血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、尾加压素Ⅱ和胱抑素C联合检测对早期糖尿病肾病的诊断价值

朱勤惠，李祥，卢玉振，徐蕾

(1. 淮安市淮阴区人民医院检验科，江苏 淮安 223300； 2. 徐州医科大学附属淮安医院检验科，江苏 淮安 223301)

糖尿病肾病(diabetic kidney disease, DKD)是一种以肾脏损伤为表现的糖尿病微血管并发症，已经成为终末期肾脏疾病及糖尿病继发死亡的主要原因之一[1-2]。早期DKD病情比较隐匿，肾病相关的症状不明显，当患者发觉有持续蛋白尿、水肿及高血压等症状时，已失去最佳的治疗期[3]。因此，对于糖尿病患者而言，早期DKD及时、准确的诊断具有重要的临床意义。

尿微量白蛋白(mAlb)和肾小球滤过率(GFR)是诊断DKD发生和监测病情进展的常用指标[4]。但是约10%的肾功能早期进行性下降的糖尿病患者，GFR异常时仍未表现出尿mAlb的异常增加[5]；外源性菊粉清除率过程和程序比较烦琐复杂，不便于临床运用。运用内源性肌酐清除率来估算GFR，虽然方法比较简单、方便[6]，但是肌酐含量变化在GFR的变化中具有滞后性，只有GFR下降到正常50%时，才开始明显升高[2, 7]。

近年来研究发现，中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinaseassociated lipocalin, NGAL)、尾加压素Ⅱ和胱抑素C在肾功能监测中具有重要的作用。当肾脏发生缺血缺氧等损害时，肾小管上皮细胞可分泌大量单体结构的NGAL促进浸润中性粒细胞凋亡，以减少肾脏组织的炎症性损害[8-9]。在肾功能不全的加重期患者中，血尾加压素Ⅱ浓度可进行性增加[10]；在DKD患者的肾组织中，尾加压素Ⅱ的表达可增加45～2 000倍[11]。胱抑素C是一种反映GFR的敏感指标，在各组织中的含量不会受到性别、年龄和炎症等因素干扰[12-13]。

本研究通过检测糖尿病患者NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C含量，探讨三者联合检测对早期DKD的诊断价值，以便于临床及早发现和干预患者的早期肾损害，从而防止或延缓DKD的进展。

1 对象与方法

1.1 临床资料

收集2018年1月至6月本院内分泌科诊断为T2DM患者共60例。按照“2017美国糖尿病学会(ADA)糖尿病医学诊疗标准”，以24 h尿mAlb分为单纯T2DM组(mAlb≤30 mg/24 h)和早期DKD组(mAlb在30～300 mg/24 h)。其中单纯T2DM组30例，男17例，女13例，平均年龄(51.4±7.6)岁；早期DKD组30例，男18例，女12例，平均年龄(55.1±5.7)岁。选择同期本院健康体检者30例作为对照组，男18例，女12例，平均年龄(57.0±4.2)岁。经统计分析，三组对象年龄及性别差异均无统计学意义。本研究经本院医学伦理委员会批准，受试者均签署知情同意书。

1.2 排除标准

① 肾脏实质性病变和尿路感染所引起尿白蛋白阳性者； ② 使用大剂量糖皮质激素治疗者； ③ 合并有发热、感染或其他急性疾病者； ④ 有甲亢或者其他内分泌疾病影响糖代谢者； ⑤ 肿瘤患者； ⑥ 血肌酐>178 μmol/L者； ⑦ 糖尿病酮症酸中毒或高渗状态； ⑧ 妊娠及心功能衰竭等合并症者； ⑨ 确诊为1型糖尿病及其他类型糖尿病； ⑩ 应激状态。

1.3 检测方法

所有检测对象均空腹8 h以上，早晨采集肘静脉血4 mL，按照标准操作规程离心样本，以防止溶血等干扰检测的准确度。同时留取晨尿4 mL，以1 000×g离心5 min后，取上清液检测。用贝克曼AU5800生化仪检测血清NGAL、胱抑素C和尿肌酐，免疫比浊法检测血清尾加压素Ⅱ和尿mAlb。通过MDRD公式获得估算肾小球滤过率(eGFR)。尿白蛋白与肌酐比值(UACR)=尿mAlb/尿肌酐。

1.4 统计学方法

应用SPSS 21.0进行统计分析，计量资料以均数±标准差表示，多组均数比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Tukey法；采用Pearson相关进行相关性分析。通过受试者工作特征(ROC)曲线评价各指标对DKD的诊断效能。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组间NGAL、尾加压素Ⅱ和UACR比较

与健康对照组相比，单纯T2DM组eGFR、UACR、NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C均未有明显的改变；早期DKD组除eGFR显著降低外，UACR、NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C均显著高于单纯T2DM组和健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组肾功能相关指标的检测结果

*：P<0.05，与健康对照组比较； #：P<0.05，与单纯T2DM组比较

2.2 早期DKD患者NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C的相关性分析

以UACR为自变量，分别以血清NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C的浓度为因变量，运用Pearson相关进行相关性分析，结果显示NGAL、尾加压素Ⅱ、胱抑素C与UACR均呈正相关，其r值分别为0.651、0.682 、0.723(均P<0.05)。见图1。

图1 UACR与NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C的相关性分析

2.3 NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C对早期DKD的诊断价值

胱抑素C单项检测诊断DKD的ROC曲线下面积、敏感性和特异性分别为0.875、84.50%和73.20%，均明显大于血清NGAL和尾加压素Ⅱ；血清NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C联合诊断DKD的曲线下面积、敏感性和特异性分别为0.937、92.40%和86.30%，显著高于单项检测的诊断价值。见表2。

表2 血清NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C检测对早期DKD的诊断价值

3 讨论

DKD为糖尿病常见并发症，致病机制复杂，已成为终末期肾病的主要病因之一。以往研究认为，在T2DM早期时，肾小球内的高灌注、高滤过和高压力是DKD发生的初发因素[14]。近来研究证实，肾小管异常重吸收更早于肾小球功能损伤的发生，肾小管间质的病变经管球反馈的作用，介导并加重肾小球发生功能异常，进而引起肾脏实质性的损伤，肾小管的病变程度与DKD的发生发展和预后紧密相关[15]。UACR和eGFR是目前用来诊断早期DKD的常用指标，但是部分患者在疾病早期症状不典型，且尿微量蛋白增加不明显，给疾病的早期诊断和及时治疗带来了困难[16]。

NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C是目前除UACR和eGFR外用于肾脏功能检测的热门指标，在反映肾小球和肾小管功能受损中具有重要作用[17-18]。本组病例中，我们将NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C进行联合检测运用于早期DKD的诊断。结果显示，NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C水平在健康对照组和单纯T2DM组中无明显差异，但是早期DKD组均显著升高，且与UACR均呈正相关。结果表明在T2DM患者中，血清NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C水平对早期DKD的诊断具有一定应用价值。ROC曲线结果显示，血清NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C联合检测诊断早期DKD的曲线下面积为0.937，敏感性和特异性分别为92.40%和86.30%，显著高于NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C单项检测结果，表明3项指标的联合检测可提高对早期DKD的诊断能力。

综上所述，在T2DM患者中，除了进行eGFR、UACR检测外，尚需对血清NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C进行联合检测，从而提高早期DKD诊断率。