300例耐多药肺结核患者结核分枝杆菌药物敏感性的试验研究

阎 秋

（辽阳市卫生健康服务中心，辽宁 辽阳 111000）

现阶段，全球结核病疫情恶化，结核分枝杆菌的出现，尤其是MDR-TB的感染是导致结核病疫情长期不能得到有效控制的主要原因之一，MDR-TB也是结核病防控工作的重难点，临床治疗难度很高。既往有临床研究发现[1]，结核病患者若化疗方案不合理，将会促进耐药结核分枝杆菌的产生过程，进而诱导耐药菌株在群体中的传播过程，进一步增加了结核病蔓延过程控制的难度。故而，加强结核分枝杆菌的监测力度，分析药敏试验结果，这对提升MDR-TB的临床诊治效果有很大助益，鉴于此本文采集了400例MDR-TB患者临床资料，分析其药敏试验结果，具体内容报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：300例肺结核患者均于2016年4月至2017年8月前来某院接受住院治疗，经结核菌培养和药敏试验均确定为是MDR-TB病例，样本来源均是痰液与肺泡灌洗液。其中包括男性189例，女性111例；最大年龄84岁，最小年龄12岁，平均年龄（43.58±5.62）岁。

1.2 培养基：快速液体培养基 BACTEC MGIT960 系统配套试剂（美国BD试剂公司提供），笔者所在科室自行配制改良罗-氏培养基。

1.3 实验方法：将从入选病例获得的样本使用4% NaOH溶液持续消化16 min，继而将其整合至PBS缓冲液，混合摇匀，3500 r/min离心处理16 min，将上清液去除，混合均匀以后将其接种在快速液体结核菌培养基与改良罗-氏培养基，在37 ℃恒温箱内培养以获取到阳性菌珠。快速培养呈阳性则经由涂片处理以确认。罗-氏培养基历经2～8周出现菌落涂片确认。

1.4 常见药物名称及对应的浓度：针对在本培养中呈阳性者，都做统一抗结核药物药敏试验。进行药敏试验的抗结合药物类型有利福平（RFP）、异烟肼（INH）、链霉素（SM）、左氧氟沙星（LVF）、乙胺丁醇（EMB）。常用药物对应的试验浓度为：SM（10，100）μg/mL，INH（1，10）μg/mL、RFP（50，250）μg/mL，EMB（5，50）μg/mL，D（1，10）μg/mL，LVF（2，20）μg/mL。鉴定菌型时采用的培养基及浓度为：（TCH）C2-羧酸肼噻100 μg/mL，（PNB）对硝基苯甲酸500 μg/mL。

1.5 耐药结果的判断：每一种药物的低、高浓度培养基上菌落数＞20个就可以判断为耐药，或者耐药1+即可判断为耐药。结核分支杆菌对多种药物耐受的判断：至少耐RFP、INH结核分枝杆菌。

2 结果

2.1 不同年龄段耐多药肺结核的分布情况：结合本次研究结果发现，20～29岁组耐多药比重最高，为37.67%（113/300），其次是50～59岁组与40～49岁组，分别对应的是24.67%（74/300）、21.00%（68/300）；小于20岁组与大于70岁组耐多药比重偏低，分别是8.33%（25/300）、7.33%（22/300）；同时低于平均年龄（43.58±5.62）岁的发病148例，占病例总数的49.33%，这提示耐多药结核的发病体现出较明显的年轻化趋势。

2.2 耐单药分布情况：在入选的耐多药病例中，RFP、SM的低浓度耐药处于较高水平，分别为78.33%（235/300）、86.33%（259/300）；低浓度的D耐药比也达到61.67%（185/300）；高浓度药物耐药中，RFP的耐药率达到了88.33%（265/300），其次分别为SM、INH，依次为71.67%（215/300）、63.33%（190/300）；虽然EMB、LVF也以低浓度耐药为主，但耐药比例均低于50.0%，依次为42.67%（128/300）、40.67%（122/300）。

2.3 常用药物交叉耐药分布：交叉耐药情况研究表明，同时对RFP+INH+SM 耐药的比例最大，耐药率为59.67%（179/300）RFP+INH+SM+LVF、RFP+INH+SM+EMB、RFP+INH+SM+EMB+LVF同时耐药的比例高于10.0%，依次为15.67%（47/300）、13.3%（40/300）、11.33%（34/300）。

3 讨 论

WHO资料表明[2]，我国现有的我耐药结合病患者数目在全球样本总量中所占比例约为20.0%，结核病防治工作日益严峻化。2007年～2008年全国结核病耐药基线调查结果表明[3]，中国肺结核患者中耐多药率为8.32%，广泛耐药率为0.68%。耐药状况整体较为严重，这会惊险增加结核病防控难度。国内外均有很多学者指出，耐药率指标的高低不仅能为临床医师选择抗结核药物提供可靠参照，并且还是反应结核病流行病学的重要指标，故而耐药率的检出情况和结核病控制效果之间存在明显相关性。加强对耐药状况的动态化监测，逐渐演变成评估国家结核病控制规划（NTP）的重要指标之一。

耐药性的产生主要和菌株染色体上的一些基因突变存在相关性，一些耐多药结核分枝杆菌的基因突变已得到证实[4]。在抗结核的二线药物中，喹诺酮类药物作为广谱抗生素在临床各系统感染性疾病中均有较广泛应用，这是造成结核病患者对喹诺酮类药物的耐药性不断上升的主要原因之一。喹诺酮类药物的临床经验性抗感染治疗不仅仅可以诱导结核菌对喹诺酮类药物形成耐药性，还可能增加结核病临床诊断的正确。正因如此，临床针对原因不明的感染与肺结核合并肺部感染的病患，应科学使用喹诺酮类药物，以减少或规避耐药性降低其在呼吸道疾病治疗中的效能。

因为耐多药结核病的治疗时间较漫长、难度相对较大、治愈率整体偏低、资金投入量高，一方面会增加患者的身心负担，另一方面会给社会造成极大的经济负担。诱发耐多药结核病的原因主要有[5]：①疾病治疗过程中采用单一药物；②治疗过程中药物浓度偏低，治疗过程缺乏规范性；③联合用药方案不合理。临床针对MDR-TB患者应做到早期发现、正确针对、及时治疗，立足于患者病情实况，拟定个体化的治疗方案，以最大限度的提升临床治愈率，并且在选择治疗方案过程中还需结合患者的经济收入水平，以防加重他们的经济负担，减少或规避中途暂停治疗的情况。

总之，MDR-TB能使病患治疗病程延长，甚至造成临床治疗失败，进而导致耐药结核菌的传播与流行，会对病患的生命安全性构成严重威胁，且还会对社会与家庭造成较明显的危害。临床应基于耐药性检测结果选择个性化治疗方案，这对提升MDR-TB患者治愈率、抑制MDR-TB的流行均有重要意义。