培美曲塞与顺铂联合吉非替尼治疗对非小细胞肺癌患者T细胞亚群及细胞因子的影响

王 毅，权 琳

0 引 言

非小细胞肺癌是发病率以及死亡率均较高的恶性肿瘤疾病，并且呈现上升趋势，而肺癌患者中非小细胞肺癌占比较高［1］。非小细胞肺癌主要的标准治疗是以铂类药物为基础进行的双药化疗方式，但该治疗方式只能对患者的生存质量状况进行改善，治疗的总有效率较低［2-3］。在临床中吉非替尼的治疗效果与传统的化疗药物比较效果更加显著，能够有效提升患者的生存期并显著改善患者预后［4］。本研究通过非小细胞肺癌患者不同用药方式的比较，探讨对患者T细胞亚群及细胞因子的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料回顾性分析2017年1月至2018年12月我院接收的84例非小细胞肺癌患者临床资料，依据治疗方式的不同分为吉非替尼组、培美曲塞联合顺铂组以及三药联合组（给予培美曲塞与顺铂联合吉非替尼治疗），每组各28例。吉非替尼组患者中男19例，女9例，年龄44～73 岁，平均（62.5±5.5）岁，临床分期Ⅲ期22例、Ⅳ期6例；培美曲塞联合顺铂组患者中男17例，女11例，年龄44～73 岁，平均（62.5±5.5）岁，临床分期Ⅲ期18例、Ⅳ期10例；三药联合组患者中男20例，女8例，年龄43～72岁，平均年龄（62.3±5.7）岁，临床分期Ⅲ期15例、Ⅳ期13例。纳入标准：经病理检查均确诊为非小细胞肺癌。排除标准：合并骨髓抑制情况严重的患者；肾损害严重的患者；对本研究使用的药物过敏的患者；曾有精神病史或者精神异常不能配合治疗的患者。3 组患者的基本资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 三药联合组给予患者培美曲塞+顺铂联合吉非替尼治疗的方法，具体服用方法为：第1 天，静脉滴注500 mg/m2的培美曲塞（生产厂家：海南锦瑞制药有限公司，国药准字H20163005）；第1～3 天，静脉滴注75 mg/m2的顺铂（生产厂家：云南个旧生物药业有限公司，国药准字H53021740）；第8～21 天口服吉非替尼（生产厂家：英国阿斯利康Limited，国药准字J20140142），250 mg/次，1次/d。

1.2.2 吉非替尼组给予患者单独使用吉非替尼，服用方式：口服，250 mg/次，1次/d。

1.2.3 培美曲塞联合顺铂组给予患者使用培美曲塞联合顺铂的治疗方法，具体为：第1 天，静脉滴注500 mg/m2的培美曲塞；第1～3 天，静脉滴注75 mg/m2的顺铂。以上3 组均治疗21 d 作为1个周期，共治疗2个周期。

1.3 观察指标

1.3.1 评估3 组患者的T 细胞亚群水平分别在治疗前后抽取3 组患者5 mL 的空腹静脉血，利用流式细胞仪对患者T 淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）以及Treg细胞亚群（CD4+/CD25+）的比例进行检测，比较3 组患者治疗前后的T 细胞亚群水平。

1.3.2 评估3 组患者的细胞因子水平治疗前后3 组患者血清中的白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）以及γ 干扰素（IFN-γ）利用免疫磁珠法分别检测，比较3 组患者治疗前后的细胞因子水平。

1.3.3 治疗后不良反应的发生情况统计3组患者治疗后不良反应的发生情况，主要包含恶心呕吐、皮疹、转氨酶异常、骨髓抑制以及腹泻。比较3组不良反应的总发生率。

1.4 统计学分析采用SPSS 18.0 进行数据分析，其中计数资料以百分率（%）表示，组间比较行χ2检验，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较行t检验，以P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 治疗前后的免疫功能比较三药联合组治疗后CD3+、CD4+以及CD4+/CD8+水平分别与吉非替尼组、培美曲塞联合顺铂组比较显著升高（P<0.05），3组患者的CD8+、NK 以及CD4+/CD25+水平比较差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2 治疗前后的细胞因子水平比较三药联合组治疗后的IL-2、TNF-α以及IFN-γ水平分别与吉非替尼组、培美曲塞联合顺铂组比较显著升高，IL-6 及IL-10水平与吉非替尼组、培美曲塞联合顺铂组比较显著降低（P<0.05），见表2。

2.3 不良反应情况比较吉非替尼组患者中出现恶心呕吐3例、皮疹3例、转氨酶异常2例、骨髓抑制5例以及腹泻3例；培美曲塞联合顺铂组中出现恶心呕吐2例、皮疹3例、转氨酶异常1例、骨髓抑制4例以及腹泻2例；而三药联合组患者中出现恶心呕吐1例、皮疹2例、转氨酶异常1例、骨髓抑制1例以及腹泻1例。三药联合组不良反应的总发生率（21.4%）显著低于吉非替尼组（57.1%）、培美曲塞联合顺铂组（42.9%），差异有统计学意义（P<0.05）。

表1 入组非小细胞肺癌患者治疗前后的免疫功能比较（±s）

表1 入组非小细胞肺癌患者治疗前后的免疫功能比较（±s）

与本组治疗前比较，*P<0.05；与三药联合组治疗后比较，#P<0.05

表2 入组非小细胞肺癌患者治疗前后的细胞因子水平比较（±s，pg/mL）

表2 入组非小细胞肺癌患者治疗前后的细胞因子水平比较（±s，pg/mL）

与本组治疗前比较，*P<0.05；与三药联合组治疗后比较，#P<0.05

3 讨 论

人体内的抗肿瘤的免疫效应主要包含体液免疫以及细胞免疫两方面，两者之间通过相互作用而对肿瘤细胞进行消灭，其中的细胞免疫为主要免疫效应［5］。细胞免疫主要是指非特异性的细胞（NK 细胞）与特异性细胞（T 淋巴细胞亚群）介导的免疫反应［6］。对患者外周静脉血的检测有助于对NK 细胞与T 淋巴细胞亚群水平进行评估，从而对患者肿瘤细胞的免疫功能进行有效评价，并能在对药物治疗过程中细胞免疫功能的变化进行有效分析［7-8］。NK细胞是具有特殊性质的细胞群体的一种，能够将病毒感染类的细胞或者肿瘤细胞进行直接杀伤，因此NK 细胞活性的降低或者数量的减少能够明显的降低对于肿瘤细胞的清除以及杀伤功能，从而导致患者抗肿瘤的功能降低［9-10］。对晚期非小细胞肺癌患者主要的治疗方式为化疗治疗，该项治疗措施能够有效延长患者的生存期，但同时也会对患者正常的细胞功能产生一定的损伤，从而使免疫功能得到抑制，不利于患者预后。

T 淋巴细胞主要用于对于机体抗肿瘤的免疫情况进行有效的监视，其中CD3+T 细胞代表T 淋巴细胞的总数量，从而对细胞的总体免疫状态进行有效反应；CD4+T细胞是一种辅助性细胞，对于机体内抗肿瘤的反应起到辅助功能；CD8+T是一种细胞毒的T细胞，对于淋巴细胞以及CD4+T 细胞进行有效的抑制，进而对患者免疫的功能进行有效的抑制［11-12］。非小细胞肺癌患者自身机体免疫力低下，Treg 细胞的抑制功能相对增强，而使用的药物同时也作用于Treg，减弱其抑制功能，所以通过CD4+CD25+T 细胞群代替。Treg细胞是一种具有独特免疫调节功能的T 淋巴细胞亚群，根据相关研究证实Treg 细胞具有预防自身免疫性疾病、维持机体内环境的稳定以及肿瘤免疫监视等功能。该细胞数量过多能够阻碍机体内抗肿瘤免疫应答的情况，从而导致患者的免疫力相对较低，因此机体的免疫功能与Treg 细胞具有一定的相关性。

在机体对肿瘤免疫应答的反应中，细胞因子具有至关重要的调节功能。细胞因子的主要来源为被激活的T 淋巴细胞等具有免疫活性的细胞，其中的IFN-γ 主要是由Th1 型细胞进行分泌，具有抗肿瘤的功能，主要通过增加巨噬细胞表面的表达受体，进而有效促进巨噬细胞的抗体以及免疫复合物等被肿瘤以及病原体细胞进行包围。而IL-10 则则主要由Th2 型细胞进行分泌，是细胞因子合成中的抑制因子，对活化的T细胞具有显著的抑制功能，进而促使细胞免疫应答的情况得到有效抑制。培美曲塞通过对细胞复制过程中叶酸代谢情况进行有效的干扰，从而发挥抗肿瘤的功能，是一种抗叶酸性的化疗类药物。根据有关研究表明，培美曲塞对于胸苷酸合成酶具有显著的抑制功能，同时能够有效的抑制二氢叶酸还原酶的活性，以上均为叶酸中重要的依赖性的辅助酶，培美曲塞通过以上关键酶的活性而对多个靶点进行有效的抑制，进而对肿瘤细胞的合成产生影响［13-14］。

本研究对采用不同治疗方式的3组患者比较发现：三药联合组患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平与吉非替尼组和培美曲塞联合顺铂组比较显著升高（P<0.05），3 组患者的CD8+、NK 以及CD4+/CD25+水平差异无统计学意义（P>0.05）；三药联合组患者的IL-2、TNF-α 以及IFN-γ 水平与吉非替尼组、培美曲塞联合顺铂组比较显著升高，IL-6及IL-10水平显著降低（P<0.05）。充分说明培美曲塞+顺铂与吉非替尼联合的治疗方式，能够显著改善患者的免疫功能以及细胞因子水平，有助于患者预后。在本研究中通过对不良反应情况的比较发现：三药联合组患者不良反应的发生情况与吉非替尼组、培美曲塞联合顺铂组比较明显较低（P<0.05），骨髓抑制为最常见的不良反应，培美曲塞+顺铂联合吉非替尼治疗后能够显著降低患者不良反应的发生，对于治疗效果的提升有积极的促进作用。

目前对非小细胞肺癌患者进行化疗的过程中标准的方案为铂类药物与第3 代药物的联合使用，但经该方案实施后患者容易出现复发的情况，因此需要实施二线方案的治疗［15-16］。而吉非替尼是表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂，是第一个获准上市治疗晚期非小细胞肺癌的分子靶向药物，属于非细胞毒性蒽喹琳类药物，该药物通过对细胞的转移以及异常增生情况进行有效的阻止，从而使抗非小细胞肺癌的功能得到有效的发挥［17-18］。培美曲塞可以有效抑制细胞内叶酸依赖性的正常代谢过程。顺铂抑制了肿瘤细胞的分裂，同时还能够破坏体内癌细胞的细胞膜结构。吉非替尼进入细胞内，通过与ATP 竞争EGFR 的特定结合位点，抑制酪氨酸激酶活性，影响细胞传导通路，抑制肿瘤血管生成，从而抑制肿瘤的生长与进展。在本研究中对非小细胞肺癌患者采用培美曲塞与顺铂联合吉非替尼治疗，可促使患者的免疫水平得到显著改善，进而促进患者免疫力的提升，由此可见，采用该方案治疗能够显著提升患者的细胞免疫功能，进而利于患者预后。同时，能够促使其机体的免疫微环境得到优化，进而促使外周血CD8+T 细胞的水平显著降低，进而能够从多方面对肿瘤免疫逃逸的情况进行有效干预，促进机体免疫监视系统的恢复。

综上所述，对非小细胞肺癌患者治疗时采用吉非替尼与培美曲塞+顺铂联合使用，不仅可以帮助改善患者的T 细胞亚群以及细胞因子的水平，还可以减少治疗后发生不良反应的情况，同时还可以有效的抑制癌细胞的生长和扩散，帮助增加治疗效果，后续可能考虑进行免疫治疗。