非瘟背景下复养场消毒清洗及检测评估技术

2020-01-11颜运秋徐少勇刘云鹏

河南畜牧兽医 2020年6期

颜运秋，迂斌，徐少勇,刘云鹏

（1.长沙道勤生物科技有限公司，湖南长沙 410000；2.湖南农业大学动物医学院）

1 复养猪场洗消前的各项准备工作

清洗前准备：防护服、防护手套、眼镜、面罩等；生石灰、烧碱、拳力巴斯德、凹凸巴斯德、过硫酸氢钾、戊二醛类等消毒药。

检查猪场外部围栏、围墙，排水、粪污管线管道等，保证封闭运行；洗消期间所有进出猪场的人员务必通过检查，执行洗澡、消毒、更衣等程序；所有进出猪场车辆务必彻底清洗、消毒，包括司机在内的所有进场人员更换场内衣服、鞋，消毒液洗手，车内脚垫、脚踏板等彻底洗消；所有的工作服当天在场内清洗，并在洗衣机内加入消毒液。

2 复养场的消毒及清洗

对于复养场来说，猪舍及设施携带的病毒很多，如按正常洗消程序“清洗—消毒—干燥”的流程，很容易造成栏舍中检不到病毒，复养很难成功的事实。因为在清洗过程中，病毒就随水流进入并残存于排污管道，而排污管道不可能做到全管道高浓度消毒水浸泡。所以对复养场必须进行消洗而不是洗消。

实践证明，3 次消洗法（消毒—清洗—干燥—再消毒—再清洗-再干燥—第3 次消毒—第3 次清洗—第3 次干燥）非常实用，可有效避免栏舍环境中病毒进入污道等造成再次污染。

在消洗顺序方面应遵循水往低处流的原则，先消洗料线，水线，再栏舍，最后污道。最大程度避免了栏舍环境被病毒二次污染的风险。

2.1 料线、水线

拆卸所有料线，清洁后放置于2%烧碱中浸泡消毒24 h。拆卸所有饮水器和接头等，放置于2%烧碱中浸泡消毒24 h。蓄水池或水塔维修、清洗、消毒。水线组装好后，在蓄水池中添加敏感消毒剂，进行在管道中浸泡，用水循环冲24 h。清空所有饲料库存，用于喂鱼、家禽，严禁复产再用。深度清洗料仓、料塔，之后用烟雾熏蒸产品进行第一次处理，再拆除能拆卸的绞龙、管线等零件进行消毒清理。间隔2周进行第二次消毒处理。

2.2 水道

用敏感消毒剂如如意酸（1∶100倍稀释），对所有水线、饮水器消毒24 h，然后放清水清洗。

2.3 通风系统

风机、水帘、控制器、传感器等进行消毒、洗刷干燥。

2.4 猪场全场消毒及清洗

猪场无害化清理完，必须对猪场内外、猪舍内外的残留垃圾及剩余物资清理、清场。彻底清理、清场后，对整个猪场进行全面、系统、不留死角的多种方式的清洗、消毒处理。场内剩余原料、饲料、药品、木制品、橡胶垫、工具、垃圾等进行深埋或焚烧处理。然后再进行猪舍内外的消毒清洗。

2.5 猪栏：三消洗熏法

①拳力巴斯德泡洗（1∶200稀释）→冲洗→拳力巴斯德泡洗（1∶200稀释）→冲洗→ATP检测（合格）→干燥（凹凸巴斯德干粉消毒（20 g/m2））→空置→熏蒸（高锰酸钾32 g+福尔马林64 ml/m3）→qPCR 检测；②拳力巴斯德泡洗（1∶200稀释）→冲洗→拳力巴斯德泡洗（1∶200 稀释）→冲洗→ATP检测（不合格）→泡洗→冲洗→ATP检测→干燥（凹凸巴斯德干粉消毒（20 g/m2））→空置→熏蒸（高锰酸钾32 g+福尔马林64 ml/m3）→qPCR 检测；③冲洗时建议按照1：5 000倍稀释比例添加如意酸，以达到更彻底的清洗消毒效果；④熏蒸消毒：高锰酸钾+福尔马林，环境温度应保持20 ℃以上、相对湿度达到80%～90%，消毒作用才得以发挥。使用方法：比例为1∶2，先放入高锰酸钾，高锰酸钾16 g+福尔马林32 ml/m3，放入瓷锅中加热煮沸24h直至将水蒸发耗干→密封72 h→然后开窗+风机通风48h；⑤路面白化配比：通常用其20%乳剂。具体配制方法是：取1 kg 石灰加1L 水生成熟石灰，将所得的熟石灰再加8L 水即成20%石灰乳。每平方米用1L石灰乳刷1～3次；具体推荐按照：2.5 kg火碱+10 kg生石灰+50 kg温水，就可以配成20%生石灰乳+5%烧碱的成品，每平方米用1L 石灰乳刷1～3次；周围50 m和道路全部喷白。每7 d喷白一次；⑥粪沟：用2.5 kg 火碱+50 kg 水,配成5%比例的溶液,进行浸泡,每天添加1次，连用3 d。

2.6 猪舍内设备、器具

清洁和消毒所有设备。猪栏等铁制品进行火焰消毒。对可浸泡的器具采用戊二醛等浸泡24 h消毒。将所有能拆卸的设备，如：猪栏、漏缝地板、产床隔离板、保温箱、手推车、柜子、架子、门窗、灯具移至室外消毒清洗后置于室外晾晒。

2.7 猪舍内外墙及通道、地面

先喷洒复合戊二醛，之后大扫除，之后涂抹上石灰浆，复产前重复两次。干燥后将所有小设备、门窗、地板、挡板、漏缝板移走，在地面喷撒300 g/m2的生石灰（可用专门的粉末喷撒设备提高喷撒均匀度），也可以换成烧碱。

2.8 粪污及其管道也是重中之重

猪舍内外粪沟和舍内漏粪板下的粪尿都要进行消毒处理后清理，清空粪水池后进行消毒清洗，并对粪便等进行无害化处理。对所有粪污痕迹或粪污堆积物，都必须喷撒生石灰，并搅拌（每平方米500 g，混合均匀）。清理所有排粪管道及蓄粪池，然后消洗。所有漏缝地板、粪池、粪沟，彻底先用3%烧碱浸泡消毒后再清洗。

2.9 药房库房

烧掉或无害化处理所有没有用完的兽药、物品外包装。库房密闭臭氧消毒，库房内所有备用器材、设备、工具等，消毒液浸泡或高压喷洗消毒。

2.10 办公室、食堂和宿舍、生产线洗澡间更衣室

消毒干燥后进行粉刷。使用过硫酸氢钾溶液进行消毒，后使用高锰酸钾和甲醛熏蒸48 h。无害化销毁剩余所有衣服和鞋子、杂物。对猪舍外、生活区、宿舍、食堂、办公区域消毒。

2.11 防鸟、防鼠、驱蝇、驱虫

对场内蚊、蝇、蜱、老鼠、鸟类等进行杀灭，处理场内猫、狗等其他动物。给饲料塔装上驱鸟器。在猪场围墙四周建立“生石灰+碎石”的隔离带，阻止老鼠进入猪场。将室内风机开至最大功率检测，对所有通道及角落清洗、消毒、驱蝇、驱虫。入口处安装防蚊网，室内安装电子灭蚊蝇灯，除主水管道外，其他管道系统使用酸化剂（pH值＜2.0）冲洗后拆除封头以将存水彻底放空，该区域也不能有任何明水存在，撒布灭鼠药并封闭该区域，避免人员物资进入。

2.12 树木杂草垃圾

清除猪场内及围墙外10 m内树木、杂草及垃圾。带根除草、带根除树，不便砍伐的树木使用落叶剂清除枯叶落叶。烧掉所有的草、树和所有废弃的杂物、垃圾等。在猪场内外草丛中，喷洒环境生态修复剂，清除蜱虫卵，控制非洲猪瘟传播媒介，控制蚊蝇卵。每周喷洒一次环境生态修复剂，除臭、降氨、控制虫卵和创造不利于病原菌生存的环境。

采用多种消毒方式消毒：清洗消毒、粉刷消毒、喷雾消毒、熏蒸消毒、火焰消毒。只要允许，如猪栏、猪舍地面尽量采用一次火焰消毒。

3 复产前消洗后的空栏检测评估

第二轮消洗后可采用ATP 生物荧光检测仪（检测仪10～15 s 出结果）或简易荧光PCR 法对不同区域进行采样检测，不合格立即进行再次清洗。当猪场最后一个合格区域自然干燥封闭2周后，正常进入生产区的作业流程时再次分段以实时荧光定量PCR 检测（3～4 h），要求对重点部位进行采样检测，整场内外合格为终极目标。样品的采集应根据每个猪场的实际情况而定，猪场大，采集的样品自然多，基本原则是采样所覆盖的环节要够多、够细，但所采集的样本并不代表100%对应猪场的实际情况。统计学上讲，样本量越多，检测后的效果越能够反映猪场的实际情况。

3.1 采样点的描述

道路或通道采样：路面表层（土壤）取6个；车辆：分别在后车轮里侧2 个；每层厢板5个；前脸1个；后门1个；驾驶室脚踏板1个，方向盘1个；人员衣物（司机、入场人员）：上衣衣袖2个，背部1个，裤子膝盖2个；鞋子前帮围2个，中底2个，帮面2个；工具：铁锹和扫帚两端各采2个；病死猪处理区：1 m以内地表6个；场区大门口：道路6个，门把手2个；门卫室：地面均匀分散（4个角，中心）采5个点；内、外门把手各1；猪舍内（床位）设施：产房10个点（随机5个产床，每个床采缝条中间及横栏2 个点）；妊娠舍10 个点（随机5个栏位，每栏位后栏、横栏2个点）；保育舍10个点（随机5个床，每个床采缝条中间及地面2个点）；育肥舍10个点（随机5个栏，每个栏2个点）；厨房：冷冻肉1个；餐厅：门口地面内外各3 个，门把手2 个；污水：蓄水池表面水1个；饮用水：发病畜舍远端出水口3个（不足3个随机选择母猪舍和妊娠舍）；场区大门口：地表6个，门把手2个；猪区或售猪中转站：地磅5个点（地磅栏条2个，地面3个）；地磅下地面4个点；附近地面上选5个点；员工进入生产区通道：地面和附属设施衣服存放区各取6个点；风机和风道：出风口内侧壁和扇叶各取3个点，风道随机取3个点；发病舍（任选2栋）粪沟或出粪口：粪沟3 2个，出粪口3 2个。

3.2 样品采集工具和保存运输

物体表面取样时用蘸取适量灭菌生理盐水或PBS 缓冲液的棉拭子在采样点5 DN 5 cm的区域内涂擦表面（一个采样点使用一个棉试子），手持部分丢弃，剩余部分无菌操作放入装有5 mL 含适宜中和剂的灭菌生理盐水EP 管中，塞紧试管，标记并记录。运输过程中，请在冷藏条件下运输，可在泡沫箱中放置冰袋或干冰。