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、料重比（F/G）。试验期内每天8：00 观察生长猪的粪便情况，并根据史自涛等[5]方法对粪便进行评分。当粪便评分在2 分或以上时，认定生长猪发生腹泻，试验结束后计算各组的腹泻率：

腹泻率（%）=腹泻头数/（每组猪头数×试验总天数）×100

1.3.2 血清生化和免疫指标

于试验的第28 d，每个重复随机选取1 头猪前腔静脉采血10 ml，倾斜采血管，静置30 min 后，于3 000 r/min 离心10 min，吸取上清液1～1.5 ml，注入1.5 ml 离心管中，标记组别日期，置于-20 ℃冰箱保存。采用全自动生化仪迈瑞BS-420分析测定试验猪血清中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、碱性磷酸酶（ALP）、谷草转氨酶（AST）的含量，试剂盒购自中生北控股份有限公司，按照说明操作；采用半自动生化分析仪A6 测定血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）的含量，试剂盒均购自北京华英生物技术研究所，按照说明操作。

1.4 数据处理与分析

应用SPSS 21 软件进行单因素方差分析，然后通过Duncan's法进行组间多重比较，用P＜0.05表示差异显著，P＜0.01 表示差异极显著。试验结果采用“平均值±标准差（Mean±SE）”。

2 结果

2.1 复合微生态制剂对生长猪生长性能的影响

表2 复合微生态制剂对生长猪生长性能的影响

由表2可知，与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的ADFI均有所升高，但是差异不显著（P＞0.05）；与Ⅰ组相比，Ⅲ组的末重和ADG显著增加（P＜0.05），Ⅱ组和Ⅳ组的末重和ADG有增加的趋势（P＞0.05）；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和Ⅳ组的料重比之间差异不显著（P＞0.05）；与Ⅰ组相比，Ⅱ组和Ⅲ组的腹泻率有一定程度降低（P＞0.05）；与Ⅱ组和Ⅲ组相比，Ⅳ组的腹泻率显著增加（P＜0.05）。

2.2 复合微生态制剂对生长猪血清免疫指标的影响

表3 复合微生态制剂对生长猪血清生化和免疫指标的影响

由表3 可知，与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅳ组TP 浓度显著增加（P＜0.05），Ⅲ组TP 浓度极显著增加（P＜0.01）；与Ⅰ组相比，Ⅲ组GLB 浓度显著增加（P＜0.05）,Ⅱ和Ⅳ组GLB 浓度有增加趋势（P＞0.05）；在ALB 和IgM 方面，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和Ⅳ组无显著差异（P＞0.05）；与Ⅰ组相比，Ⅲ组和Ⅳ组的ALP 浓度有增加趋势（P＞0.05），Ⅲ组的ALP 浓度显著高于Ⅱ组（P＜0.05）；与Ⅰ组相比，Ⅲ组GLU 浓度显著增加（P＜0.05），Ⅱ组和Ⅲ组AST 浓度显著减少（P＜0.05）；与Ⅰ组相比，Ⅲ组IgG浓度显著增加（P＜0.05），Ⅲ组IgA 浓度有增加的趋势（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 复合微生态制剂对生长猪生长性能和腹泻率的影响

益生菌由活菌制作而成，自身可以分泌各种消化酶和有机酸，促进机体对营养物质的消化利用率，继而改善其生长性能[7-8]。刘辉等[9]研究发现，复合益生菌可以显著提高生长猪的末重和ADG，同时显著降低其F/G，但是生长猪的ADFI 有所增加。毛倩等[10]研究发现，复合益生菌（乳酸菌、酵母菌）可以显著提高生长猪ADFI 和ADG，但是其F/G 有降低趋势。本试验中，Ⅲ组的生长猪ADFI 有所增加（P＞0.05），末重和ADG 显著增加（P＜0.05），这与刘辉等[9]和毛倩等[10]结果相似，可能是复合微生态制剂中嗜酸杆菌和芽孢杆菌可以分泌各种消化酶和有机酸，促进机体对营养物质的消化利用率，继而改善其生长性能[11]。

猪在生长发育时，易受到恶劣的饲养环境、不卫生的饲料、不健康的心理等因素刺激，继而引起肠道菌群的失调，有害菌大量增殖，导致腹泻率上升。其中有害菌大肠杆菌的增殖是诱导猪腹泻的主要原因[12]。Huang 等[8]研究发现，在饲料中添加乳酸杆菌可以显著降低断奶仔猪肠道大肠杆菌的数量，降低断奶仔猪82.95%腹泻率。同样何佳等[14]研究发现，复合益生菌（地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌）可以降低断奶仔猪65.98%的腹泻率，同时显著降低粪便中大肠杆菌的数量。本试验中，Ⅱ和Ⅲ组的腹泻率分别降低0.61%、1.24%（P＞0.05），这与Huang 等[8]和何佳等[14]研究相似，可能是益生菌与有害菌竞争肠道的黏附位点，减少有害菌在肠道的黏附，此外益生菌分泌的细菌素和有机酸可以抑制有害菌的增殖，继而降低腹泻率[15]。而随着添加浓度提高，与Ⅲ组相比，Ⅳ组的腹泻率显著增加（P＜0.05），ADFI 和ADG 有减少的趋势（P＞0.05）。这可能是过量的外源微生物进入肠道，与肠道优势菌群争夺优势位点和营养成分，破坏肠道菌落平衡，引起腹泻率增加，降低生长性能[16]。上述结果说明复合微生态制剂可以降低生长猪的腹泻率，但是并非在饲料中添加浓度越高，腹泻率就越低，存在适宜添加浓度。

3.2 复合微生态制剂对生长猪血清生化和免疫的影响

血清生化指标可以反映机体综合代谢能力。在一定范围内，GLU 浓度升高，机体代谢能力随之加强。葡萄糖是机体能量物质，为机体合成蛋白质提高能量，以及调控机体蛋白质的合成[17]。在动物体生长阶段，ALP 浓度适当升高，可以促进机体骨骼的生长以及对营养物质的代谢效率[18]。本试验中，与Ⅰ组相比，Ⅲ组GLU 浓度显著增加（P＜0.05），Ⅲ组的ALP 浓度有增加趋势（P＞0.05），这与金三俊等[19]试验结果相似，进一步说明复合微生态制剂通过促进营养物质代谢效率，提高生长性能。AST 主要分布在心肌附近，其活性增加，可以反映心肌细胞受损。本试验中，与Ⅰ组相比，Ⅱ和Ⅲ组AST 浓度显著减少（P＜0.05），这与王晓丹等[20]结果相似。上述试验结果说明复合微生态制剂对心肌组织有一定的保护作用。

血清中TP 是主要由ALB 和GLB 组成，可以反映机体对饲料中蛋白质的吸收情况和体液免疫情况。其中ALB 含量升高可以反映机体合成蛋白质能力提高，GLB 含量升高可以反映机体免疫力提高。刘辉等[9]、金三俊等[19]分别给断奶仔猪和生长猪饲喂益生菌，发现猪只血清中TP、ALB和GLB出现不同程度提高。本试验中，与Ⅰ组相比，Ⅲ组TP浓度极显著增加（P＜0.01），Ⅲ组GLB浓度显著增加（P＜0.05），Ⅲ组ALB浓度有增加趋势（P＞0.05），其结果与前人相似[21-22]，说明复合微生态制剂可以提高生长猪蛋白质的合成能力，以及改善机体免疫能力。

血清中免疫球蛋白包括IgA、IgG、IgM 均由b 淋巴细胞产生。它们是体液免疫预防和抵抗感染的主要影响因素。血清免疫球蛋白浓度是体液免疫的重要指标。Liu 等[23]发现饲喂乳酸杆菌的哺乳仔猪IgA 和IgG 浓度显著升高，但是IgM 浓度差异不显著。魏清甜等[24]发现粪肠球菌可以显著提高断奶仔猪IgA 浓度。本试验中，与Ⅰ组相比，Ⅲ组IgG 浓度显著升高（P＜0.05），Ⅲ组IgA 和IgM 浓度有增加的趋势（P＞0.05），与前人结果相似，可能是益生菌可以刺激肠上皮细胞分泌免疫球蛋白导致机体免疫球蛋白升高，提高机体免疫力[25-27]结果说明复合微生态制剂通过升高免疫球蛋白的浓度，增强生长猪的免疫力。