微型月季组织培养育苗技术

王 禹

(黑龙江省农科院园艺分院，哈尔滨 150069)

微型月季(Rosahybrida)是蔷薇科蔷薇属多年生木本植物，是现代月季中的一个特殊类群。随着生活水平的提高，盆栽花卉越来越受到人们喜爱。微型月季因其植株矮小、花色繁多、花头众多、花期长，作为盆栽花卉，具有较高的观赏价值，受到人们的青睐，微型月季种苗的需求量逐年增加。

微型月季常规采用根蘖分株、埋土压条、扦插及嫁接等种苗繁殖方式，因受生长周期及枝条少、节间短等因素的影响，导致苗木长势不齐，品种退化、苗木质量差、繁殖速度慢，难以满足市场对优良种苗的需求。因此，应探索高效的微型月季种苗繁育方式。从材料选择、组培苗育苗、组培苗驯化及管理等方面阐述利用组织培养技术繁育微型月季种苗，以期提高种苗繁殖数量和质量，以解决微型月季常规繁殖方式繁殖系数低、苗长势不一致及苗木质量差的问题。

1 材料选择

选择无病虫害、生长健壮、芽体饱满茎粗不超过0.5 cm的嫩枝或半木质化的枝条，采集时间为5月末～10月末。

2 组织培养准备工作

2.1 培养基的制备

所有培养基均采用MS + 植物激素 + 7 g/L琼脂 + 30 g/L白糖，pH 5.4～6.0，0.103 MPa，121 ℃，湿热灭菌20 min。

2.2 工具准备

无菌水、滤纸及工具，0.103 MPa，121 ℃，湿热灭菌30 min。

2.3 材料消毒

将采集的枝条剪成带一个芽1 cm长的茎段，用洗洁精清洗干净，流水状态下冲洗1 h，置于超净工作台中无菌水冲洗3次。

嫩枝茎段消毒：酒精40 s，无菌水冲洗3次，每次1 min以上；HgCl2消毒5 min，无菌水冲洗3次，每次1 min以上。

半木质化茎段消毒：酒精1 min，无菌水冲洗3次，每次1 min以上；HgCl2消毒7 min，无菌水冲洗3次，每次1 min以上。

3 组培苗培养

3.1 丛生芽诱导

将消毒好的茎段底部黑色部分切去，接种到MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA生长培养基上。7 d后腋芽陆续萌发，14 d后丛生芽产生。

3.2 丛生芽增殖培养

将丛生芽从茎段上切下，转接到增殖培养基上，增殖培养基MS+1.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA，转接时丛生芽高最好不超过1 cm。每30 d转接一次，增殖系数可达3.6～5.0。

增殖培养可连续进行5次，然后进行复壮培养，复壮培养基可采用MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA或MS不添加激素。

3.3 组培苗生根

当组培苗长至1 cm高时，切成单株状，接种到1/2MS+0.1 mg/L IBA生根培养基上。

3.4 培养条件

培养温度21～25 ℃；光照时间12 h/d，光照强度为2500～3000 lx，相对空气湿度40%～60%。

4 组培苗驯化

4.1 炼苗

组培苗接种到生根培养基后将其放置驯化室进行生根培养。白天温度23 ℃±2 ℃，夜间不低于18 ℃即可。生长至根系0.5～1 cm长、株高3 cm以下，进行驯化。驯化前3 d，把瓶盖打开。

4.2 移栽

栽基质采用草炭土，拌入辛硫磷1000倍液，塑料布高温覆盖10 d。采用72穴，5 cm深的穴盘，使用前穴盘先喷洒0.1%的高锰酸钾溶液，放置1 d。

栽前将穴盘浇透水，组培苗根部培养基洗净，用镊子在穴盘上上打孔，根系垂直栽入，轻覆土，浇透水。

4.4 驯化管理

缓苗前保持土壤湿润，遮光率20%；相对空气湿度不高于40%；环境温度白天不高于30 ℃，夜晚不低于18 ℃，30 d后成活率可达90%。

移栽后注意通风减少病虫害发生，药剂预防虫害可选用90%敌百虫或2.5%杀灭菊酯乳油等；病害预防可选用代森锰、多菌灵等。